鑫系列第二季含支链衔接子的鹅膏毒素偶联物的制作轨范

发布日期：2024-10-08 20:34 点击次数：137

1.本发明触及鹅膏毒素同系物和细胞结合分子以支链(侧链)衔接子的偶联，产生的偶联物具有更好的药代能源学性质、从而能更精准地靶向杀死非常细胞。本发明还触及鹅膏毒素同系物与细胞结合剂的偶联轨范，以及使用该偶联物靶向颐养癌症、感染和免疫性疾病的轨范。时期配景2.抗体偶联药物(adc)是小分子化疗药物与单克隆抗体通过踏实的衔接子偶联的协同组合，在曩昔的20年中，已成为一种极具长进的新式生物药物，其临床管线正在大界限且快速地增长。adc三种组分的组合产生刚劲的抗肿瘤剂，其大要将不时无法耐受的细胞毒素径直输送到癌细胞，然后内化并开释碎裂细胞的药物(l.ducry and b stump，bioconjugate chem.，2010，21，5–13；g.s.hamilton/biologicals 2015，43，318‑32)。3.与圭表化疗药物比较，早期adc疗法的颐养窗口较小。但是，衔接子时期的发展以及使用无法径直给药的高活性细胞毒性剂大大提升了adc的有用性(bander，n.h.等东说念主，adv.hematol.oncol.，2012，10，1‑16；behrens，c.r.和liu，b.，mabs，2014.6，46‑53)。但是，脱靶毒性现在却是adc药物开拓中靠近的主要挑战之一(roberts，s.a.等，regul.toxicol.pharmacol.2013，67，382‑91)。举例在临床上，ado‑trastuzumab emtansine(t‑dm1，)使用了踏实的(不可断裂的)mcc衔接子，它对her2阳性的患有出动性乳腺癌(mbc)，或仍是给与了mbc颐养，或在扶直颐养的六个月内肿瘤复发的患者有很大益处(peddi，p.和hurvitz，s.，ther.adv.med.oncol.2014，6(5)，202–209；piwko c.等，clin drug investig.2015，35(8)，487‑93；lambert，j.和chari，r.，j.med.chem.2014，57，6949‑64)。但是，将t‑dm1四肢her2阳性的无法切除的局部晚期或出动性乳腺癌患者的一线颐养药物，或者四肢her2阳性晚期胃癌的二线颐养药物，临床磨练仍是失败，与产生的毒反作用比较，它对这些患者的益处不大(ellis，pa，等，j.clin.oncol.2015，33(2015asco会议节录507)；shen，k.等，sci rep.2016，6，23262；de goeij，b.e.和lambert，j.m.curr opin immunol 2016，40，14‑23；barrios，c.h.等，j clin oncol 2016，34，(2016asco会议节录593))。4.为了处理脱靶毒性问题，在adc的瞎想上，从化学方面正在将衔接子‑有用载荷和偶联化学的范围扩大，包括彭胀有用载荷的种类，以提升衔接子‑有用载荷对靶标/靶向疾病的活性(lambert，j.m.ther deliv 2016，7，279‑82；zhao，r.y.等，2011，j.med.chem.54，3606‑23)。也有很多药物开拓者和学术机构都在高度专注于开拓适用于adc定点偶联的新颖的，可靠的特异性偶联衔接子，这些偶联物似乎具有更长的轮回半衰期，更好的功效，潜在的更小的脱靶毒性以及更好的adc的体内药代能源学(pk)特质以及坐褥时精致的批间一致性(hamblett，k.j.等，clin.cancer res.2004，10，7063‑70；adem，y.t.等，bioconjugate chem.2014，25，656‑664；boylan，n.j.bioconjugate chem.2013，24，1008–1016；strop，p.，et al 2013chem.biol.20，161‑67；wakankar，a.mabs，2011，3，161–172)。迄今为止，报说念的具体的偶联轨范包括引入工程校正的半胱氨酸(junutula，j.r.等，nat.biotechnol.2008，26，925–32；junutula，j.r.等，2010clin.cancer res.16，4769；好意思国专利8，309，300；7，855，275；7，521，541；7，723，485，wo2008/141044)，硒代半胱氨酸(hofer，t.，等，biochemistry 2009，48，12047–57；li，x.等，methods 2014，65，133–8；好意思国专利8916159us national cancer institute)，含芳醇氟标签的半胱氨酸(zhang，c.等nat.chem.2015，8，1–9)，硫代岩藻糖(okeley，n.m.等，2013bioconjugate chem.24，1650)，非自然氨基酸(axup，j.y.等，proc.nat.acad.sci.usa.2012，109，16101‑6；zimmerman，e.s.等，2014，bioconjug.chem.25，351–361；wu，p.等，2009proc.natl.acad.sci.106，3000‑5；rabuka，d.等，nat.protoc.2012，7，1052‑67；好意思国专利8778631和专利央求20100184135，wo2010/081110sutro biopharma；wo2006/069246，2007/059312，好意思国专利7，332，571，7，696，312，和7，638，299ambrx；wo2007/130453，好意思国专利7，632，492和7，829，659allozyne)，通过下列官能团再桥联被还原的分子内二硫键：二溴马来酰亚胺(jones，m.w.等，j.am.chem.soc.2012，134，1847–52)，双磺酰基试剂(badescu，g.等，bioconjug.chem.2014，25，1124–36；wo2013/190272，wo2014/064424polytherics ltd)，二溴吡啶并哒嗪二酮(maruani，a.等，nat.commun.2015，6，6645)，通过半乳糖基和唾液酸出动酶(zhou，q.等，bioconjug.chem.2014，25，510–520；好意思国专利央求20140294867sanofi‑genzyme)，甲酰基甘氨酸生成酶(fge)(drake，p.m.et al.bioconj.chem.2014，25，1331–41；carrico，i.s.等好意思国专利7，985，783；8，097，701；8，349，910，专利央求20140141025，20100210543redwood bioscience)，磷酸泛肽基出动酶(pptases)(grünewald，j.et al.bioconjug.chem.2015，26，2554–62)，分选酶a(beerli，r.r.，et al.plos one 2015，10，e0131177)，用streptoverticillium mobaraense转谷氨酰胺酶(mtg)引入谷氨酰胺标签(strop，p.，bioconj.chem.，2014，25，855–62；strop，p.，et al.，chem.biol.2013，20，161–7；好意思国专利8，871，908rinat‑pfizer)或微生物转谷氨酰胺酶(mtgase)引入谷氨酰胺标签(dennler，p.等，2014，bioconjug.chem.25，569–78；siegmund，v.等，angew.chemie‑int.ed.2015，54，13420–4；好意思国专利央求20130189287innate pharma；好意思国专利7，893，019bio‑ker s.r.l.(it))，通过一种在卵白质主链外部酿成异肽键‑肽键的酶/细菌(kang，h.j.等，science 2007，318，1625–8；zakeri，b.等，proc.natl.acad.sci.usa 2012，109，e690–7；zakeri，b.&howarth，m.j.am.chem.soc.2010，132，4526–7)。5.咱们仍是公开了几种偶联轨范，大要从头桥接自然抗体链间二硫化物被还原产生的一双硫醇，举例使用溴马来酰亚胺和二溴马来酰亚胺衔接子(wo2014/009774)，2，3‑二取代琥珀酸/2‑单取代/2，3‑二取代富马酸或马来酸衔接子(wo2015/155753，wo20160596228)，乙炔二羧基衔接子(wo2015/151080，wo20160596228)或肼衔接子(wo2015/151081)。与抗体上的半胱氨酸或赖氨酸残基偶联的传统非选拔性轨范比较，用这些衔接子和偶联轨范制备的adc的颐养窗口更大。在此咱们公开一种含有长支链衔接子的鹅膏毒素偶联物。长支链衔接子不错防护抗体药物偶联物被水解酶如卵白酶或酯酶等水解，使偶联物在轮回系统中愈加踏实，产生更少毒反作用。6.鹅膏菌毒素，主要包括鹅膏毒素、鬼笔毒素和毒伞素(wieland，t.，faulstich，h.，crc crit.rev.biochem.1978，5(3):185‑260；vetter，j.，toxicon 1998，36(1):13–24；weiland，t.，和faulstich，h.1983，来自鹅膏菌的肽毒素，585‑635；《自然毒素手册》，卷i《植物和真菌毒素》，r.f.keeler和a.t.tu裁剪，marcel dekker，inc.new york，ny；wieland，t.，int j.pept.protein res.，1983，22，257‑76)是抗体偶联物的有用细胞毒剂(zhao，r.等，wo2017046658)。本发明的鹅膏毒素偶联物含有长支链衔接子，可延长偶联物在靶向寄递经由中的半衰期，最大程度地减小对非靶细胞、组织和器官的流露，药物具有更低的脱靶毒性，更大的颐养窗口。7.发明概述8.本发明描绘了通过支链衔接子衔接的鹅膏毒素同系物与抗体的偶联物，还描绘了使用该衔接子将鹅膏毒素同系物与抗体偶联的轨范。9.此项发明的一个方面，含有支链衔接子的偶联物以结构式(i)暗示：[0010][0011]其中[0012]“_”代表单键；n为1到30；[0013]t是细胞结合剂或分子，选自抗体、单链抗体、与靶细胞结合的抗体片断、单克隆抗体、单链单克隆抗体、结合靶细胞的单克隆抗体片断、嵌合抗体、结合靶细胞的嵌合抗体片断、结构域抗体、结合靶细胞的结构域抗体片断、adnectin类抗体、darpin卵白、淋巴因子、激素、维生素、滋长因子、集落刺激因子、养分转运分子(转铁卵白)和衔接在白卵白、团聚物、树状大分子、脂质体、纳米粒子、囊泡或(病毒)衣壳上的细胞结合肽、卵白质或小分子；[0014]l1和l2是由c、n、o、s、si和p等原子组成的链状结构，优选具有0‑500个原子的，共价衔接w和v1，v1和v2。组成l1和l2的原子不错以任何化学阵势相组合，举例酿成亚烷基、亚烯基和亚炔基、醚、聚氧化烯、酯、胺、亚胺、多胺、肼、腙、酰胺、脲、氨基脲、二氨基脲、烷氧基胺、氨基甲酸酯、氨基酸、肽、酰氧基胺、异羟肟酸或上述的组合。优选的l1和l2，雷同或不同，独迅速选自于o、nh、n、s、p、nnh、nhnh、n(r3)、n(r3)n(r3')、ch、co、c(o)nh、c(o)o、nhc(o)nh、nhc(o)o；如下列结构式的聚乙烯氧基：(och2ch2)por3、或(och2ch(ch3))por3、或nh(ch2ch2o)pr3、或nh(ch2ch(ch3)o)pr3、或n[(ch2ch2o)pr3]‑[(ch2ch2o)p'r3']或(och2ch2)pcoor3、或ch2ch2(och2ch2)pcoor3，其中p和p'是稳固选自0到约1000的整数，或它们的组合；c1‑c8烷基；c2‑c8杂烷基、烷基环烷基、杂环烷基；c3‑c8芳基、芳烷基、杂环、碳环、环烷基、杂烷基环烷基、烷基羰基、杂芳基；或(aa)r，r＝1‑12(1至12个氨基酸单元)，包括自然或非自然氨基酸，雷同或不同序列的二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或十二肽单元；[0015]w是一个延展体单元，不时是自毁掉的间隔体、一个多肽单元、腙、二硫化物、硫醚、酯或酰胺键；w是1或2或3；[0016]v1和v2是稳固的间隔体单元，选自o、nh、s、c1‑c8烷基；c2‑c8杂烷基、烯基或炔基；c3‑c8芳基、杂环、碳环、环烷基、烷基环烷基、杂环烷基、杂芳烷基、杂烷基环烷基、或烷羰基；或(aa)r、r＝1‑12(1‑12个氨基酸单元)，包括自然或非自然氨基酸，雷同或不同序列的二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或十二肽单元；或(ch2ch2o)p，p为0‑1000；v1和v2稳固为0、1或2，但v1和v2不同期为0，当v1或v2为0时，意味着侧链q1或q2片断缺省。[0017]q1和q2独迅速由式(i‑q1)暗示：[0018][0019]其中是衔接至l1或l2的位置，g1和g2独迅速为oc(o)、nhc(o)、c(o)、ch2、nh、oc(o)nh、nhc(o)nh、o、s、b、p(o)(oh)、nhp(o)(oh)、nhp(o)(oh)nh、ch2p(o)(oh)nh、op(o)(oh)o、ch2p(o)(oh)o、nhs(o)2、nhs(o)2nh、ch2s(o)2nh、os(o)2o、ch2s(o)2o、ar、arch2、aro、arnh、ars、arnr1、(aa)r、(r＝1‑12)；x1和x2独迅速为o、ch2、s、nh、n(r12)、+nh(r12)、+n(r12)(r13)、c(o)、oc(o)、oc(o)o、oc(o)nh、nhc(o)nh；y2为o、nh、nr1、ch2、s；g3为oh、sh、or1、sr1、oc(o)r1、nhc(o)r12、c(o)r12、ch3、nh2、nr12、+nh(r12)、+n(r12)(r13)、c(o)oh、c(o)nh2、nhc(o)nh2、bh2、br12r13、p(o)(oh)2、nhp(o)(oh)2、nhp(o)(nh2)2、s(o)2(oh)、(ch2)q1c(o)oh、(ch2)q1p(o)(oh)2、c(o)(ch2)q1c(o)oh、oc(o)(ch2)q1c(o)oh、nhc(o)(ch2)q1c(o)oh、co(ch2)q1p(o)(oh)2、nhc(o)o(ch2)q1c(o)oh、oc(o)nh(ch2)q1c(o)oh、nhco(ch2)q1p(o)(oh)2、nhc(o)(nh)(ch2)q1c(o)oh、conh(ch2)q1p(o)(oh)2、nhs(o)2(ch2)q1c(o)oh、co(ch2)q1s(o)2(oh)、nhs(o)2nh(ch2)q1c(o)oh、os(o)2nh(ch2)q1c(o)oh、nhco(ch2)q1s(o)2(oh)、nhp(o)(oh)(nh)(ch2)q1c(o)oh、conh(ch2)q1s(o)(oh)、op(o)(oh)2、(ch2)q1p(o)(nh)2、nhs(o)2(oh)、nhs(o)2nh2、ch2s(o)2nh2、os(o)2oh、os(o)2or1、ch2s(o)2or1、ar、arr12、aroh、arnh2、arsh、arnhr12或(aa)q1、p1、p2和p3独速便是0‑100，但是不同期为0，q1和q2独速便是0‑24；[0020]优选的q1和q2独速便是c2‑c90聚羧酸或c‑2‑c90聚烷基胺、c6‑c90寡糖或多糖、c6‑c90含季铵阳离子和羧酸阴离子的两性离子或含季铵阳离子和磺酸阴离子的两性离子(psb)、可生物降解的团聚物、如聚乳酸/酒精酸(plga)、聚(丙烯酸酯)、脱乙酰壳多糖、n‑(2‑羟丙基)甲基丙烯酰胺的共聚物、聚[2‑(甲基丙烯酰氧基)乙基磷酸胆碱](pmpc)、聚‑l‑谷氨酸、聚(丙交酯‑共‑乙交酯)(plg)、聚(乙二醇)(peg)、聚(丙二醇)(ppg)、聚(乙二醇)改性肽、聚(乙二醇)改性脂质体、聚(乙二醇)改性烷基羧酸、聚(乙二醇)改性烷基胺、透明质酸(ha)(糖胺聚糖)、肝素或硫酸乙酰肝素(hsgag)、硫酸软骨素或硫酸皮素(csgag)、聚(乙二醇)改性的烷基硫酸盐、聚(乙二醇)改性的烷基磷酸盐或聚(乙二醇)改性的烷基季铵盐；[0021]d是具有以下结构式(ii)的鹅膏毒素同系物：[0022][0023]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0024]其中‑‑‑‑‑独速便是与w衔接的位点；[0025]芳醇(吲哚)环上的单键是指它衔接芳醇环上的纵容一个碳；[0026]暗示可选的单键或可缺省的键；[0027]r1和r2独迅速选自h、oh、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch(ch3)ch2oh、ch(oh)ch3、c1‑c8烷基、–or12(酯)、c2‑c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)、–oc(＝o)or12‑(碳酸脂)、–oc(＝o)nhr12(氨基甲酸酯)；c3‑c8芳基、杂环、碳环、环烷基、杂环烷基、杂芳烷基、烷基羰基；[0028]r3和r4独迅速选自h、oh、–or12(酯)、–ocor12(酯)、–ococh3(乙酸酯)、–ocoor12(碳酸酯)、–oc(＝o)nhr12(氨基甲酸酯)、‑op(o)(or12)(or12’)(磷酸酯)、op(o)(nhr12)(nhr12’)(磷酰胺)、o‑so3‑、或o‑糖苷；[0029]r5选自h、oh、nh2、nhoh、nhnh2、–or12、–nhr12、nhnhr12、–nr12r12’、n(h)(r12)r13co(aa)r、(氨基酸或肽，其中aa是氨基酸或多肽、r是0‑100)；[0030]r6选自h、oh、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch(ch2oh)2、ch(ch3)oh、ch2ch2oh、proh、buoh、c1～c8 alkyl、–or12(酯)、c2～c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)；c3～c8芳基、杂环或碳环；[0031]r7、r8和r9独迅速选自h、oh、ch3、ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch2ch(oh)ch2oh、ch(ch2oh)2、ch2c(oh)(ch2oh)2、ch2c(oh)(ch3)(ch2oh)、ch2c(oh)(ch(ch3)2)(ch2oh)、ch2ch2oh、proh、buoh、ch2cooh、ch2ch2cooh、ch(oh)cooh、ch2conh2、ch2ch2conh2、ch2ch2ch2ch2nh2、ch2ch2ch2nhc(＝nh)nh2、c1～c8 alkyl、ch2ar、ch2sh、ch2sr12、ch2ssr12、ch2ssar、ch2ch2sch3、–or12(酯)、c2～c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)；c3～c8芳基、杂环或碳环；[0032]r10和r11独迅速选自h、nh2、oh、sh、no2、卤素、‑nhoh、–n3(叠氮基)；‑cn(氰基)；c1～c8烷基、c2～c8烯基、炔基、杂烷基；c3～c8芳基、杂环或碳环；–or12(酯)、–ocor12(酯)、–ococh3(乙酸酯)、–oc(o)or12(碳酸酯)、‑oc(o)ch(r12)nhaa(aa是氨基酸基团)、‑nr12r12’(胺)、‑nr12cor12’(酰胺)、‑r12nhcor12’(烷基酰胺)、‑r12nhr12’(胺)、‑nhr12nhr12’nhr12”(胺)；–r12nconr12’(尿素)；–r12ncoor12’(氨基甲酸酯)；–oconr12r12’(氨基甲酸酯)；–nr12(c＝nh)nr12’r12”(胍)；–r12nhco(aa)p、–r12nh r12’co(aa)p、–nr12co(aa)p、(氨基酸或肽，其中aa是氨基酸或多肽，p为0‑6)；–n(r12)conr12’r12”(尿素)；–ocsnhr12(硫代氨基甲酸酯)；‑r12sh(硫基)；–r12sr12’(硫化物)；–r12ssr12’(二硫化物)；–s(o)r12(亚砜)；–s(o2)r12(砜)；–so3、hso3、hso2、或hso3‑、so32‑或‑hso2‑的盐(亚硫酸盐)；–oso3‑；‑n(r12)soor12’(磺酰胺)；h2s2o5或s2o52‑的盐(焦亚硫酸氢盐)；po3sh3、po2s2h2、pos3h2、ps4h2或po3s3‑、po2s23‑、pos33‑、ps43‑的盐(单‑、二‑、三‑、和四‑硫代磷酸盐)；(r12o)2posr12’(硫代磷酸酯)；hs2o3或s2o32‑盐(硫代硫酸盐)；hs2o4或s2o42‑的盐(连二亚硫酸盐)；(p(＝s)(or12)(s)(oh)或与阳离子酿成的盐(二硫代磷酸盐)；‑n(r12)or12’(羟胺繁衍物)；r12c(＝o)noh或与阳离子酿成的盐(异羟肟酸盐)；hoch2so2‑或其盐(甲醛次硫酸盐)；–n(r12)cor12’(酰胺)；r12r12’r12”npo3h(三烷基氨基磷酸酯或氨基磷酸)；或arar’ar”npo3h(三芳基磷酸)；op(o)(om1)(om2)、och2op(o)(om1)(om2)、oso3m1；o‑糖苷(葡萄糖苷、半乳糖苷、甘雨糖苷、葡萄糖醛酸苷、阿洛糖苷、果糖苷等)、nh‑糖苷、s‑糖苷或ch2‑糖苷；m1和m2独迅速为h、na、k、ca、mg、nh4、nr1’r2’r3’；r1’、r2’和r3’独迅速为h、c1～c8烷基；ar、ar’、和ar”为c3‑c8芳基或杂芳基；[0033]r12、r12’、和r12”独迅速选自h、c1～c8烷基；c2～c8烯基、炔基、杂烷基；c3～c8芳基、杂芳基、杂环或碳环；或缺省；[0034]x为s、o、nh、so、so2、或ch2；[0035]m′是0或1；n是1‑30。[0036]本发明的另一方面，含有支链衔接子的偶联物的结构式暗示如(iii)：[0037][0038]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2、n和t的界说同结构式(i)；[0039]本发明的另一个方面，支链衔接子化合物的结构如(iv)所示、它不错便利地与细胞结合分子t反馈，酿成式(i)中的偶联物：[0040][0041]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2及n的界说同结构式(i)；lv1是下文所述的官能团。[0042]本发明的另一个方面，支链衔接子化合物的结构如(v)所示、它不错便利地与细胞结合分子t反馈，酿成式(iii)中的偶联物：[0043][0044]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2及n的界说同结构式(i)。[0045]lv1和lv2为雷同或不同的反馈官能团，这些官能团不错与细胞结合分子上的硫醇、胺、羧酸、硒醇、酚或羟基发生反馈。lv1和lv2独迅速选自羟基(oh)；氟(f)；氯(cl)；溴(br)；碘(i)；硝基酚基；n‑羟基琥珀酰亚胺(nhs)基；苯酚基；二硝基苯酚基；五氟苯酚基；四氟苯酚基；三氟苯酚基；二氟苯酚基；一氟苯酚基；五氯苯酚基；三氟甲磺酰基；咪唑基；二氯苯酚基；三氯苯酚基；四氯苯酚基；1‑羟基苯并三唑基；甲苯磺酰基；甲磺酰基；2‑乙基‑5‑苯基异恶唑‑3’‑磺酰基、酸酐或与其它酸酐作用酿成的酸酐，举例乙酸酐、甲酸酐；或与多肽缩合试剂、mitsunobu反馈考剂作用生成的中间体。缩合剂的例子如下：1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edc)、二环己基碳二亚胺(dcc)、n，n'‑二异丙基碳二亚胺(dic)、n‑环己基‑n'‑(2‑吗啉代‑乙基)碳二亚胺甲基对甲苯磺酸盐(cmc或cme‑cdi)、1，1'‑羰基二咪唑(cdi)、氧‑(苯并三唑‑1‑)基)‑n，n，n’，n’‑四甲基脲四氟硼酸盐(tbtu)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(1h‑苯并三唑‑1‑基)‑六氟磷酸铵(hbtu)、(苯并三唑‑1‑基氧基)三(二甲基氨基)‑六氟磷酸盐(bop)、(苯并三唑‑1‑基氧基)三吡咯烷基六氟磷酸盐(pybop)、氰基膦酸二乙酯(depc)、氯‑n，n，n'，n'‑四甲基甲脒六氟磷酸盐、1‑[双(二甲基氨基)亚甲基]‑1h‑1，2，3‑三唑并[4，5‑b]吡啶3‑氧六氟磷酸盐(hatu)、1‑[(二甲氨基)(吗啉代)亚甲基]‑1h‑[1，2，3]三唑并[4，5‑b]吡啶‑1‑鎓3‑氧六氟磷酸盐(hdma)、2‑氯‑1，3‑二甲基‑咪唑六氟磷酸盐(cip)、六氟磷酸氯代吡咯烷酮鎓(pyclop)、氟‑n，n，n'，n'‑双(四亚甲基)甲脒六氟磷酸盐(btffh)、n，n，n'，n'‑四甲基‑s‑(1‑氧代‑2‑吡啶基)硫脲六氟磷酸盐、氧‑(2‑氧代‑1(2h)吡啶基)‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(tptu)、s‑(1‑氧代‑2‑吡啶基)n，n，n'，n'‑四甲基硫脲四氟硼酸盐、氧‑[(乙氧基羰基)‑氰基甲基氨基]‑n，n，n'，n'‑六氟磷酸四甲基脲(hotu)、(1‑氰基‑2‑乙氧基‑2‑氧代乙基氨基氧基)二甲氨基‑吗啉代‑六氟磷酸盐(comu)、氧‑(苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n'，n'‑双(四亚甲基)六氟磷酸盐(hbpyu)、n‑芐基‑n'‑环己基‑碳二亚胺(有或莫得团聚物结合)、二吡咯烷基(n‑琥珀酰亚胺基氧基)碳鎓六氟磷酸盐(hspyu)、氯二吡咯烷基六氟磷酸盐(pyclu)、2‑氯‑1，3‑二甲基咪唑四氟硼酸盐(cib)、(苯并三唑‑1‑基氧基)二呱啶碳六氟磷酸盐(hbpipu)、氧‑(6‑氯苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(tctu)、溴代(二甲基氨基)‑六氟磷酸盐(brop)、丙基膦酸酐(ppaca、)、2‑吗啉代乙基异氰化物(mei)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(n‑琥珀酰亚胺基)六氟磷酸盐(hstu)、2‑溴‑1‑乙基‑吡啶鎓四氟硼酸盐(bep)、氧‑[(乙氧基羰基)氰基‑亚甲基氨基]‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(totu)、4‑(4，6‑二甲氧基‑1，3，5‑三嗪‑2‑基)‑4‑甲基吗啉氯化物(mmtm、dmtmm)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(n‑琥珀酰亚胺基)脲四氟硼酸(tstu)、o‑(3，4‑二氢‑4‑氧代‑1，2，3‑苯并三嗪‑3‑基)‑n，n，n’，n’‑四甲基脲四氟硼酸盐(tdbtu)、1，1'‑(偶氮二羰基)‑二呱啶(add)、二‑(4‑氯芐基)偶氮二羧酸酯(dcad)、偶氮二羧酸二叔丁酯(dbad)、偶氮二羧酸二异丙酯(diad)、偶氮二羧酸二乙酯(dead)。另外，lv1和lv2不错是酸酐，或与其它c1‑c8酸酐作用酿成的酸酐。[0046]本发明进一步触及(i)和(iii)中的细胞结合分子‑药物偶联物的制备轨范，以及(i)和(iii)中的偶联物的诓骗。附图阐发[0047]图1骄气了鹅膏毒素类似物片断的合成总方针。[0048]图2骄气了鹅膏毒素类似物片断的合成。[0049]图3骄气了鹅膏毒素类似物的合成。[0050]图4骄气了鹅膏毒素类似物的合成。[0051]图5骄气了含支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成。[0052]图6骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0053]图7骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0054]图8骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0055]图9骄气了含支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成[0056]图10骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0057]图11骄气了含支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成。[0058]图12骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0059]图13骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0060]图14骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0061]图15骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0062]图16骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0063]图17骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0064]图18骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0065]图19骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0066]图20骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0067]图21骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0068]图22骄气了含支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成。[0069]图23骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0070]图24骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0071]图25骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成偏激与抗体的偶联。[0072]图26骄气了含有支链衔接子的鹅膏毒素类似物的合成。[0073]图27骄气了在东说念主胃癌n87细胞模子上，在6mg/kg剂量下静脉一次打针，偶联化合物78a、146、154、167、197、198、216、240、s‑2与t‑dm1的抗肿瘤作用的比较。[0074]图28骄气了通过不雅察小鼠体重(bw)12天的变化，对adc偶联物154、146、216、s‑2和t‑dm1进行急性毒性筹商。时期杀青要素：[0075]界说[0076]“烷基”是指在烷烃上颤抖一个或两个氢原子而产生的脂肪烃基团或单价基团。它不错是直链或是支链的，在链中具有c1‑c8(1‑8个碳原子)。“支链”是指直链烷基上衔接有一个或多个低碳数的烷基，如甲基、乙基或丙基。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、3‑戊基、辛基、壬基、癸基、环戊基、环己基、2，2‑二甲基丁基、2，3‑二甲基丁基、2，2‑二甲基戊基、2，3‑二甲基戊基、3，3‑二甲基戊基、2，3，4‑三甲基戊基、3‑甲基‑己基、2，2‑二甲基己基、2，4‑二甲基己基、2，5‑二甲基己基、3，5‑二甲基己基、2，4‑二甲基戊基、2‑甲基庚基、3‑甲基庚基、正庚基、异庚基、正辛基和异辛基。c1‑c8烷基不错是未被取代的或被一个或多个基团取代，包括但不限于‑c1‑c8烷基、‑o‑(c1‑c8烷基)、‑芳基、‑c(o)r'、‑oc(o)r'、‑c(o)or'、‑c(o)nh2，‑c(o)nhr'、‑c(o)n(r')2、‑nhc(o)r'、‑sr'、‑s(o)2r'、‑s(o)r'、‑oh、‑卤素、‑n3、‑nh2、‑nh(r')、‑n(r')2和‑cn；其中每个r'独迅速选自于‑c1‑c8烷基和芳基。[0077]“卤素”指氟、氯、溴或碘原子；优选氟和氯原子。[0078]“杂烷基”指其中1至4个碳原子独迅速被选自o、s和n的杂原子所取代的c2‑c8烷基。[0079]“碳环”指含有3到8个碳原子的饱和或不饱和单环，或含有7到13个碳原子的饱和或不饱和双环。单环碳环有3到6个环原子，典型的有5或6个环原子。双环碳环有7到12个环原子，组成[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]的双环系统，或有9个或10个环原子，组成[5、6]或[6，6]的双环系统。具有代表性的c3‑c8的碳环包括但不限于：‑环丙基、‑环丁基、‑环戊基、‑环戊二烯基、‑环己基、‑环己烯基、‑1，3‑环己二烯基、‑1，4‑环己二烯基、‑环庚基、‑1，3‑环庚二烯基、‑1，3，5‑环庚三烯基、‑环辛基和‑环辛二烯基。[0080]c3‑c8碳环不错是未被取代的或被一个或多个基团取代，包括但不限于‑c1‑c8烷基、‑o‑(c1‑c8烷基)、‑芳基、‑c(o)r'、‑oc(o)r'、‑c(o)or'、‑c(o)nh2、‑c(o)nhr'、‑c(o)n(r')2、‑nhc(o)r'、‑sr'、‑s(o)r'、‑s(o)2r'、‑oh、‑卤素、‑n3、‑nh2、‑nh(r')、‑n(r')2及‑cn；其中每个r'独迅速选自‑c1‑c8烷基和芳基。[0081]“烯基”指含有碳‑碳双键的直链或支链脂肪烃基团，链内含有2‑8个碳原子。示例性的烯基包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、异丁烯基、3‑甲基丁‑2‑烯基、正戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基。[0082]“炔基”指含有碳‑碳三键的直链或支链脂肪烃基团，链内含有2‑8个碳原子。示例性的炔基包括乙炔基、丙炔基、正丁炔基、2‑丁炔基、3‑甲基丁炔基、5‑戊炔基、正戊炔基、己炔基、庚炔基和辛炔基。[0083]“亚烷基”是指含1‑18个碳原子的饱和的支真金不怕火或直链或环状烃基，并带有两个通过从母体烷烃的雷同或两个不同碳原子上颤抖两个氢原子而产生的一价目田基。典型的亚烷基包括但不限于：亚甲基(‑ch2‑)、1，2‑乙基(‑ch2ch2‑)、1，3‑丙基(‑ch2ch2ch2‑)、1，4‑丁基(‑ch2ch2ch2ch2‑)等。[0084]“亚烯基”指含2‑18个碳原子的不饱和的支真金不怕火或直链或环状烃基，并带有两个通过从母体烯烃的雷同或两个不同碳原子上颤抖两个氢原子而产生的一价目田基。典型的亚烯基包括但不限于：1，2‑亚乙基(‑ch＝ch‑)。[0085]“亚炔基”指含2‑18个碳原子的不饱和的支真金不怕火或直链或环状烃基，并带有两个通过从母体炔的雷同或两个不同碳原子上颤抖两个氢原子而产生的一价目田基。典型的亚炔基包括但不限于：乙炔、炔丙基和4‑戊炔基。[0086]“芳基”或“芳醇基”指由一个或多个环组成的芳醇或杂芳醇基团，包含三至十四个碳原子，优选六至十个碳原子。术语“杂芳醇基团”是指芳醇基团上的一个或几个碳，最优是一个、两个、三个或四个碳原子，被氧(o)、氮(n)、硅(si)、硒(se)、磷(p)或(s)所取代，优选被氧、硫和氮所取代而产生的基团。术语“芳基”或“芳醇基”也指其中一个或几个氢原子独迅速被‑r’、卤素、‑or’、‑sr’、‑nr’r”、‑n＝nr’、‑n＝r’、‑nr’r”、‑no2、‑s(o)r’、‑s(o)2r’、‑s(o)2or’、‑os(o)2or’、‑pr’r”、‑p(o)r’r”、‑p(or’)(or”)、‑p(o)(or’)(or”)或‑op(o)(or’)(or”)所取代而产生的芳醇基团。其中r’和r”独迅速为氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基、芳基、芳烷基、羰基或其药用盐。[0087]“杂环”指其中一到四个环碳原子独迅速被o、n、s、se、b、si或p等杂原子所取代而产生的的环结构。优选的杂原子是o、n和s。在《化学与物理手册》第78版的225‑226页(the handbook of chemistry and physics，78th edition，crc press，inc.，1997‑1998，p.225to 226)上也有杂环化合物的干系描绘，在此引作参考。优选的非芳基杂环包括环氧基、氮丙啶基、硫杂丙基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、环氧乙烷基、四氢呋喃基、二氧戊环基、四氢吡喃基、二恶烷基、二氧戊环基、呱啶基、呱嗪基、吗啉基、吡喃基、咪唑啉基、吡咯啉基、吡唑啉基、噻唑烷基、四氢噻喃基、二噻烷基、硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡啶基、二氢吡啶基、四氢嘧啶基、二氢噻喃基、氮杂环庚烷基，以及上述基团与苯基缩合得到的稠环体系。[0088]术语“杂芳基”或“芳基杂环”是指含3到14，优选5至10个原子的芳醇性杂环、包含单环、双环或多环。示例包括吡咯基、吡啶基、吡唑基、噻吩基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基、吲哚基、喹啉基、嘌呤基、咪唑基、噻吩基、噻唑基、苯并噻唑基、呋喃基、苯并呋喃基、1，2，4‑噻二唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异喹啉基、苯并噻吩基、异苯并呋喃基、吡唑基、咔唑基、苯并咪唑基、异恶唑基、吡啶基‑n‑氧化物，以及上述基团与苯基缩合得到的稠环体系。[0089]“烷基”、“环烷基”、“烯基”、“炔基”、“芳基”、“杂芳基”、“杂环”等，也包含各自对应的“亚烷基”、“亚环烷基”、“亚烯基”、“亚炔基”、“亚芳基”、“亚杂芳基”、“亚杂环”等，为报告通俗，本专利央求对它们未作念竣工分裂。[0090]“芳烷基”指一类非环烷基，其中一个与碳原子(不时为末端或sp3碳原子)键合的氢原子被芳基取代。典型的芳烷基包括芐基、2‑苯基乙‑1‑基、2‑苯基乙烯‑1‑基、萘基甲基、2‑萘基乙‑1‑基、2‑萘基乙‑1‑基、萘并芐基、2‑萘基苯基‑1‑基等。[0091]“杂芳烷基”指一类非环烷基，其中一个与碳原子(不时为末端或sp3碳原子)键合的氢原子被杂芳基取代。杂芳烷基的实例有2‑苯并咪唑基甲基、2‑呋喃基乙基。[0092]“羟基保护基”的实例包括甲氧基甲基醚、2‑甲氧基乙氧基甲基醚、四氢吡喃基醚、芐基醚、对甲氧基芐基醚、三甲基甲硅醚、三乙基硅醚、三异丙基硅醚、叔丁基二甲基硅醚、三苯基甲基硅醚、乙酸酯、取代乙酸酯、特戊酸酯、苯甲酸酯、甲磺酸酯和对甲苯磺酸酯。[0093]“离去基团”指不错被另一个官能团取代的官能团。这些离去基团是才能域公知的、实例包括卤化物(如氯化物、溴化物和碘化物)、甲磺酰基、对甲苯磺酰基和三氟甲磺酰基。优选的离去基团选自硝基苯酚基；n‑羟基琥珀酰亚胺基(nhs)；苯酚基；二硝基苯酚基；五氟苯酚基；四氟苯酚基；二氟苯酚基；一氟苯酚基；五氯苯酚基；三氟甲磺酰基；咪唑基；氯酚基；四氯苯酚基；1‑羟基苯并三唑基；甲苯磺酰基；甲磺酰基；2‑乙基‑5‑苯基异恶唑‑3'‑磺酰基，酸酐或与其它酸酐作用酿成的酸酐，举例乙酸酐、甲酸酐；或与多肽缩合试剂、mitsunobu反馈考剂作用生成的中间体。[0094]以下缩写为本发明所领受，其界说为：boc，叔丁氧基羰基；brop，溴代十四烷基鏻六氟磷酸盐；cdi，1，1'‑羰基二咪唑；dcc，二环己基碳二亚胺；dce，二氯乙烷；dcm，二氯甲烷；dead，偶氮二甲酸二乙酯；diad，偶氮二甲酸二异丙基酯；dibal‑h，二异丁基氢化铝；dipea或dea，二异丙基乙胺；depc，二乙基氰基磷酸酯；dma，n，n‑二甲基乙酰胺；dmap，4‑(n，n‑二甲基氨基)吡啶；dmf，n，n‑二甲基甲酰胺；dmso，二甲基亚砜；dtpa，二亚乙基三胺五乙酸；dtt，二硫苏糖醇；edc，1‑(3‑二甲基氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐；esi‑ms，电喷雾质谱；etoac，乙酸乙酯；fmoc，n‑(9‑芴基甲氧基羰基)；hatu，o‑(7‑氮杂苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n'，n'‑四甲基脲六氟磷酸盐；hobt，1‑羟基苯并三唑；hplc，高效液相色谱；nhs，n‑羟基琥珀酰亚胺；mecn，乙腈；meoh，甲醇；mmp，4‑甲基吗啉；pab，对氨基苯甲酸；pbs，磷酸盐缓冲液(ph 7.0‑7.5)；ph，苯基；phe，l‑苯丙氨酸；pybrop，溴‑三‑吡咯烷‑鏻六氟磷酸盐；peg，聚乙二醇；sec，尺寸排阻色谱；tcep，三(2‑羧乙基)膦；tfa，三氟乙酸；thf，四氢呋喃；val，缬氨酸；tlc，薄层色谱；uv是紫外线。[0095]“氨基酸”不错是自然或非自然的，优选α‑氨基酸。自然氨基酸不错由遗传密码所编码，它们是丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、色氨酸和缬氨酸。非自然氨基酸是卵白质氨基酸的繁衍物，包括羟脯氨酸、羊毛硫氨酸、2‑氨基异丁酸、脱氢丙氨酸、γ‑氨基丁酸(神经递质)、鸟氨酸、瓜氨酸、β‑丙氨酸(3‑氨基丙酸)、γ‑羧基谷氨酸、硒代半胱氨酸(存在于很多非真核以及大多数真核细胞中、但不是由dna径直进行编码)、吡咯赖氨酸(仅在一些古细菌和一种细菌中发现)、n‑甲酰基甲硫氨酸(不时是细菌、线粒体和叶绿体中卵白质中当先的氨基酸)、5‑羟色氨酸、l‑二羟基苯丙氨酸、三碘甲腺原氨酸、l‑3，4‑二羟基苯丙氨酸(dopa)和o‑磷酸丝氨酸。术语“氨基酸”还包括氨基酸同系物和模拟物。同系物是具有与自然氨基酸雷同结构通式h2n(r)chco2h的化合物，其中r在自然氨基酸里。同系物的实例包括高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸‑亚砜和甲硫氨酸甲基锍。更优的是氨基酸模拟物，它是具有与α‑氨基酸的化学结构不同、但是作用阵势类似的化合物。自然氨基酸多为“l”立体化学构型，“非自然氨基酸”也用于代表“d”构型的氨基酸。在本专利央求中使用1至8个氨基酸时、其序列优选为卵白水解酶可识别的序列。很多水解酶识别序列是才能域已知的，不错参见：matayoshi等.science 247：954(1990)；dunn等.meth.enzymol.241：254(1994)；seidah等.meth.enzymol.244：175(1994)；thornberry，meth.enzymol.244：615(1994)；weber等.meth.enzymol.244：595(1994)；smith等.meth.enzymol.244：412(1994)；及bouvier等.meth.enzymol.248：614(1995)；此处引作参考。出奇是选自以下序列：val‑cit、ala‑val、ala‑ala、val‑val、val‑ala‑val、lys‑lys、ala‑asn‑val、val‑leu‑lys、cit‑cit、val‑lys、ala‑ala‑asn、asp‑lys、asp‑glu、glu‑lys、lys、cit、ser及glu。[0096]“糖苷”是糖通过糖苷键在其异头碳上与另一基团键合得到的分子。糖苷不错通过o‑(产生o‑糖苷)、n‑(产生糖基胺)、s‑(产生硫代糖苷)或c‑(产生c‑糖苷)糖苷键衔接，其实验式为cm(h2o)n(其中m不错不同于n、m、n<36)，本发明中的糖苷包括葡萄糖(右旋糖)、果糖(左旋糖)、阿洛糖、阿卓糖、甘雨糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔罗糖、半乳糖胺、氨基葡萄糖、唾液酸、n‑乙酰氨基葡萄糖、磺酰基奎诺糖(6‑脱氧‑6‑磺酰基‑d‑吡喃葡萄糖)、核糖、阿拉伯糖、木糖、来苏糖、山梨糖醇、甘雨醇、蔗糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、麦芽糖糊精、棉子糖、葡萄糖醛酸(葡糖苷酸)和水苏糖。它不错是d或l的构型、5原子环状呋喃糖的姿色、6原子环状吡喃糖的姿色，或瑕瑜环姿色、α‑异构体(异头碳的‑oh在haworth投影碳原子平面之下)、或β‑异构体(异头碳的‑oh在haworth投影碳原子平面之上)。本发明中亦称为单糖、二糖、多元醇或含3‑6个糖单元的低聚糖。[0097]本发明中的“抗体”指全长免疫球卵白分子或全长免疫球卵白分子的免疫活性部分，如含有抗原结合位点的分子，该结合位点免疫特异性地与靶标抗原或部分靶标抗原结合，靶标包括但不限于，癌细胞或产生与自身免疫疾病干系的自免疫抗体的细胞。本发明中的免疫球卵白不错是免疫球卵白的任何类型(举例igg、ige、igm、igd、iga和igy)、类别(举例igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2)或子类。免疫球卵白不错来自任何物种，但优选的免疫球卵白开头于东说念主、鼠或兔。本发明的抗体优选是单克隆抗体，包括但不限于多克隆、单克隆、双特异性、东说念主、东说念主源化或嵌合抗体，单链抗体，fv、fab片断、f(ab')片断、f(ab')2片断、由fab抒发库产生的片断，抗独到型(抗id)抗体，cdr和任何能免疫特异性地结合癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原的上述结构的表位结合片断。[0098]“对映异构体”，也称为“光学异构体”，是两个立体异构体中的一个，它们是互相的镜像，不可重迭(不等同)，就像东说念主的阁下手，除非沿着某一平面被翻转，它们是不可重迭的(仅通过编削主义不可让双手重迭)。化合物中的单个手性原子或类似的结构特征使得该化合物具有两种可能的结构，它们不可重迭，是互相的镜像。在某一化合物中存在的多个手性特征加多了可能存在的构型的数量，其中可能会有一些互为镜像。对映体纯的化合物是指在检测轨范的才气范围内，仅具有并吞种手性的样品。在对称的环境中，两个对映体不错使平面偏振光(+/‑)在相背的方朝上等量旋转(偏振光不错被以为是不合称的介质)，除此之外，它们具有雷同的化学性质和物感性质。由于这个原因，它们有时也被称为光学异构体。光学活性异构体偏激等量的对映体的混杂物被称为外消旋体，它对平面偏振光无净旋转，因为每个正旋转(+)都被负旋转(‑)竣工对消。不时两个对映异构体与其他的对映异构体物资发生不同的化学反馈。由于很多生物分子是对映体，因此有时两种对映体对生物有机体的影响存在权贵各别。举例，在药物中，不时只消一种对映体不错发生思要的生理作用、而另一种对映体或是活性较低、或无活性，有时以致产生不良反馈。基于这么的发现，不错开拓仅由一种对映体(“对映体纯”)组成的药物以增强药理学效劳，有时还不错扼杀一些反作用。[0099]同位素是特定化学元素的质子数雷同，中子数不同的不同核素。并吞元素的通盘同位素具有雷同数量的质子。一个原子序数指定一个特定的元素，但非同位素；特定元素原子不错有不同的中子数。核子(质子和中子)的数量是原子的质地数，特定元素的每个同位素具有不同的质地数。举例、碳‑12、碳‑13和碳‑14是碳元素的三种同位素，质地数分别为12，13和14。碳的原子序数为6，意味着每个碳原子都有6个质子，因此这些同位素的中子数分别为6、7和8。氢原子有三种同位素：氕(1h)、氘(2h)和氚(3h)，氘的质地是氕的两倍，氚的质地是氕的三倍。通过能源学同位素效应，同位素替代实验可用于细目化学反馈的机理。同位素替代实验还可用于筹商外源化合物通过接收和散布机制投入体内后，躯壳何如对它产生作用，体内物资的代谢变化(举例通过细胞色素p450或葡萄糖醛酸出动酶等代谢酶的作用)，以及药物代谢居品的排泄路线，是为药代能源学(pk)筹商。同位素替代实验可用于筹商药物的生化和生理作用，包括在动物(包括东说念主类)、微生物或生物组合(举例感染)上所骄气出来的作用，是为药效学(pd)筹商。两者(pk和pd)一王人决定药物的剂量、益处及反作用。同位素不错领受一种踏实的(非发射性的)或非踏实的元素。药物的同位素取代物还可能具有与原始药物不同的颐养功效。[0100]“药学上”或“药学上可给与的”是指当分子实体和组合物酌情施用于动物或东说念主时，不会产生不利、过敏或其他不良反馈。[0101]“药学上可给与的溶剂化物”或“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本发明公开的化合物的结合物。酿成药学上可给与的溶剂合物，溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、酒精、甲醇、dmso、乙酸乙酯、乙酸和酒精胺。[0102]“药学上可给与的辅料”包括任何载体、稀释剂、佐剂或其它，举例防腐剂或抗氧化剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和接收延迟剂等。这些介质和药剂用于药物活性物资在才能域内是熟知的。任何传统介质或药剂，除非与活性身分不兼容，也不错探究将其用于颐养组合物中。补充活性身分也不错加入组合物中，成为合适的颐养组合。[0103]如本文所用，“药用盐”是指所公开化合物的繁衍物，通过制备母体化合物的酸盐或碱盐来获取。药学上可给与的盐包括由无毒无机酸或有机酸与母体化合物酿成的通例无毒盐或季铵盐。举例，所述通例无毒盐包括繁衍自无机酸(举例盐酸、氢溴酸盐、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等)的盐；以及由有机酸(举例乙酸、丙酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、苯磺酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、甲苯磺酸、草酸、富马酸、马来酸及乳酸等制备的盐。另外的加成盐包括铵盐，如三甲胺、葡甲胺、丙三醇等的盐、金属盐、如钠、钾、钙、锌或镁盐。[0104]本发明的药用盐可由含有碱性或酸性部分的母体化合物，通过通例化学轨范合成。不时而言，这些盐不错通过在水或有机溶剂中或两者的混杂物中，向母体化合物里，加入等当量的妥贴碱或酸来制备。一般来说，乙醚、乙酸乙酯、酒精、异丙醇或乙腈瑕瑜水介质的首选。适用盐的列表见于1985年由麦克出书公司出书的《雷明顿药物科学》(remington's pharmaceutical sciences)，其公开践诺纳入本文作参考。[0105]“施用”或“给药”是指以任何阵势向受试者出动、寄递、引入或运载药物或其他药剂。这些阵势包括口服用药、局部构兵、静脉内、腹膜内、肌肉内、病灶内、鼻内、皮下或鞘内给药。本发明还探究使用安设或器械来施用药剂。这种安设不错使用主动或被迫型传输，而且不错是缓释或快速开释寄递安设。[0106]就癌症而言，术语“颐养”包括以下任何一项或全部：遏止肿瘤细胞或癌细胞滋长、复制，收缩合座肿瘤量，以及改善与该疾病干系的一个或多个症状。[0107]就自身免疫性疾病而言，术语“颐养”包括以下任一项或全部：遏止与自身免疫性疾病干系的细胞的复制，包括但不限于大要产生自身免疫性抗体的细胞，收缩自身免疫性抗体量和改善自身免疫性疾病的一个或多个症状。[0108]就传染病而言、术语“颐养”包括以下任何一项或全部：遏止引起传染病的病原体的滋长、增殖或复制、以及改善传染病的一个或多个症状。[0109]“哺乳动物”或“动物”的实例包括但不限于东说念主、鼠、家鼠、豚鼠、猴、猪、山羊、牛、马、狗、猫、鸟和家禽。[0110]本发明所公开的新式偶联物使用了支链衔接子。扩充例1至26展示了一些妥贴的衔接子偏激合成。[0111]一种支链衔接子衔接的细胞结合剂‑细胞毒素分子的偶联物[0112]本发明的一个方面，含有支链衔接子偶联物的结构由式(i)暗示：[0113][0114]“_”代表单键；n为1到30；[0115]t是细胞结合剂或分子，选自抗体、单链抗体、结合靶细胞的抗体片断、单克隆抗体、单链单克隆抗体、结合靶细胞的单克隆抗体片断、嵌合抗体、结合靶细胞的嵌合抗体片断、结构域抗体、结合靶细胞的结构域抗体片断、adnectin类抗体、darpin卵白、淋巴因子、激素、维生素、滋长因子、集落刺激因子、养分转运分子(转铁卵白)和/或衔接在白卵白、团聚物、树状大分子、脂质体、纳米粒子、囊泡或(病毒)衣壳上的细胞结合肽、卵白质或小分子；[0116]l1和l2是由c、n、o、s、si和p等原子组成的链状结构，优选具有0‑500个原子的，共价衔接w和v1，v1和v2。组成l1和l2的原子不错以任何化学阵势相组合，举例酿成亚烷基、亚烯基和亚炔基、醚、聚氧化烯、酯、胺、亚胺、多胺、肼、腙、酰胺、脲、氨基脲、二氨基脲、烷氧基胺、氨基甲酸酯、氨基酸、肽、酰氧基胺、异羟肟酸或上述的组合。优选的l1和l2，雷同或不同，独迅速选自于o、nh、n、s、p、nnh、nhnh、n(r3)、n(r3)n(r3')、ch、co、c(o)nh、c(o)o、nhc(o)nh、nhc(o)o；如下列结构式的聚乙烯氧基：(och2ch2)por3、或(och2ch(ch3))por3、或nh(ch2ch2o)pr3、或nh(ch2ch(ch3)o)pr3、或n[(ch2ch2o)pr3]‑[(ch2ch2o)p'r3']或(och2ch2)pcoor3、或ch2ch2(och2ch2)pcoor3，其中p和p'是稳固选自0到约1000的整数，或它们的组合；c1‑c8烷基；c2‑c8杂烷基、烷基环烷基、杂环烷基；c3‑c8芳基、芳烷基、杂环、碳环、环烷基、杂烷基环烷基、烷基羰基、杂芳基；或(aa)r，r＝1‑12(1至12个氨基酸单元)，(aa)r为自然或非自然氨基酸，雷同或不同序列的二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或十二肽单元；[0117]w是一个延展体单元，不时是自毁掉的间隔体、一个多肽单元、腙、二硫化物、硫醚、酯或酰胺键；w是1或2或3；[0118]v1和v2是稳固的间隔体单元，选自o，nh，s，c1‑c8烷基；c2‑c8杂烷基、烯基或炔基；c3‑c8芳基、杂环、碳环、环烷基、烷基环烷基、杂环烷基、杂芳烷基、杂烷基环烷基，或烷羰基；或(aa)r、r＝1‑12(1‑12个氨基酸单元)，(aa)r为自然或非自然氨基酸，雷同或不同序列的二肽、三肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽或十二肽单元；或(ch2ch2o)p、p为0‑1000；v1和v2稳固为0、1或2，但v1和v2不同期为0，当v1或v2为0时，意味着侧链q1或q2片断缺省。[0119]q1和q2独迅速由式(i‑q1)暗示：[0120][0121]其中是衔接至l1或l2的位置，g1和g2独迅速为oc(o)、nhc(o)、c(o)、ch2、nh、oc(o)nh、nhc(o)nh、o、s、b、p(o)(oh)、nhp(o)(oh)、nhp(o)(oh)nh、ch2p(o)(oh)nh、op(o)(oh)o、ch2p(o)(oh)o、nhs(o)2、nhs(o)2nh、ch2s(o)2nh、os(o)2o、ch2s(o)2o、ar、arch2、aro、arnh、ars、arnr1、或(aa)q1；g3是oh、sh、or12、sr12、oc(o)r12、nhc(o)r12、c(o)r12、ch3、nh2、nr12、+nh(r12)、+n(r12)(r12’)、c(o)oh、c(o)nh2、nhc(o)nh2、bh2、br12r12’、p(o)(oh)2、nhp(o)(oh)2、nhp(o)(nh2)2、s(o)2(oh)、(ch2)q1c(o)oh、(ch2)q1p(o)(oh)2、c(o)(ch2)q1c(o)oh、oc(o)(ch2)q1c(o)oh、nhc(o)(ch2)q1c(o)oh、co(ch2)q1p(o)(oh)2、nhc(o)o(ch2)q1c(o)oh、oc(o)nh(ch2)q1c(o)oh、nhco(ch2)q1p(o)(oh)2、nhc(o)(nh)(ch2)q1c(o)oh、conh(ch2)q1p(o)(oh)2、nhs(o)2(ch2)q1c(o)oh、co(ch2)q1s(o)2(oh)、nhs(o)2nh(ch2)q1c(o)oh、os(o)2nh(ch2)q1c(o)oh、nhco(ch2)q1s(o)2(oh)、nhp(o)(oh)(nh)(ch2)q1c(o)oh、conh(ch2)q1s(o)(oh)、op(o)(oh)2、(ch2)q1p(o)(nh)2、nhs(o)2(oh)、nhs(o)2nh2、ch2s(o)2nh2、os(o)2oh、os(o)2or1、ch2s(o)2or12、ar、arr12、aroh、arnh2、arsh、arnhr12、或(aa)q1；(aa)q1是含有雷同或不同序列的自然或非自然氨基酸的肽；x1和x2独速便是o、ch2、s、s(o)、nhnh、nh、n(r12)、+nh(r12)、+n(r12)(r12’)、c(o)、oc(o)、oc(o)o、oc(o)nh、nhc(o)nh；y2是o、nh、nr12、ch2、s、nhnh、ar；p1、p2和p3独速便是0‑100但不同期为0；q1和q2独迅速为0‑24；r12、r12’、r13和r13’独迅速为h、c1～c8烷基；c2～c8杂烷基、或杂环；c3～c8芳基、芳烷基、环烷基、烷基环烷基、杂环烷基、杂烷基环烷基、碳环或烷基羰基；[0122]优选的q1和q2独速便是c2‑c100聚羧酸或c‑2‑c90聚烷基胺、c6‑c90寡糖或多糖、c6‑c100含季铵阳离子和磺酸根阴离子的两性离子甜菜碱或两性离子聚(磺酰基甜菜碱)(psb)、c6‑c100含可生物降解的团聚物、如聚乳酸/酒精酸(plga)、聚(丙烯酸酯)、脱乙酰壳多糖、n‑(2‑羟丙基)甲基丙烯酰胺的共聚物、聚[2‑(甲基丙烯酰氧基)乙基磷酸胆碱](pmpc)、聚‑l‑谷氨酸、聚(丙交酯‑共‑乙交酯)(plg)、聚(乙二醇)(peg)、聚(丙二醇)(ppg)、聚(乙二醇)改性肽、聚(乙二醇)改性脂质体、聚(乙二醇)改性烷基羧酸、聚(乙二醇)改性烷基胺、透明质酸(ha)(糖胺聚糖)、肝素或硫酸乙酰肝素(hsgag)、硫酸软骨素或硫酸皮素(csgag)、聚(乙二醇)改性的烷基硫酸盐、聚(乙二醇)改性的烷基磷酸盐或聚(乙二醇)改性的烷基季铵盐；[0123]q1和q2的结构示举例下：[0124][0125][0126][0127]其中，r25和r25’独迅速选自h、hc(o)、ch3c(o)、ch3c(nh)、c1‑c18烷基、c1‑c18烷基‑y1‑so3h、c1‑c18烷基‑y1‑po3h2、c1‑c18烷基‑y1‑co2h、c1‑c18烷基‑y1‑n+r1’r2’r3’r4’、c1‑c18烷基‑y1‑conh2、c2‑c18烷基、c2‑c18酯、c2‑c18醚、c2‑c18胺、c2‑c18烷基羧酰胺、c3‑c18芳基、c3‑c18环烷基、c3‑c18杂环、1‑24个氨基酸、c2‑c18脂质、c2‑c18脂肪酸或c2‑c18脂肪铵脂质；x1和x2独迅速选自nh、n(r1’)、o、ch2、s、c(o)、s(o)、s(o2)、p(o)(oh)、nhnh、ch＝ch、ar或(aa)q1，q1＝0‑24(0‑24个氨基酸、q1＝0暗示缺省)；x1、x2、x3、x4、y1、y2和y3独迅速选自nh、n(r1’)、o、c(o)、ch2、s、s(o)、nhnh、c(o)、oc(o)、oc(o)o、oc(o)nh、nhc(o)nh、ar或(aa)q1，x1、x2、x3、x4、y1、y2和y3独迅速不错缺省；p1、p2和p3独迅速为0‑100，但不可同期为0；q1、q2和q3独迅速为0‑24；r1’、r2’、r3’和r4’独迅速选自h和c1‑c6烷基；aa是自然或非自然氨基酸；ar或(aa)q1是同或不同的肽序列；q1＝0暗示(aa)q1缺省；[0128]d是具有下式(ii)结构的鹅膏毒素同系物：[0129][0130]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0131]其中‑‑‑‑‑是与w衔接的位点；[0132]芳醇(吲哚)环上的单键是指它衔接芳醇环的纵容一个碳；[0133]暗示可选地单键或可缺省；[0134]r1和r2独迅速选自h、oh、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch(ch3)ch2oh、ch(oh)ch3、c1‑c8烷基、–or12(酯)、c2‑c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)、–oc(＝o)or12‑(碳酸脂)、–oc(＝o)nhr12(氨基甲酸酯)；c3‑c8芳基、杂环、碳环、环烷基、杂环烷基、杂芳烷基、烷基羰基。[0135]r3和r4独迅速选自h、oh、–or12(酯)、–ocor12(酯)、–ococh3(醋酸酯)、–ocoor12(碳酸酯)、–oc(＝o)nhr12(氨基甲酸酯)、‑op(o)(or12)(or12’)(磷酸酯)、op(o)(nhr12)(nhr12’)(磷酸胺)、o‑so3‑、或o‑糖苷；[0136]r5选自h、oh、nh2、nhoh、nhnh2、–or12、–nhr12、nhnhr12、–nr12r12’、n(h)(r12)r13co(aa)r、(氨基酸或肽，其中aa是氨基酸或多肽、r＝0‑6)；[0137]r6选自h、oh、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch(ch2oh)2、ch(ch3)oh、ch2ch2oh、proh、buoh、c1～c8 alkyl、–or12(酯)、c2～c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)；c3～c8芳基、杂环或碳环；[0138]r7、r8和r9独迅速选自h、oh、ch3、ch(ch3)2、ch(ch3)ch2ch3、ch2oh、ch(oh)ch2oh、ch2ch(oh)ch2oh、ch(ch2oh)2、ch2c(oh)(ch2oh)2、ch2c(oh)(ch3)(ch2oh)、ch2c(oh)(ch(ch3)2)(ch2oh)、ch2ch2oh、proh、buoh、ch2cooh、ch2ch2cooh、ch(oh)cooh、ch2conh2、ch2ch2conh2、ch2ch2ch2ch2nh2、ch2ch2ch2nhc(＝nh)nh2、c1～c8 alkyl、ch2ar、ch2sh、ch2sr12、ch2ssr12、ch2ssar、ch2ch2sch3、–or12(酯)、c2～c8烯基、炔基、杂烷基、–ocor12(酯)；c3～c8芳基、杂环或碳环；[0139]r10和r11独迅速选自h、nh2、oh、sh、no2、卤素、‑nhoh、–n3(叠氮基)；‑cn(氰基)；c1～c8烷基、c2～c8烯基、炔基、杂烷基；c3～c8芳基、杂环或碳环；–or12(酯)、–ocor12(酯)、–ococh3(乙酸酯)、–oc(o)or12(碳酸酯)、‑oc(o)ch(r12)nhaa(aa是氨基酸基团)、‑nr12r12’(胺)、‑nr12cor12’(酰胺)、‑r12nhcor12’(烷基酰胺)、‑r12nhr12’(胺)、nhr12nhr12’nhr12”(胺)；–r12nconr12’(尿素)；–r12ncoor12’(氨基甲酸酯)；–oconr12r12’(氨基甲酸酯)；–nr12(c＝nh)nr12’r12”(胍)；–nr12co(aa)p、(氨基酸或肽、其中aa是氨基酸或多肽，p为0‑6)；–n(r12)conr12’r12”(尿素)；–ocsnhr12(硫代氨基甲酸酯)；‑r12sh(硫基)；–r12sr12’(硫化物)；–r12ssr12’(二硫化物)；–s(o)r12(亚砜)；–s(o2)r12(砜)；–so3、hso3、hso2、或hso3‑、so32‑或‑hso2‑的盐(亚硫酸盐)；–oso3‑；‑n(r12)soor12’(磺酰胺)；h2s2o5或s2o52‑的盐(焦亚硫酸氢盐)；po3sh3、po2s2h2、pos3h2、ps4h2或po3s3‑、po2s23‑、pos33‑、ps43‑的盐(单‑、二‑、三‑、和四‑硫代磷酸盐)；(r12o)2posr12’(硫代磷酸酯)；hs2o3或s2o32‑(硫代硫酸盐)；hs2o4或s2o42‑的盐(连二亚硫酸盐)；(p(＝s)(or12)(s)(oh)或与阳离子酿成的盐(二硫代磷酸盐)；‑n(r12)or12’(羟胺繁衍物)；r12c(＝o)noh或与阳离子酿成的盐(异羟肟酸盐)；hoch2so2‑、或其盐(甲醛次硫酸盐)；–n(r12)cor12’(酰胺)；r12r12’r12”npo3h(三烷基氨基磷酸或氨基磷酸)；或arar’ar”npo3h(三芳基磷酸)；op(o)(om1)(om2)、och2op(o)(om1)(om2)、oso3m1；o‑糖苷(葡萄糖苷、半乳糖苷、甘雨糖苷、葡萄糖醛酸苷、阿洛糖苷、果糖苷等)、nh‑糖苷、s‑糖苷或ch2‑糖苷；m1和m2独迅速为h、na、k、ca、mg、nh4、nr1’r2’r3’；r1’、r2’和r3’独迅速为h、c1～c8烷基；ar、ar’、和ar”为c3‑c8芳基或杂芳基；[0140]其中r12，r12’，和r12”独迅速选自h，c1～c8烷基；c2‑c8杂烷基，烷基环烷基，杂环烷基；c3‑c8芳基，芳烷基，杂环，碳环，环烷基，杂烷基环烷基，烷基羰基，杂芳基；或1‑8碳原子酯、醚或酰胺；或如(och2ch2)p或(och2ch(ch3))p的聚氧乙烯单元，其中p是0至1000的整数，或其组合，或缺省。[0141]x是s、o、nh、so、so2或ch2。[0142]m’是0或1；n是1‑20。[0143]优选鹅膏毒素结构的示举例下：[0144][0145]更优选鹅膏毒素结构的选自：[0146][0147][0148][0149][0150][0151][0152]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0153]其中z2是氧或孤对电子；r15是h、nhr12、or12、c1‑c8的直链或支链烷基或杂烷基；c2‑c8的直链或支链烯基、炔基、烷基环烷基、杂环烷基；c3‑c8的直链或支链芳基、芳烷基、杂环、碳环、环烷基、杂烷基环烷基、烷基羰基、杂芳基，碳酸酯(‑r1c(o)or12)，氨基甲酸酯(‑r12c(o)nr12’r13)；或1‑8个碳原子的羧酸酯、酯、醚或酰胺；或1～8氨基酸；或如(och2ch2)p或(och2ch(ch3))p的聚氧乙烯单元，其中p是0至约1000的整数；z1是h、o、s、nh、nhnh、r12、或缺省；r21是cor12、nhcor12、coor12、conhr12、r12、r12nh；r22是r12、sr12、sch(ch3)r12、sc(ch3)2r12，x是o、s、nh、nhnh、或ch2。r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8、r9、r10、r11、r12、r12’、r13、和x1的界说与前文雷同；[0154]另外，w、l1、l2、v1和v2可独迅速由一个或多个下列衔接子组分组成：6‑马来酰亚胺基己酰基(“mc”)、马来酰亚胺丙酰基(“mp”)、缬氨酸‑瓜氨酸(“val‑cit”或“vc”)、丙氨酸‑苯丙氨酸(“ala‑phe”or“af”)、对氨基芐氧基‑羰基(“pab”)、4‑硫代戊酰基(“spp”)、4‑(n‑马来酰亚胺甲基)环己烷‑1酰基(“mcc”)、(4‑乙酰基)氨基苯酰基(“siab”)、4‑硫丁酰基(spdb)、4‑硫‑2‑羟基磺酰基‑丁酰基(2‑sulfo‑spdb)，结构如下所示，或含有1‑12个自然或非自然氨基酸单元的自然或非自然肽。自然氨基酸最佳选自天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、硒代半胱氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、色氨酸、丙氨酸；[0155]6‑马来酰亚胺己酰基(mc)，[0156]马来酰亚胺丙酰基(mp)，[0157]缬氨酸‑瓜氨酸(val‑cit)，[0158]丙氨酸‑苯丙氨酸(ala‑phe)，赖氨酸‑苯丙氨酸(lys‑phe)，对氨基芐氧基‑羰基(pab)，4‑硫戊酰基(spp)，4‑硫丁酰基(spdb)，4‑(n‑马来酰亚胺甲基)环己烷‑1‑酰基(mcc)，马来酰亚胺乙氨基(me)，4‑硫‑2‑羟基磺酰基‑丁酰基(2‑sulfo‑spdb)，芳基硫醚基(pyss)，(4‑乙酰基)氨基苯酰基(siab)，氧芐基硫醚基，氨基苄基硫醚基，二氧基苄基硫醚基、二氨基苄基硫醚基、氨基氧基苄基硫醚基，烷氧基氨基(aoa)，亚乙基氧基(eo)，4‑甲基‑4‑硫代‑戊酰基(mpdp)，三唑，二硫、烷基磺酰基，烷基磺胺，二磺胺，磷二酰胺，烷基膦酰胺，膦酸，n‑甲基烷基膦酰胺，n，n’‑二甲基磷二酰胺、烷基膦二酰胺，肼，乙脒；肟，二乙酰肼，氨基乙基胺，氨基乙基‑氨基乙基胺氨基乙基胺以及含有1‑20个氨基酸的l‑或d‑，自然或非自然肽；其中是衔接位点；优选地，x2、x3、x4、x5或x6独迅速选自nh；nhnh；n(r12)；n(r12)n(r12’)；o；s；c1‑c6烷基；c2‑c6杂烷基、烷基环烷基、杂环烷基；c3‑c8芳基、芳烷基、杂环、碳环、环烷基、杂烷基环烷基、烷基羰基、杂芳基；ch2or12、ch2sr12、ch2nhr12或1～8个氨基酸；其中r12和r12’独迅速为h；c1‑c8烷基；c2‑c8杂烷基、烷基环烷基、杂环烷基；c3‑c8芳基、芳烷基、杂环、碳环、环烷基、杂烷基环烷基、烷基羰基、杂芳基；1‑8个碳原子的酯、醚或酰胺；或如式(och2ch2)p或(och2ch(ch3))p的聚氧乙烯基单元，其中p是0至约1000的整数，或以上的组合。[0159]w、l1、l2、v1和v2独迅速不错含有自我毁掉或非自我毁掉的组分、肽单元、腙键、二硫化物、酯、肟、酰胺或硫醚键。自我毁掉单元包括但不限于，与对氨基芐基氨甲酰基(pab)的电子结构相似的芳醇化合物，举例2‑氨基咪唑‑5‑甲醇的繁衍物、杂环pab同系物、β‑葡糖苷酸、以及邻或对氨基芐基缩醛；[0160]优选的自我毁掉型衔接子组分具有以下结构之一：[0161][0162]其中，*符号的是额外的间隔体或可开释的衔接子、或细胞毒性剂、和/或结合分子(cba)的衔接点；x1、y1、z2和z3独迅速为nh、o或s；z1为h、nhr1、or1、sr1、cox1r1，其中x1和r1如前文所界说；v为0或1；u1为h、oh、c1‑c6烷基、(och2ch2)n、f、cl、br、i、or5、sr5、nr5r5’、n＝nr5、n＝r5、no2、sor5r5’、so2r5、so3r5、oso3r5、pr5r5’、por5r5’、po2r5r5’、opo(or5)(or5’)或och2po(or5(or5’)，其中r5和r5'独迅速选自h、c1‑c8烷基；c2‑c8烯基、炔基、杂烷基或氨基酸；c3‑c8芳基、杂环、碳环、环烷基、杂环烷基、杂芳烷基、烷基羰基或糖苷；或药学上的阳离子盐；[0163]w、l1、l2、v1和v2独迅速不错为包含以下结构之一的非自我毁掉的衔接子组分：[0164][0165][0166][0167]其中，*符号的是额外的间隔体或可开释的衔接子、或细胞毒性剂、和/或结合分子(cba)的衔接点；x1、y1、u1、r5、r5’如前文所界说；r为0‑100；m和n独迅速为0‑20；[0168]更为优选的是，w、l1、l2、v1和v2独速便是可开释的衔接子组分。术语“可开释的”是指衔接子上包含至少一个可在生理条款下被碎裂的键，举例ph、酸、碱、氧化作用、代谢、生化或酶不踏实的键。应当意会，导致键断裂不一定是生物或代谢经由、而可能是一个化学反馈、举例水解或取代反馈，这种生理条款的例子有：ph值比细胞浆内ph低的内涵体，恶性细胞内存在的毫摩尔浓度的大都谷胱甘肽，它大要与细胞内硫醇发生二硫键交换反馈；[0169]w、l1、l2、v1和v2中可开释组件的实例，包括但不限于：[0170]‑(cr15r16)m(aa)r(cr17r18)n(och2ch2)t‑，‑(cr15r16)m(cr17r18)n(aa)r(och2ch2)t‑，‑(aa)r‑(cr15r16)m(cr17r18)n(och2ch2)t‑，‑(cr15r16)m(cr17r18)n(och2ch2)r(aa)t‑，‑(cr15r16)m(cr17＝cr18)(cr19r20)n(aa)t(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(nr11co)(aa)t(cr19r20)n‑(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(aa)t(nr21co)(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(oco)(aa)t‑(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(ocnr17)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m‑(co)(aa)t‑(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(nr21co)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m‑(oco)(aa)t(cr19r20)n‑(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(ocnr17)(aa)t(cr19r20)n‑(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m(co)(aa)t(cr19r20)n‑(och2ch2)r‑，‑(cr15r16)m‑苯基‑co(aa)t‑(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)m‑呋喃‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑(cr15r6)m‑恶唑‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)m‑噻唑基‑co(aa)t(ccr17r18)n‑，‑(cr15r16)t‑噻吩‑co(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)t‑咪唑‑co‑(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)t‑吗啉‑co(aa)t‑(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)t‑呱嗪‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)t‑n‑甲基呱嗪‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑(cr15r16)m‑(aa)t苯基‑，‑(cr15r16)m‑(aa)t呋喃‑，‑(cr15r16)m‑恶唑(aa)t‑，‑(cr15r16)m‑噻唑基(aa)t‑，‑(cr15r16)m‑噻吩基‑(aa)t‑，‑(cr15r16)m‑咪唑(aa)t‑，‑(cr15r16)m‑吗啉‑(aa)t‑，‑(cr15r16)m‑呱嗪‑(aa)t‑鑫系列第二季，‑(cr15r16)m‑n‑甲基呱嗪‑(aa)t‑鑫系列第二季，‑k(cr15r16)m(aa)r(cr17r18)n(och2ch2)t‑鑫系列第二季，‑k(cr15r16)m(cr17r18)n(aa)r(och2ch2)t‑，‑k(aa)r‑(cr15r16)m(cr17r18)n(och2ch2)t‑，‑k(cr15r16)m(cr17r18)n(och2ch2)r(aa)t‑，‑k(cr15r16)m(cr17＝cr18)(cr19r20)n(aa)t(och2ch2)r，‑k(cr15r16)m(nr11co)(aa)t‑(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr5r6)m(aa)t(nr21co)(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m(o‑co)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m(ocnr17)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m(co)(aa)t‑(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m(nr21co)(aa)t(cr19r20)n‑(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m‑(oco)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m(ocnr17)(aa)t‑(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k‑(cr15r16)m(co)(aa)t(cr19r20)n(och2ch2)r‑，‑k(cr15r16)m‑苯基‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑k‑(cr15r16)m‑呋喃‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)m‑恶唑‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)m‑噻唑基‑co(aa)t‑(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)t‑噻吩‑co(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)t咪唑‑co‑(cr17r18)n‑，‑k(cr5r6)t吗啉‑co(aa)t‑(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)t‑呱嗪‑co(aa)t‑(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)t‑n‑甲基呱嗪‑co(aa)t(cr17r18)n‑，‑k(cr15r16)m‑(aa)t苯基，‑k‑(cr15r16)m‑(aa)t呋喃‑，‑k(cr15r16)m‑恶唑‑(aa)t‑，‑k(cr15r16)m‑噻唑基(aa)t‑，‑k(cr15r16)m‑噻吩基‑(aa)t‑，‑k(cr15r16)m‑咪唑(aa)t‑，‑k(cr15r16)m‑吗啉(aa)t‑，‑k(cr15r16)m呱嗪(aa)tg，‑k(cr5r6)m‑n‑甲基呱嗪(aa)t‑；其中m，aa，m，n，r13，r14和r15界说如前文所述；t和r独迅速为0‑100；r16，r17，r18，r19和r20独迅速选自h，卤素，c1～c8烷基或者杂烷基，c2～c8芳基、烯基、炔基、醚、酯、胺或酰胺，c3～c8芳基，可选地被一个或多个卤化物，cn，nr12r12’，cf3，or12，芳基，杂环，s(o)r12，so2r12，‑co2h，‑so3h，‑or12，‑co2r12，‑conr12，‑po2r12r13，‑po3h or p(o)r12r12’r13所取代；k是nr12，‑ss‑，‑c(＝o)‑，‑c(＝o)nh‑，‑c(＝o)o‑，‑c＝nh‑o‑，‑c＝n‑nh‑，‑c(＝o)nh‑nh‑，o，s，se，b，het(具有c3‑c12的杂环或杂芳环)；或含有雷同或不同1‑20个氨基酸的肽。[0171]更为优选地，w、l1、l2、v1和v2独迅速为具有1‑6个碳原子的直链烷基，或结构如式(och2ch2)p的聚氧乙烯基单元，p＝1‑5000，或是含有1‑4个氨基酸单元的肽(l或d姿色)，或以上的组合。[0172]或者w、q1、q2、l1、l2、v1或v2中的任何一个或多个独迅速不错缺省、但q1和q2不可同期缺省。[0173]在另一方面，一般而言，当v1和/或v2与细胞结合分子t衔接时，或与l1和/或l2与细胞结合分子径直衔接时(v1和v2缺省)，产生以下一个或多个结构：[0174][0175][0176][0177]其中r20和r21独速便是c1‑c8烷基，c2‑c8杂烷基或杂环，c3‑c8芳基、芳烷基、环烷基、烷基环烷基、杂环烷基、杂烷基环烷基、碳环或烷基羰基，或c2‑c100具有式(ch2ch2o)p的聚亚烷基二醇，p如前文所界说。[0178]在另一方面，q1和q2优选自含有c2‑c18脂质、或c2‑c18脂肪酸或c2‑c18脂肪铵脂质的聚亚烷基二醇。聚亚烷基二醇不仅使偶联物更具有亲水，而且能防护偶联物衔接子被水解酶，如卵白水解酶或酯酶水解。偶联体上的脂质不错结合哺乳动物血液中的白卵白，让偶联物在血液轮回中从该复合物中冉冉开释。因此，本专利央求的支链衔接子不错让偶联物在血液轮回中愈加踏实。这里的聚亚烷基二醇包括但不限于聚乙二醇(peg)、聚(丙二醇)及环氧乙烷与环氧丙烷的共聚物，优选的是peg，更优选的是单官能团活化的羟基peg(举例一个末端被活化的羟基peg，包括羟基peg‑羧酸的反馈活性酯、羟基peg‑单醛、羟基peg‑单胺、羟基peg‑单酰肼、羟基peg‑单肼基甲酸酯、羟基peg‑单碘乙酰胺、羟基peg‑单马来酰亚胺、羟基peg‑单原甲酰基二硫化物、羟基peg‑单肟、羟基peg‑单苯基碳酸酯、羟基peg‑单苯基乙二醛、羟基peg‑单噻唑烷‑2‑硫酮、羟基peg‑单硫代酯、羟基peg‑单硫醇、羟基peg‑单三嗪和羟基peg‑单乙烯基砜)。聚亚烷基二醇的分子量约为10da至约200kda，优选范围在约88da至约40kda之间，两个支链，每个的分子量为约88da至约40kda；更优选为两个支链，每个分子量为约88da至约20kda。在一个具体实例中，聚亚烷基二醇是聚乙二醇且具有约10kda、20或40kda的分子量。在其它具体的实例中，peg是直链或支链10kda的peg、直链或支链20kda peg、直链或支链40kda peg。很多好意思国专利仍是公开了直链或支链“非抗原性”peg团聚物偏激繁衍物或偶联物的制备，如好意思国专利5，428，128；5，621，039；5，622，986；5，643，575；5，728，560；5，730，990；5，738，846；5，811，076；5，824，701；5，840，900；5，880，131；5，900，402；5，902，588；5，919，455；5，951，974；5，965，119；5，965，566；5，969，040；5，981，709；6，011，042；6，042，822；6，113，906；6，127，355；6，132，713；6，177，087及6，180，095。[0179]结构式(i)的示举例下：[0180][0181][0182][0183][0184][0185][0186][0187][0188][0189][0190][0191][0192]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；其中x8是o、s、nh、nhnh、nhr12、sr12、ssr12、ssch(ch3)r12、ssc(ch3)2r12、或r12；x1、x2、x3、x4、x5、p1、p2、q1、q2、m、n、r25和mab的界说如前文所述；aa是自然或者非自然氨基酸；r是0‑100；(aa)r是含有雷同或不同氨基酸序列的肽、当r>2；r＝0时，(aa)r缺省。[0193]本发明的另一方面，含有支链衔接子的偶联物的结构式暗示如(iii)：[0194][0195]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2、n和t与式(i)中界说雷同。[0196]结构式(iii)的示举例下：[0197][0198][0199][0200][0201][0202][0203][0204][0205]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0206]其中x8是o、s、nh、nhnh、nhr12、sr12、ssr12、ssch(ch3)r12、ssc(ch3)2r12、或r12；x1、x2、x3、x4、x5、p1、p2、q1、q2、m、n、r25、和mab的界说如前文所述；aa是自然或者非自然氨基酸；r是0‑100；(aa)r是含有雷同或不同氨基酸序列的肽，当r>2；r＝0时，(aa)r缺省。[0207]本发明的另一个方面，支链衔接子化合物的结构如(iv)所示、它不错便利地与细胞结合分子t反馈，酿成式(i)中的偶联物：[0208][0209]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2及n的界说同结构式(i)；[0210]lv1为一反馈官能团，不错与细胞结合分子上的硫醇、胺、羧酸、硒醇、酚或羟基发生反馈。它包括，但不限于卤素(如氟、氯、溴、碘)；甲磺酰基；甲苯磺酰基；三氟甲磺酰基；硝基酚基；n‑羟基琥珀酰亚胺基(nhs)；苯酚基；二硝基苯酚基；五氟苯酚基；四氟苯酚基；三氟苯酚基；二氟苯酚基；一氟苯酚基；五氯苯酚基；咪唑基；一氯酚基；二氯酚基；三氯酚基；四氯苯酚基；n‑(苯并三唑基)氧基；2‑乙基‑5‑苯基异恶唑基‑3′‑磺酰基；苯氧二唑基磺酰基；2‑乙基‑5‑苯基异恶唑基；苯氧二唑基；恶二唑基；不饱和碳(碳‑碳、碳‑氮、碳‑硫、碳‑磷、硫‑氮、磷‑氮、氧‑氮或碳‑氧之间的双键或三键)；或与mitsunobu反馈考剂作用生成的中间体。缩合剂的例子如下：1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edc)、二环己基碳二亚胺(dcc)、n，n'‑二异丙基碳二亚胺(dic)、n‑环己基‑n'‑(2‑吗啉代‑乙基)碳二亚胺甲基对甲苯磺酸盐(cmc或cme‑cdi)、1，1'‑羰基二咪唑(cdi)、(o‑(苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n’，n’‑四甲基脲四氟硼酸盐(tbtu)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(1h‑苯并三唑‑1‑基)‑六氟磷酸铵(hbtu)、(苯并三唑‑1‑基氧基)三(二甲基氨基)‑六氟磷酸盐(bop)、(苯并三唑‑1‑基氧基)三吡咯烷基六氟磷酸盐(pybop)、氰基膦酸二乙酯(depc)、氯‑n，n，n'，n'‑四甲基甲脒六氟磷酸盐、1‑[双(二甲基氨基)亚甲基]‑1h‑1，2，3‑三唑并[4，5‑b]吡啶3‑氧六氟磷酸盐(hatu)、1‑[(二甲氨基)(吗啉代)亚甲基]‑1h‑[1，2，3]三唑并[4，5‑b]吡啶‑1‑鎓3‑氧六氟磷酸盐(hdma)、2‑氯‑1，3‑二甲基‑咪唑六氟磷酸盐(cip)、六氟磷酸氯代吡咯烷酮鎓(pyclop)、氟‑n，n，n'，n'‑双(四亚甲基)甲脒六氟磷酸盐(btffh)、n，n，n'，n'‑四甲基‑s‑(1‑氧代‑2‑吡啶基)硫脲六氟磷酸盐、o‑(2‑氧代‑1(2h)吡啶基)‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(tptu)、s‑(1‑氧代‑2‑吡啶基)n，n，n'，n'‑四甲基硫脲四氟硼酸盐、o‑[(乙氧基羰基)‑氰基甲基氨基]‑n，n，n'，n'‑六氟磷酸四甲基脲(hotu)、(1‑氰基‑2‑乙氧基‑2‑氧代乙基氨基氧基)二甲氨基‑吗啉代‑六氟磷酸盐(comu)、o‑(苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n'，n'‑双(四亚甲基)六氟磷酸盐(hbpyu)、n‑芐基‑n'‑环己基‑碳二亚胺(有或莫得团聚物结合)、二吡咯烷基(n‑琥珀酰亚胺基氧基)碳鎓六氟磷酸盐(hspyu)、氯二吡咯烷基六氟磷酸盐(pyclu)、2‑氯‑1，3‑二甲基咪唑四氟硼酸盐(cib)、(苯并三唑‑1‑基氧基)二呱啶碳六氟磷酸盐(hbpipu)、o‑(6‑氯苯并三唑‑1‑基)‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(tctu)、溴代(二甲基氨基)‑六氟磷酸盐(brop)、丙基膦酸酐(ppaca、)、2‑吗啉代乙基异氰化物(mei)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(n‑琥珀酰亚胺基)六氟磷酸盐(hstu)、2‑溴‑1‑乙基‑吡啶鎓四氟硼酸盐(bep)、o‑[(乙氧基羰基)氰基‑亚甲基氨基]‑n，n，n'，n'‑四甲基脲四氟硼酸盐(totu)、4‑(4，6‑二甲氧基‑1，3，5‑三嗪‑2‑基)‑4‑甲基吗啉氯化物(mmtm、dmtmm)、n，n，n'，n'‑四甲基‑氧‑(n‑琥珀酰亚胺基)脲四氟硼酸(tstu)、o‑(3，4‑二氢‑4‑氧代‑1，2，3‑苯并三嗪‑3‑基)‑n，n，n’，n’‑四甲基脲四氟硼酸盐(tdbtu)、1，1'‑(偶氮二羰基)‑二呱啶(add)、二‑(4‑氯芐基)偶氮二羧酸酯(dcad)、偶氮二羧酸二叔丁酯(dbad)、偶氮二羧酸二异丙酯(diad)、偶氮二羧酸二乙酯(dead)。另外，lv1不错是酸酐，或与其它c1‑c8酸酐作用酿成的酸酐；[0211]优选的lv1包括：卤化物(如氟化物、氯化物、溴化物和碘化物)、甲磺酰基(mesyl)、甲苯磺酰基(tosyl)、三氟甲基磺酰基(triflate)、三氟甲基磺酸酯、硝基苯酚基、n‑琥珀酰亚胺基(nhs)、苯酚基；二硝基苯酚基；五氟苯酚基、四氟苯酚基、三氟苯酚基、二氟苯酚基、一氟苯酚基、五氯苯酚基、1h‑咪唑‑1‑基、一氯苯酚基、二氯苯酚基、三氯苯酚基、四氯苯酚基、n‑(苯并三唑基)氧基、2‑乙基‑5‑苯基异恶唑‑3′‑磺酰基、苯基恶二唑‑磺酰基、2‑乙基‑5‑苯基异恶唑基、苯基恶二唑基、恶二唑基、不饱和碳(碳‑碳、碳‑氮、碳‑硫、碳‑磷、硫‑氮、磷‑氮、氧‑氮或碳‑氧之间的双键或三键)，或以下结构之一：[0212]二硫化物；卤代乙酰基；酰卤；n‑羟基琥珀酰亚胺酯；马来酰亚胺；单取代马来酰亚胺；二取代马来酰亚胺；单取代的琥珀酰亚胺；二取代马来酰亚胺；取代马来酸；‑cho醛；乙烯磺酰基；丙烯酰基；(甲苯磺酰氧基)乙酰基；2‑(甲磺酰氧基)乙酰基；2‑(硝基苯酚基)乙酰基；2‑(二硝基苯基)乙酰基；2‑(氟代苯酚基)‑乙酰基；2‑(二氟苯酚基)‑乙酰基；2‑((三氟甲基磺酰基)氧基)乙酰基；酮或醛，2‑(五氟苯酚基)乙酰基；甲基砜苯基恶二唑(oda)；酸酐，烷氧基氨；叠氮基，炔基，或酰肼；[0213]其中，x1’是f、cl、br、i或lv3；x2’是o、nh、n(r1)或ch2；r3是h、芳基或杂芳基，其中一个或多个h原子可独迅速被‑r1、‑卤素、‑or1、‑sr1、‑nr1r2、‑no2、‑s(o)r1、‑s(o)2r1或‑coor1取代；lv3是离去基团，选自f、cl、br、i；硝基苯基；n‑羟基琥珀酰亚胺(nhs)；苯酚基；二硝基苯酚基；五氟苯酚基；四氟苯酚基；二氟苯酚基；单氟苯酚基；五氯苯酚基；三氟甲磺酰基；咪唑基；二氯酚基；四氯苯酚基；1‑羟基苯并三唑基；甲苯甲磺酰基；甲磺酰基；2‑乙基‑5‑苯基异恶唑‑3′‑磺酰基，酸酐或与其它酸酐作用酿成的酸酐，举例乙酸酐、甲酸酐；或与多肽缩合试剂、mitsunobu反馈考剂作用生成的中间体。[0214]结构式(iv)的示举例下：[0215][0216][0217][0218][0219][0220][0221][0222][0223][0224][0225][0226]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0227]其中x8是o、s、nh、nhnh、nhr12、sr12、ssr12、ssch(ch3)r12、ssc(ch3)2r12、或r12；x1、x2、x3、x4、x5、p1、p2、q1、q2、m、n、r25、和mab的界说如前文所述；aa是自然或者非自然氨基酸；r是0‑100；(aa)r是含有雷同或不同氨基酸序列的肽，当r>2；r＝0时，(aa)r缺省。[0228]本发明的另一个方面，支链衔接子化合物的结构如(v)所示、它不错便利地与细胞结合分子t反馈，酿成式(iii)中的偶联物：[0229][0230]其中，d、w、w、l1、l2、q1、q2、v1、v2、v1、v2及n的界说同结构式(i)；其中lv1和lv2独迅速，与式(iv)中lv1的界说雷同，lv1和lv2不错雷同或者不同。[0231]结构式(v)的示举例下：[0232][0233][0234][0235][0236][0237][0238][0239][0240][0241]或元素同位素取代物，或药学上可给与的盐，水合物或水合盐；或多晶结构；或其旋光异构体，外消旋体，非对映异构体或对映异构体；[0242]其中x1、x2、x3、x4、x5、x8、z2、z3、p、p1、p2、p3、q1、q2、lv1、lv2、lv3、lv3’、m、n、r12、r12’、r15、r25、(aa)r和mab的界说如前文所述；[0243]本发明进一步触及结构式(i)和(iii)中鹅膏毒素类似物与细胞结合分子的偶联物的制备轨范，以及这些偶联物的诓骗。[0244]细胞结合剂或细胞结合分子t，不错是现在已知的或行将公开的，具有颐养兴致或者不错被生物学阵势修饰的，大要与细胞的部分相结合、复合或反馈的任何种类的分子。优选的细胞结合剂或细胞结合分子是免疫颐养卵白、抗体及单链抗体；结合靶细胞的抗体片断；单克隆抗体；单链单克隆抗体；或结合靶细胞的单克隆抗体片断；嵌合抗体；结合靶细胞的嵌合抗体片断；域抗体；结合靶细胞的域抗体片断；adnectin类抗体、darpin卵白、淋巴因子、激素、维生素、滋长因子、集落刺激因子、养分转运分子(转铁卵白)和/或衔接在白卵白、团聚物、树状大分子、脂质体、纳米粒子、囊泡或(病毒)衣壳上的含有四个以上氨基酸片断的细胞结合肽、卵白质或小分子；[0245]优选的lv1，lv2，lv3或lv3’不错与细胞结合剂或细胞结合分子上的巯基对反馈。巯基最优是由细胞结合剂的链间二硫键被还原产生，还原剂选自二硫苏糖醇(dtt)、二硫赤藓糖醇(dte)、l‑谷胱甘肽(gsh)、二(2‑碳氧乙基)膦(tcep)、2‑巯基乙胺(β‑mea)和/或β‑巯基酒精(β‑me，2‑me)。细胞结合剂/分子上的巯基也不错通过traut试剂或硫代内酯生成，其中traut试剂或硫代内酯与细胞结合剂/分子上的氨基反馈酿成巯基，随后可同期或按次进行与lv1，lv2，lv3或lv3’反馈：[0246][0247][0248]以支链衔接子衔接的鹅膏毒素类似物与细胞结合分子偶联物的制备[0249]图1‑26阐发了鹅膏毒素同系物与本发明中细胞结合分子偶联物的制备和以支链衔接子进行偶联的合成浮现。[0250]式(i)和(iii)中的偶联物可分别由式(iv)和(v)的中间体化合物制备。不时，(iv)和(v)中的鹅膏毒素同系物具有lv1和lv2的官能团，不错很便利地与细胞结合分子或修饰的细胞结合分子发生反馈。图1‑26中阐发了(iv)和(v)中鹅膏毒素同系物的制备和部分(i)和(iii)中偶联物的制备。[0251]不时情况下，为了合成式(i)中的偶联物，式(iv)中的官能团lv1与细胞结合分子上的一个、两个或多个基团反馈，反馈在0‑60℃，ph 5‑9的水性介质中进行，可添加或不添加0‑30％与水能混溶的有机溶剂，如dma、dmf、酒精、甲醇、丙酮、乙腈、thf、异丙醇、二恶烷、丙二醇或乙二醇，然后进行透析或色谱纯化以得到式(i)中的偶联物。细胞结合分子上的氨基酸残机(用于偶联的反馈官能团)不错通过卵白质工程的轨范获取。[0252]式(iii)中的偶联物也不错通过式(v)中的官能团lv1和lv2，与细胞结合分子上的两个或多个基团的反馈获取，优选为细胞结合分子上通过还原双硫键产生的一双游离巯基，反馈在0‑60℃、ph5‑9的水性介质中发生，可添加或不添加0‑30％的水溶性(混溶)有机溶剂，酿成偶联物分子。成对的巯基，优选是通过还原细胞结合剂上的链间二硫键而生成，还原剂可选自二硫苏糖醇(dtt)、二硫赤藓糖醇(dte)、l‑谷胱甘肽(gsh)、三(2‑羧乙基)膦(tcep)、2‑巯基乙胺(β‑mea)、或/和β巯基酒精(β‑me，2‑me)，还原反馈在ph4‑9的水介质中进行，可加入或不加入0‑30％的水溶性(混溶)有机溶剂。[0253]式(iv)和(v)中的lv1和lv2的反馈基团独迅速不错为以下基团：二硫化物、硫醇、硫酯、马来酰亚胺、卤素取代的马来酰亚胺、卤代乙酰基、迭氮化物、1‑炔、酮、醛、烷氧基氨基、三氟甲磺酰基、羰基咪唑、甲苯磺酰基、甲磺酰基、2‑乙基‑5‑苯基异恶唑‑3′‑磺酰基、硝基苯酚基、n‑羟基琥珀酰亚胺(nhs)、苯酚基；二硝基苯酚基、五氟苯酚基、四氟苯酚基、二氟苯酚基、单氟苯酚基、五氯苯酚基、二氯苯酚基、四氯苯酚基、1‑羟基苯并三唑、酸酐或酰肼基团、酯或其他酸繁衍物。可与细胞结合分子或细胞结合试剂上的一个、两个或多个基团同期或按次反馈，在0‑60℃、ph为4‑9.5的水性介质中进行，可添加或不添加0‑30％水溶性(混溶)有机溶剂、经柱层析或透析后得到式(i)和(iii)的偶联物。式(iv)和(v)的lv1和lv2的反馈性基团，与改性的细胞结合分子以不同的阵势反馈。举例，制备式(i)中含双硫键衔接子的细胞结合剂‑鹅膏毒素类似物的偶联物，不错通过修饰的细胞结合剂中的二硫键与含游离巯基的lv1和lv2之间进行二硫键交换，或通过修饰的细胞结合剂中的游离巯基，与lv1和/或lv2上的二硫键进行交换。为了加快二硫化物交换反馈，二硫化物基团不时选自二硫吡啶、二硫硝基吡啶、二硫硝基苯、二硫硝基苯甲酸或二硫基二硝基苯等基团。[0254]式(i)和(iii)的偶联物中，含有硫醚键的衔接不时是通过以下阵势杀青的：在(iv)和(v)中的修饰的细胞结合剂或鹅膏毒素同系物上的马来酰亚胺基或卤代乙酰基或乙基磺酰基，分别与鹅膏毒素同系物上的目田巯基或是修饰的细胞结合剂上的巯基反馈；含有易被酸降解的腙键的衔接不错通过(iv)和(v)中药物或细胞结合分子上的羰基，与细胞结合分子上的或(iv)和(v)中药物上的酰肼基反馈而杀青，这些轨范是才能域熟知的(参见如p.hamann等.，cancer res.53，3336‑34，1993；b.laguzza等.，j.med.chem.，32，548‑55，1959；p.trail等.，cancer res.，57，100‑5，1997)；含有三唑键的衔接不错通过(iv)和(v)中药物或细胞结合分子上的炔基，与相应的叠氮，进行点击化学(huisgen环加成)反馈(lutz，jf.等，2008，adv.drug del.rev.60，958–70；sletten，em等2011，accchem.research 44，666–76)而杀青。含有肟键的衔接不错通过(iv)和(v)中药物或细胞结合分子上的酮或醛，与相应的羟胺反馈而杀青。含巯基的细胞结合分子不错与式(iv)和(v)中的，含有马来酰亚胺、卤代乙酰基或乙基磺酰基取代基的药物‑衔接子分子，在ph为5.5‑9.0的缓冲液中反馈，得到式(i)和(iii)中以硫醚衔接的偶联物。含巯基的细胞结合分子，也不错与式(iv)和(v)中带有吡啶基二硫基的药物‑衔接子发生二硫键交换，得到以二硫键衔接的偶联物。带有羟基或巯基的细胞结合分子不错与式(iv)和(v)中，带有卤素，出奇是羧酸酯的α位卤素的药物‑衔接子，在和睦的碱存在的情况下，比如ph为8.0‑9.5，反馈会得到带有醚或硫醚键的偶联药物。细胞结合分子上的羟基或氨基，可与(iv)和(v)中带有羧基的药物‑衔接子，在缩合剂如edc或dcc存在的情况下缩合，生成酯的衔接。含有氨基的细胞结合分子不错与药物‑衔接子分子上的下列基团的羧酸酯缩合，得到含酰胺键衔接子的偶联物：nhs、咪唑、硝基苯酚基、苯酚基、二硝基苯酚基、五氟苯酚基、四氟苯酚基、二氟苯酚基、单氟苯酚基、五氯苯酚基、三氟甲磺酰基、二氯苯酚基、四氯苯酚基、1‑羟基苯基三唑、甲苯磺酰基、甲磺酰基、2‑乙基‑5‑苯基异恶唑基‑3′‑磺酰基。[0255]合成的偶联物不错通过圭表生物化学轨范纯化，举例在sephadex g25或sephacryl s300柱上进行凝胶过滤，吸附色谱，离子交换，或透析。在一些情况下，细胞结合剂为小分子化合物(举例叶酸、黑素细胞刺激激素、egf等)，与小分子药物偶联后，不错通过色谱法纯化，举例hplc、中压柱层析法或离子交换色谱法。[0256]为了使与细胞结合分子，优选为抗体，上的一双游离巯基的偶联反馈有更高产率，可能需要在反馈混杂物中加入极少水溶性有机溶剂或相出动剂。可将式(iv)或(v)上的交联剂(衔接子)，以高浓度如1‑500mm溶解于可与水混溶的极性有机溶剂中，举例不同的醇(如甲醇、酒精和丙醇)、丙酮、乙腈、四氢呋喃(thf)、1，4‑二恶烷、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基乙酰胺(dma)或二甲基亚砜(dmso)。同期，将细胞结合分子，如抗体以1～50mg/ml浓度溶解在ph4～9.5，最优ph6～8.5的缓冲液中，再用0.5～20当量的tcep或dtt处理20分钟至48小时。还原后，dtt可通过sec色谱纯化去除。tcep也不错通过sec色谱法去除，或者留在反馈混杂物中，无需进一步纯化，但最佳用迭氮化物(如4‑叠氮苯甲酸、4‑(叠氮甲基)苯甲酸、叠氮聚乙二醇(如2‑(2‑(2‑(2‑叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)酒精)中庸tcep。此外，以tcep还原抗体或其他细胞结合剂，不错在式(iv)或(v)的药物共存时进行，此时药物与细胞结合分子的偶联，不错与tcep还原同期杀青。[0257]进行修饰细胞结合剂反馈的水溶液为ph4至9之间缓冲液，优选在6.0至7.5之间，何况不错含有适应用于这个ph范围的任何非亲核性缓冲盐。典型的缓冲液包括磷酸盐、乙酸盐、三酒精胺盐酸盐、hepes和mops缓冲液，也可含有其它组分，举例环糊精、羟丙基‑β‑环糊精、聚乙二醇、蔗糖和其它盐，如nacl和kcl。在将式(iv)或(v)中的药物‑衔接子加入到含有还原的细胞结合分子的溶液中后，反馈混杂物在4℃至45℃，优选15℃的温度下保温。对反馈程度的监测，不错测量在某一特定紫外线波长(举例252nm)吸亮度的减少，或某一特定紫外线波长(举例280nm)吸亮度的加多，或选拔其它妥贴波长。反馈完成后，被修饰的细胞结合剂不错以通例阵势被分离，举例使用凝胶过滤色谱、离子交换色谱、吸附色谱，硅胶或氧化铝柱层析色谱，结晶、制备薄层色谱或hplc轨范。[0258]不错通过测量反馈生成的硝基吡啶硫酮、二硝基吡啶二硫酮、吡啶硫酮、羧基酰胺基吡啶二硫酮和二羧基酰氨基吡啶二硫酮基团的紫外吸亮度，对修饰程度进行评估。关于莫得发色基团分子的偶联反馈、修饰或偶联反馈不错通过lc‑ms监测、优选hplc‑ms/ms、uplc‑qtof质谱或毛细管电泳质谱法(ce‑ms)监测。本发明所述的支链衔接子含有多种官能团，可与细胞结合分子，尤其是具有合适取代基的修饰的细胞结合分子反馈。举例，带有氨基或羟基的修饰的细胞结合分子，不错与带有n‑羟基琥珀酰亚胺(nhs)酯的药物反馈，带有巯基的修饰的细胞结合分子，不错与带有马来酰亚胺基或卤代乙酰基的药物反馈。另外，通过卵白质工程、酶促反馈或化学修饰得到的带有羰基(酮或醛)的修饰的细胞结合分子，不错与带有酰肼或烷氧基胺的药物反馈。基于修饰的细胞结合分子上官能团的反馈活性，才能域时期东说念主员不错很容易地细目使用哪种药物‑衔接子分子。[0259]细胞结合剂[0260]本发明中的细胞结合剂，包括偶联物内和被修饰的细胞结合剂，不错是现在已知的或行将公开的，大要与细胞片断结合，复合或反馈的，具有颐养兴致或者被生物学修饰的任何种类分子。[0261]细胞结合剂包括，但不仅限于大分子量卵白质，举例齐备抗体(多克隆抗体，单克隆抗体，二聚体，多聚体，多特异性抗体，举例双特异性抗体)；单链抗体；抗体片断如fab，fab'，f(ab')2，fv(parham，j.immunol.1983，131，2895‑2902)；由fab抒发库产生的片断，抗独到型(抗‑id)抗体；cdr；双价抗体；三价抗体；四价抗体；袖珍抗体；小免疫卵白；上述任何抗体的表位结合片断，能免疫特异性结合癌细胞抗原，病毒抗原，微生物抗原；由免疫系统产生的卵白质，大要识别、结合特定抗原或具有渴望的生物学活性(miller等j.of immunology 2003，170，4854‑4861)；干涉素(如i，ii，iii型)；多肽；淋巴因子如il‑2，il‑3，il‑4，il‑5，il‑6，il‑10，il‑11，il‑16，il‑17，gm‑csf，干涉素‑γ(ifn‑γ)；激素举例胰岛素，trh(促甲状腺激素开释激素)，msh(促黑素细胞激素)，类固醇激素如雄激素和雌激素；滋长因子和集落刺激因子，如表皮滋长因子(egf)，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm‑csf)，转化滋长因子(tgf)如tgfα，tgfβ，胰岛素和胰岛素样滋长因子(igf‑i，igf‑ii)，g‑csf，m‑csf和gm‑csf(burgess，immunology today 1984，5，155‑158)；牛痘滋长因子(vgf)；成纤维细胞滋长因子(fgf)；小分子量的卵白质；多肽；肽和肽激素，如铃蟾肽，胃泌素，胃泌素开释肽；血小板繁衍的滋长因子；白细胞介素和细胞因子，举例，白细胞介素‑2(il‑2)，白细胞介素‑6(il‑6)，白血病扼制因子，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm‑csf)；维生素，如叶酸；脱辅基卵白和糖卵白，如转铁卵白(o'keefe et al，j.biol.chem.1985 260 932‑937)；糖结合卵白或脂卵白，如凝集素；细胞养分传递分子；小分子扼制剂，如前方腺特异性膜抗原(psma)扼制剂和小分子酪氨酸激酶扼制剂(tki)，非肽或任何其它细胞结合分子或物资，如生物活性团聚物(dhar，et al，proc.natl.acad.sci.2008，105，17356‑61)，和会卵白，激酶扼制剂，基因靶向剂，生物活性树枝状大分子(lee，et al，nat.biotechnol.2005，23，1517‑26；almutairi，et al；proc.natl.acad.sci.2009，106，685‑90)，纳米粒子(liong，et al，acs nano，2008，19，1309‑12；medarova，et al，nat.med.2007，13，372‑7；javier，et al，bioconjugate chem.2008，19，1309‑12)，脂质体(medinai，et al，curr.phar.des.2004，10，2981‑9)和病毒外壳(flenniken，et al，viruses nanotechnol.2009，327，71‑93)。[0262]一般而言，如果妥贴的单克隆抗体是可用的，则优选单克隆抗体四肢细胞名义结合剂。抗体不错是鼠源，东说念主源，东说念主源化，嵌合或源于其他物种。[0263]用于本发明中的抗体的坐褥包括体内或体外轨范或其组合。坐褥多克隆抗受体肽抗体的轨范在才能域是公知的，举例好意思国专利4，493，795中所述。不时是通过将骨髓瘤细胞，与仍是用所需抗原免疫的小鼠的脾细胞和会，来制备单克隆抗体(g.；milstein，c.nature 1975，256：495‑497)。详备的经由在“antibodies‑‑alaboratory manual，harlow and lane，eds.，cold spring harbor laboratory press，new york(1988)”中有描绘，此处引作参考。具体地，不错用狡计抗原，如从靶细胞、齐备的病毒、灭活的全病毒和病毒卵白质分离的抗原，来免疫小鼠，大鼠，仓鼠或任何其它哺乳动物而制备。不时使用聚乙二醇(peg)6000将脾细胞与骨髓瘤细胞和会。通过对hat(次黄嘌呤‑氨基蝶呤‑胸腺嘧啶)的敏锐性来筛选和会细胞。通过它们免疫反馈特异性受体的才气或扼制靶细胞上的受体活性的才气，不错细目扩充本发明的单克隆抗体的杂交瘤。[0264]用于本发明中的单克隆抗体的坐褥在单克隆杂交瘤培养物里进行，其中包含养分培养基和能分泌具有合适抗原特异性的抗体分子的杂交瘤。培养物在合适的条款下保持弥散长的一段时分，以使杂交瘤将抗体分子分泌到培养基。然后收罗含有抗体的培养基。使用通过公知的时期进一步分离抗体分子，如卵白质a亲和层析，阴离子、阳离子、疏水或体积排阻色谱法(出奇是通过卵白质a亲和层析和体积排阻色谱法)，离心，各别溶解度或任何其他纯化卵白质的圭表时期。[0265]可用于制备这些组合物的培养基在才能域中是公知的，何况可买卖获取，也包括合成培养基。一个合成的培养基的例子是dulbecco最少必需培养基(dmem；dulbecco et al.，virol.1959，8，396)补充有4.5g/ml葡萄糖，0‑20mm谷氨酰胺，0‑20％胎牛血清，几个ppm的cu，mn，fe或zn等重金属或/和重金属盐，以及消泡剂如聚氧乙烯‑聚氧丙烯嵌段共聚transduct res.2003；23(4):307‑49)。从偶然肽库中获取的肽不错同抗体和抗体片断类似地被使用。肽或卵白质结合分子不错偶联或衔接至大分子或其他物资，包括但不限于白卵白、团聚物、脂质体、纳米粒子、树形分子，只消这么的衔接能保留肽或卵白质的抗原结合特异性。[0271]在颐养癌症、自身免疫性疾病和/或传染性疾病的偶联物上，和药物分子通过本发明的衔接子衔接的抗体的例子包括，但不限于3f8(抗gd2)，阿巴单抗(抗ca‑125)，阿昔单抗(抗cd41(整联卵白α‑iib)，阿达木单抗(抗tnf‑α)，adecatumumab(抗epcam，cd326)，阿非莫单抗(抗tnf‑α)，afutuzumab(抗cd20)，alacizumab单抗(抗vegfr2)，ald518(抗il‑6)，alemtuzumab(campath，mabcampath，抗cd52)，altumomab(抗cea)，anatumomab(抗tag‑72)，anrukinzumab(ima‑638，抗‑il‑13)，apolizumab(抗‑hla‑dr)，阿奇单抗(抗‑cea)，阿塞珠单抗(抗‑l‑选拔卵白cd62l)，atlizumab(tocilizumab，actemra，roactemra，抗‑il‑6受体)，atorolimumab(抗‑rhesus因子)，bapineuzumab(抗‑β淀粉样卵白)，basiliximab(simulect，抗cd25(il‑2受体的α链))，bavituximab(抗磷脂酰丝氨酸)，bectumomab(lymphoscan，抗‑cd22)，贝利单抗(benlysta，lymphostat‑b，抗baff)，benralizumab(抗cd125)，bertilimumab(抗ccl11(eotaxin‑1))，besilesomab(scintimun，抗cea干系抗原)，贝伐单抗(avastin，抗vegf‑a)，biciromab(fibriscint，抗纤维卵白iiβ链)，bivatuzumab(抗‑cd44v6)，blinatumomab(bite，抗cd19)，brentuximab(cac10，抗‑cd30 tnrsf8)，briakinumab(抗il‑12，il‑23)，canakinumab(ilaris，抗il‑1)，cantuzumab(c242，抗canag)，capromab，catumaxomab(removab，抗epcam，抗cd3)，cc49(抗tag‑72)，cedelizumab(抗cd4)，certolizumab单抗(cimzia抗tnf‑α)，西妥昔单抗(爱必妥，imc‑c225，抗egfr)，citatuzumab bogatox(抗epcam)，cixutumumab(抗igf‑1)，clenoliximab(抗cd4)，clivatuzu‑mab(抗muc1)，conatumumab(抗trail‑r2)，cr6261(抗流感a血凝素)，dacetuzumab(抗cd40)，daclizumab(zenapax，抗cd25(il‑2受体α链))，daratumumab(抗cd38(环adp核糖水解酶)，denosumab(prolia，抗rankl)，detumomab(抗b淋巴瘤细胞)，dorlimomab，dorlixizumab，ecromeximab(抗gd3神经节苷脂)，eculizumab(soliris，抗‑c5)，edobacomab(抗内毒素)，edrecolomab(panorex，mab17‑1a，抗‑epcam)，efalizumab(raptiva，抗lfa‑1(cd11a))，efungumab(mycograb，抗hsp90)，elotuzumab(抗slamf7)，elsilimomab(抗il‑6)，enlimomab单抗(抗icam‑1(cd54))，epitumomab(抗episialin)，依他珠单抗(抗‑cd22)，erlizumab(抗‑itgb2(cd18))，ertumaxomab(rexomun，抗her2/neu，cd3)，依他拉单抗(abegrin，抗整联卵白αvβ3)，exbivirumab(抗乙肝名义抗原)，fanolesomab(neutrospec，抗cd15)，faralimomab(抗干涉素受体)，farletuzumab(抗叶酸受体1)，felvizumab(抗呼吸说念合胞病毒)，fezakinumab(抗‑il‑22)，figitumumab(抗‑igf‑1受体)，fontolizumab(抗‑ifn‑γ)，foravirumab(抗狂犬病病毒糖卵白)，fresolimumab(抗tgf‑β)，galiximab(抗cd80)，gantenerumab(抗β淀粉样卵白)，gavilimomab(抗cd147(basigin))，gemtuzumab(抗cd33)，girentuximab(抗碳酸酐酶9)，glembatumumab(cr011，抗gpnmb)，golimumab(simponi，抗‑tnf‑α)，gomiliximab(抗‑cd23(ige受体))，ibalizumab(抗‑cd4)，ibritumomab(抗cd20)，igovomab(indimacis‑125，抗ca‑125)，imciromab(myoscint，抗心肌肌凝卵白)，infliximab(remicade，抗tnf‑α)，intetumumab(抗cd51)，inolimomab(抗cd25(il‑2受体α链)，伊珠单抗(抗‑cd22)，ipilimumab(抗cd152)，iratumumab(抗cd30(tnfrsf8))，keliximab(抗‑cd4)，labetuzumab(cea‑cide，抗cea)，lebrikizumab(抗il‑13)，lemalesomab(抗nca‑90(粒细胞抗原))，lerdelimumab(抗tgfβ2)，lexatumumab(抗trail‑r2)，libivirumab(抗乙肝名义抗原)，lintuzumab(抗cd33)，鲁米木单抗(抗cd40)，鲁米单抗(抗cd23(ige受体)，mapatumumab(抗trail‑r1)，马西莫单抗(抗t‑细胞受体)，马妥珠单抗(抗egfr)，mepolizumab(bosatria，抗il‑5)，metelimumab(抗tgfβ1)，milatuzumab(抗cd74)，minretumomab(抗tag‑72)，mitumomab(bec‑2，抗gd3神经节苷脂)，morolimumab(抗恒河猴因子)，motavizumab(numax，抗呼吸说念合胞病毒)，muromonab‑cd3(orthoclone okt3，抗cd3)，nacolomab(抗c242)，naptumomab(抗5t4)，那他珠单抗(tysabri，抗整联卵白α4)，奈巴单抗(抗内毒素)，necitumumab(抗egfr)，nerelimomab(抗‑tnf‑α)，nimotuzumab(theracim，theraloc，抗‑egfr)，nofetumomab，ocrelizumab(抗cd20)，奥利木单抗(afolimomab，抗lfa‑1(cd11a))，ofatumumab(arzerra，抗cd20)，olaratumab(抗pdgf‑rα)，omalizumab(xolair，抗ige fc区)oportuzumab(抗epcam)，oregovomab(ovarex，抗ca‑125)，otelixizumab(抗cd3)，pagibaximab(抗脂磷壁酸)，palivizumab(synagis，abbosynagis，抗呼吸说念合胞病毒)，帕尼单抗(vectibix，abx‑egf，抗egfr)，panobacumab(抗铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa))，帕考珠单抗(抗il‑4)，pemtumomab(theragyn，抗muc1)，pertuzumab(omnitarg，2c4，抗her2/neu)，pexelizumab(抗c5)，pintumomab(抗腺癌抗原)，priliximab(抗‑d4)，pritumumab(抗波形卵白)，pro140(抗‑ccr5)racotumomab(1e10，抗‑n‑羟乙酰神经氨酸(neugc，ngna)‑神经节苷脂gm3))，rafivirumab(抗狂犬病病毒糖卵白)，ramucirumab(抗vegfr2)，ranibizumab(lucentis，抗vegf‑a)，raxibacumab(抗炭疽毒素，保护性抗原)，regavirumab(抗巨细胞病毒糖卵白b)，reslizumab(抗‑il‑5)，rilotumumab(抗‑hgf)，rituximab(mabthera，rituxanmab，抗‑cd20)，robatumumab(抗‑igf‑1受体)，rontalizumab(抗ifn‑α)，rovelizumab(leukar‑rest，抗cd11，cd18)，ruplizumab(antova，抗cd154(cd40l))，satumomab(抗tag‑72)，sevirumab(抗巨细胞病毒)，sibrotuzumab(抗fap)，西式木单抗(抗ifn‑α)，siltuximab(抗il‑6)，siplizumab(抗cd2)，smart mi95(抗cd33)，solanezumab(抗β淀粉状卵白)，sonepcizumab(抗鞘氨醇‑1‑磷酸)，sontuzumab(抗‑episialin)，stamulumab(抗‑myostatin)，sulesomab(leukoscan，抗nca‑90(粒细胞抗原))，tacatuzumab(抗α甲胎卵白)，tadocizumab(抗整联卵白αiibβ3)，talizumab(抗ige)，tanezumab(anti‑ngf)，taplitumomab(抗cd19)，tefibazumab(aurexis，(抗凝华因子a))，telimomab，tenatumomab(抗腱生卵白c)，teneliximab(抗cd40)，teplizumab(抗cd3)，tgn1412(抗cd28)，ticilimumab(tremelimumab，抗‑ctla‑4)，tigatuzumab(抗trail‑r2)，tnx‑650(抗il‑13)，tocilizumab(atlizumab，actemra，roactemra，il‑6受体)，toralizumab(抗cd154(cd40l))，tositumomab(抗cd20)，曲妥珠单抗(赫赛汀，抗her2/neu)，tremelimumab(抗ctla‑4)，tucotuzumab celmoleukin(抗epcam)，tuvirumab(抗乙型肝炎病毒)，urtoxazumab(抗大肠杆菌)，ustekinumab(stelara，抗‑il‑12，il‑23)，vapaliximab(抗‑aoc3(vap‑1))，维多珠单抗(抗整联卵白α4β7)，维妥珠单抗(抗cd20)，vepalimomab(抗aoc3(vap‑1))，visilizumab(nuvion，抗cd3)，vitaxin(抗血管整合素avb3)，volociximab(抗整联卵白α5β1)，votumumab(humaspect，抗肿瘤抗原ctaa16.88)，zalutumumab(humax‑egfr，zanolimumab(humax‑cd4，抗‑cd4)，ziralimumab(抗‑cd147(basigin))，zolimomab(抗‑cd5)，依那西普alefaceptabataceptrilonacept(arcalyst)，14f7(抗irp‑2(铁颐养卵白2))，14g2a(抗gd2神经节苷脂，源于nat.cancer inst.，颐养黑素瘤和实体瘤)，j591(抗‑psma，源于weill cornell医学院，颐养前方腺癌)，225.28s(抗hmw‑maa(高分子量黑素瘤干系抗原)，sorin radiofarmaci srl(源于意大利米兰，颐养玄色素瘤)，col‑1(抗ceacam3，cgm1，源于nat cancer inst.颐养结肠直肠癌和胃癌)，cyt‑356(颐养前方腺癌)，hnk20(oravax inc.颐养呼吸说念合胞病毒感染)，immurait(源于immunomedics，颐养nhl)，lym‑1(抗hla‑dr10，peregrine pharm)，mak‑195f(抗tnf(肿瘤坏死因子，tnfa，tnf‑α，tnfsf2，源于abbott/knoll，颐养脓毒症中毒性休克)，medi‑500(t10b9，抗cd3，trαβ(t细胞受体α/β)，源于medimmune inc，用于移植物抗宿主疾病病)，ring scan(抗tag 72(肿瘤干系糖卵白72)，源于neoprobe corp.，用于乳腺癌，结肠癌和直肠癌)，avicidin(抗epcam(上皮细胞粘附分子))，抗‑tacstd1(肿瘤干系钙信号转导1)，抗ga733‑2(胃肠肿瘤干系卵白2)，抗egp‑2(上皮糖卵白2)，抗ksa，ks1/4抗原，m4s，肿瘤抗原17‑1a，cd326(源于neorx公司，颐养结肠癌，卵巢癌，前方腺癌和nhl)，lymphocide(源于immunomedics)，smart id10(源于protein design labs)，oncolym(源于techniclone inc)，allomune(源于biotransplant)，抗vegf(源于genentech)，ceacide(源于immunomedics)，imc‑1c11(源于imclone systems)和cetuximab(源于imclone)。[0272]其他可四肢细胞结合分子/配体的抗体，包括但不限于，以下抗原的抗体：氨肽酶n(cd13)，膜联卵白a1，b7‑h3(cd276，各式癌症)，ca125(卵巢癌)，ca15‑3(各式癌症)，ca19‑9(各式癌症)，l6(各式癌症)，路易斯y(各式癌症)，路易斯x(各式癌症)，甲胎卵白(各式癌症)，ca242(结直肠癌)，胎盘碱性磷酸酶(各式癌症)，前方腺特异抗原(前方腺癌)，前方腺酸磷酸酶(前方腺癌)，表皮滋长因子(各式癌症)，cd2(霍奇金症，nhl淋巴瘤，多发性骨髓瘤)，cd3ε(t细胞淋巴瘤，肺癌，乳腺癌，胃癌，卵巢癌，自身免疫性疾病，恶性腹水)，cd19(b细胞恶性肿瘤)，cd20(非霍奇金淋巴瘤)，cd22(白血病，淋巴瘤，多发性骨髓瘤，sle)，cd30(霍奇金淋巴瘤)，cd33(白血病，自身免疫性疾病)，cd38(多发性骨髓瘤)，cd40(淋巴瘤，多发性骨髓瘤，白血病(cll))，cd51(出动性玄色素瘤，赘瘤)，cd52(白血病)，cd56(小细胞肺癌，卵巢癌，梅克细胞癌，以及液体肿瘤，多发性骨髓瘤)，cd66e(各式癌症)，cd70(出动性肾细胞癌和非霍奇金淋巴瘤)，cd74(多发性骨髓瘤)，cd80(淋巴瘤)，cd98(各式癌症)，粘液素(各式癌症)，cd221(实体肿瘤)、cd227(乳腺癌、卵巢癌)、cd262(非小细胞肺癌偏激他癌症)、cd309(卵巢癌)、cd326(实体肿瘤)、ceacam3(结肠直肠癌、胃癌)、ceacam5(癌胚抗原，cea，cd66e)(乳腺，结直肠癌和肺癌)，dll4，egfr(表皮滋长因子受体，各式癌症)，ctla4(玄色素瘤)，cxcr4(cd184，血液肿瘤，实体肿瘤)，endoglin(cd105，实体瘤)，epcam(上皮细胞粘附分子，膀胱癌，头颈癌，结肠癌，nhl前方腺癌，卵巢癌)，erbb2(表皮滋长因子受体2，肺癌，乳腺癌，前方腺癌)，fcgr1(自身免疫性疾病)，folr(叶酸受体，卵巢癌)，gd2神经节苷(各式癌症)，g‑28(细胞名义抗原糖脂质，玄色素瘤)，gd3独到型(各自癌症)，热休克卵白(各式癌症)，her1(肺癌，胃癌)，her2(乳腺癌，肺癌和卵巢癌)，hla‑dr10(nhl)，hla‑drb(nhl，b细胞白血病)，东说念主绒毛膜促性腺激素(各式癌症)，igf1r(类胰岛素滋长因子1受体，实体瘤，血癌)，il‑2受体(白介素2受体，t细胞白血病和淋巴瘤)，il‑6r(白介素6受体，多发性骨髓瘤，风湿性环节炎，castleman病，白细胞介素6依赖肿瘤)，整合卵白(αvβ3、α5β1、α6β4、αllβ3、α5β5、αvβ5，各式癌症)，mage‑1(各式癌症)，mage‑2(各式癌症)，mage‑3(各式癌症)，mage 4(各式癌症)，抗转铁卵白受体(各式癌症)，p97(玄色素瘤)，ms4a1(跨膜4结构域亚眷属a成员1，非霍奇金b细胞淋巴瘤，白血病)，muc1或muc1‑klh(乳腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、支气管癌和α胃肠说念癌)，muc16(ca125)(卵巢癌)，cea(结直肠癌)，gp100(玄色素瘤)，mart1(玄色素瘤)，mpg(黑素瘤)，ms4a1(跨膜4结构域亚眷属a成员1，小细胞肺癌，nhl)，nucleolin，neu癌基因居品(各自癌症)，p21(各式癌)，抗(n‑羟乙酰神经氨酸)抗体结合部位(乳腺癌，玄色素瘤)，类plap睾丸碱性磷酸酶(卵巢癌、睾丸癌)，psma(前方腺瘤)，psa(前方腺癌)，robo4，tag 72(肿瘤干系糖卵白72，aml，胃癌、结肠直肠癌、卵巢癌)，t细胞跨膜卵白(各式癌症)，tie(cd202b)，tnfrsf10b(肿瘤坏死因子受体超眷属成员10b，各式癌症)，tnfrsf13b(肿瘤坏死因子受体超眷属成员13b，多发性骨髓瘤，nhl，其他癌症，ra和sle)，tpbg(滋补细胞糖卵白，肾细胞癌)，trail‑r1(tnf干系坏死疏浚配体受体1，淋巴瘤，nhl，结直肠癌，肺癌)，vcam‑1(cd106，玄色素瘤)，vegf，vegf‑a，vegf‑2(cd309)(各式癌症)。其它可被抗体识别的，肿瘤干系抗原已被哀悼和指摘(gerber，et al，mabs 2009，1:3，247‑253；novellino et al，cancer immunolimmunother.2005，54(3)，187‑207；franke，et al，cancer biotherradiopharm.2000，15，459‑76)。[0273]细胞结合剂，优选为抗体，大要抗以下细胞：肿瘤细胞，病毒感染细胞，微生物感染细胞，寄生虫感染细胞，自身免疫细胞，活化的细胞，骨髓细胞，活化的t细胞，b细胞，或玄色素细胞。更具体地，细胞结合剂不错是任何大要抗下列抗原或受体之一的试剂/分子：cd1、cd1a、cd1b、cd1c、cd1d、cd1e、cd2、cd3、cd3d、cd3e、cd3g、cd4、cd5、cd6、cd7、cd8、cd9、cd10、cd11a、cd11b、cd11c、cd12w、cd14、cd15、cd16、cdw17、cd18、cd19、cd20、cd21、cd22、cd23、cd24、cd25、cd26、cd27、cd28、cd29、cd30、cd31、cd32、cd33、cd34、cd35、cd36、cd37、cd38、cd39、cd40、cd41、cd42、cd43、cd44、cd45、cd46、cd47、cd48、cd49b、cd49c、cd51、cd52、cd53、cd54、cd55、cd56、cd58、cd59、cd61、cd62e、cd62l、cd62p、cd63、cd66、cd68、cd69、cd70、cd72、cd74、cd79、cd79a、cd79b、cd80、cd81、cd82、cd83、cd86、cd87、cd88、cd89、cd90、cd91、cd95、cd96、cd98、cd100、cd103、cd105、cd106、cd109、cd117、cd120、cd125、cd126、cd127、cd133、cd134、cd135、cd138、cd141、cd142、cd143、cd144、cd147、cd151、cd147、cd152、cd154、cd156、cd158、cd163、cd166、.cd168、cd174、cd180、cd184、cdw186、cd194、cd195、cd200、cd200a、cd200b、cd209、cd221、cd227、cd235a、cd240、cd262、cd271、cd274、cd276(b7‑h3)、cd303、cd304、cd309、cd326、4‑1bb、5ac、5t4(trophoblast糖卵白、tpbg、wnt‑活化扼制因子1或waif1)、腺癌抗原、ags‑5、ags‑22m6、启动素受体激酶1、afp、akap‑4、alk、α整合素、αvβ6、氨基肽酶n、淀粉样卵白β、雄激素受体、促血管新生卵白因子2、促血管新生卵白因子3、膜联卵白a1、炭疽毒素保护性抗原、抗出动卵白受体、aoc3(vap‑1)、b7‑h3、炭疽杆菌、baff(b细胞启动因子)、b淋巴瘤细胞、bcr‑abl、蛙皮素、boris、c5、c242抗原、ca125(糖抗原125、muc16)、ca‑ix(或caix、碳酸酐酶9)、calla、canag、犬红斑狼疮il31、碳酸酐酶ix、心肌肌凝卵白、ccl11(c‑c片断趋化因子11)、ccr4(c‑c趋化因子受体4、cd194)、ccr5、cd3e(ε)、cea(癌胚抗原)、ceacam3、ceacam5(癌胚抗原)、cfd(因子d)、ch4d5、胆囊收缩素2(cck2r)、cldn18(claudin‑18)、丛生因子a、cripto、fcsf1r(集落刺激因子1受体、cd115)、csf2(集落刺激因子2、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子(gm‑csf))、ctla4(细胞毒性t淋巴细胞干系卵白4)、ctaa16.88肿瘤抗原、cxcr4(cd184)、c‑x‑c趋化因子受体4、环状adp核糖核酸酶、细胞周期卵白b1、cyp1b1、巨细胞病毒、巨细胞病毒糖卵白b、dabigatran、dll3(类δ配体3)、dll4(类δ配体4)、dpp4(双肽‑肽酶4)、dr5(牺牲受体5)、大肠杆菌shiga毒素类型‑1、大肠杆菌shiga毒素类型‑2、ed‑b、egfl7(类egf结构域卵白7)、egfr、egfrii、egfrviii、内皮因子(cd105)、内皮素b受体、内毒素、epcam(上皮细胞粘附分子)、epha2、episialin、erbb2(表皮滋长因子受体2)、erbb3、erg(tmprss2 ets和会基因)、大肠杆菌、etv6‑aml、fap(成纤维细胞活化卵白α)、fcgr1、甲胎卵白、纤维卵白iiβ链、纤连卵白额外结构域‑b、folr(叶酸受体)、叶酸受体α、叶酸水解酶、fos干系抗原1、呼吸说念合胞病毒的f卵白、卷曲的受体、岩藻糖gm1、gd2神经节苷脂、g‑28(细胞名义抗原糖脂)、gd3独到型、globoh、glypican 3、n‑羟乙酰神经氨酸、gm3、gmcsf受体α链、滋长分化因子8、gp100、gpnmb(跨膜糖卵白nmb)、gucy2c(鸟苷酸环化酶2c)、鸟苷酸环化酶c(gc‑c)、肠鸟苷酸环化酶、鸟苷酸环化酶c受体、热踏实肠毒素受体(hstar)、热休克卵白、血凝素、乙肝名义抗原、乙型肝炎病毒、her1(东说念主类表皮滋长因子受体1)、her2、her2/neu、her3(erbb‑3)、igg4、hgf/sf(肝细胞滋长因子/分散因子)、hhgfr、hiv‑1、组卵白复合物、hla‑dr(东说念主类白细胞抗原)、hla‑dr10、hla‑drb、hmwmaa、东说念主类绒毛膜促性腺激素、hngf、东说念主类分散因子受体激酶、hpv e6/e7、hsp90、htert、icam‑1(细胞间粘附分子1)、独到型、igf1r(igf–1、类胰岛素滋长因子1受体)、ighe、ifn‑γ、流感血凝素、ige、ige fc区、ighe、il–1、il‑2r(白介素2受体)、il–4、il‑5、il–6、il‑6r(白介素6受体)、il‑9、il–10、il–12、il‑13、il‑16、il‑17、il‑17a、il‑20、il‑22、il‑23、il31ra、ilgf2(类胰岛素滋长因子2)、整合卵白(α4、αiibβ3、αvβ3、α4β7、α5β1、α6β4、α7β7、αllβ3、α5β5、αvβ5)、干涉素γ疏浚卵白质、itga2、itgb2、kir2d、lck、le、legumain、lewis‑y抗原、lfa‑1(淋巴细胞功颖慧系抗原1、cd11a)、lhrh、lingo‑1、脂磷壁酸、liv1a、lmp2、lta、mad‑ct‑1、mad‑ct‑2、mage‑1、mage‑2、mage‑3、mage a1、mage a3、mage 4、mart1、mcp‑1、mif(巨噬细胞迁移扼制因子、或糖基扼制因子(gif))、ms4a1(跨膜4结构域亚眷属a成员1)、msln(间皮素)、muc1(粘卵白1、细胞名义干系(muc1)或多态性上皮粘卵白(pem))、muc1‑klh、muc16(ca125)、mcp1(单核细胞趋化卵白1)、melana/mart1、ml‑iap、mpg、ms4a1、mycn、髓磷脂干系糖卵白、myostatin、na17、narp‑1、nca‑90(粒细胞抗原)、nectin‑4(asg‑22me)、ngf、神经细胞凋一火调控卵白酶1、nogo‑a、notch受体、核仁素、neu致癌基因居品、ny‑br‑1、ny‑eso‑1、ox‑40、oxldl(氧化低密度脂卵白)、oy‑tes1、p21、p53非突变体、p97、pap、抗(n‑羟乙酰神经氨酸)抗体结合部位、pax3、pax5、pcsk9、pdcd1(pd‑1、圭表性细胞牺牲卵白1、cd279)、pdgf‑rα(α血小板源滋长因子受体)、pdgfr‑β、pdl‑1、plac1、类plap睾丸碱性磷酸酶、血小板繁衍滋长因子受体β、磷酸钠挽救转运体、pmel 17、聚唾液酸、卵白酶3(pr1)、前方腺癌、ps(磷脂酰丝氨酸)、前方腺癌细胞、铜绿假单胞菌、psma、psa、psca、狂犬病病毒糖卵白、rhd(rh多肽1(rhpi)、cd240)、rhesus因子、rankl、rhoc、ras突变、rgs5、robo4、呼吸说念合胞病毒、ron、赘瘤易位断点、sart3、sclerostin、slamf7(slam成员7)、selectin p、sdc1(多配体卵白聚糖1)、系统性红斑狼疮(a)、滋长颐养素c、sip(1‑磷酸鞘氨醇)、滋长激素扼制素、精子卵白17、ssx2、steap1(6‑跨膜上皮前方腺抗原1)、steap2、stn、tag‑72(肿瘤干系糖卵白)、存活素、t细胞受体、t细胞跨膜卵白、tem1(肿瘤血管内皮符号1)、tenb2、tenascin c(tn‑c)、tgf‑α、tgf‑β(转化滋长因子β)、tgf‑β1、tgf‑β2(转化滋长因子2)、tie(cd202b)、tie2、tim‑1(cdx‑014)、tn、tnf、tnf‑α、tnfrsf8、tnfrsf10b(肿瘤坏死因子受体超眷属成员10b)、tnfrsf13b(肿瘤坏死因子受体超眷属成员13b)、tpbg(滋补细胞糖卵白)、trail‑r1(tnf干系坏死疏浚配体受体1)、trailr2(牺牲受体5(dr5))、肿瘤干系的钙信号传感子2、肿瘤特异糖基化的muc1、tweak受体、tyrp1(糖卵白75)、trp‑2、酪氨酸酶、vcam‑1(cd106)、vegf、vegf‑a、vegf‑2(cd309)、vegfr‑1、vegfr‑2、vimentin、wt1、xage 1、抒发胰岛素滋长因子受体的细胞、或抒发表皮滋长因子受体的细胞。[0274]在另一个具体扩充例中、细胞结合分子不错是选自以下的配体或受体激昂剂：叶酸繁衍物(与叶酸受体结合、在卵巢癌和其他恶性肿瘤中超抒发的卵白质)(low，ps等2008，acc.chem.res.41，120‑9)；谷氨酸脲繁衍物(与前方腺特异性膜抗原结合、前方腺癌细胞的名义标志物)(hillier，sm等，2009，cancer res.69，6932‑40)；滋长扼制素(也称为滋长激素扼制激素(ghih)或滋长激素开释扼制因子(srif)或滋长激素开释扼制激素)偏激同系物，如奥曲肽(sandostatin)和兰瑞肽(somatuline)(出奇是用于神经内分泌肿瘤，产生gh的垂体腺瘤、副神经节瘤、非功能性垂体腺瘤、嗜铬细胞瘤(ginj，m.，等，2006，proc.natl.acad.sci.usa103，16436‑41)，以下瘤中滋长激素扼制素受体亚型(sst1、sst2、sst3、sst4和sst5)：分泌gh的垂体腺瘤(reubi jc，l和olt，am 1984j.clin.endocrinol metab59：1148–51；re ubi jc，l和olt am 1987j clin endocrinol metab 65：65–73；moyse e，等，j clin endocrinol metab 61：98–103)，胃肠胰腺肿瘤(reubi jc，等，1987j clin endocrinol metab 65：1127–34；reubi，j.c，等，1990cancer res 50：5969–77)，嗜铬细胞瘤(epel‑baum j，等1995j clin endocrinol metab 80:1837–44；reubi j c等，1992j clin endocrinol metab 74：1082–9)，神经母细胞瘤(prevost g，1996neuroendocrinology 63:188–197；moertel，c.l，等1994am j clin path102:752–756)，甲状腺髓样癌(reubi，j.c，等1991lab invest 64:567–573)，小细胞肺癌(sagman u，等，1990cancer 66:2129–2133)，脑膜瘤、成神管理细胞瘤或胶质瘤(reubi jc，等1986j clin endocrinol metab 63：433–8；reubi jc，等1987cancer res 47：5758–64；fruhwald，m.c，等1999pediatr res 45：697–708)，乳腺癌(reubi jc，等1990int j cancer 46：416–20；srkalovic g，等1990j clin endocrinol metab 70：661–669)，淋巴瘤(reubi jc，等1992，int j cancer50：895–900)，肾细胞癌(reubi jc，等1992，cancer res 52：6074–6078)，间充质肿瘤(reubi jc，等1996cancer res 56：1922–31)，前方腺癌(reubi j c，等1995，j.clin.endocrinol metab 80：2806–14；等1989，prostate 14:191–208；halmos g，等j.clin.endo‑crinol metab 85：2564–71)，卵巢癌(halmos，g，等，2000j clin endocrinol metab 85：3509–12；reubi jc，等1991am j pathol 138:1267–72)，胃癌(reubi jc，等1999，int j cancer 81：376–86；miller，g.v，1992br j cancer 66：391–95)，肝癌(kouroumalis e，等1998gut 42：442–7；reubi j c，等1999gut45：66–774)及鼻咽癌(loh k.s，等，2002virchows arch 441：444–8)；芳醇磺酰胺(碳酸酐酶ix特异性)(缺氧和肾细胞癌的标志物)(neri，d.，等，nat.rev.drug discov.2011，10，767‑7)；垂体腺苷酸环化酶启动肽(pacap)(pac1)(用于嗜铬细胞瘤和副神经节瘤)；血管活肠肽(vip)偏激受体亚型(vpac1，vpac2)；α‑黑素细胞刺激素(α‑msh)受体；胆囊收缩素(cck)或胃泌素受体偏激受体亚型(cck1(以前称为cck‑a)和cck2；血管活性肠肽(vip)偏激受体子类(vpac1、vpac2)；α‑黑素细胞刺激素(α‑msh)受体；胆囊收缩素(cck)或胃泌素受体偏激受体亚型(cck)；铃蟾肽(pyr‑gln‑arg‑leu‑gly‑asn‑gln‑trp‑ala‑val‑gly‑his‑leu‑met‑nh2)或胃泌素开释肽(grp)偏激受体子类(bb1，grp受体子类(bb2)、bb3和bb4)(ohlsson，b.，等，1999，sc和.j.gastroenterology 34(12)：1224–9；weber，hc，2009，cur.opin.endocri.diab.obesity 16(1)：66–71，gonzalez n，等，2008，cur.opin.endocri.diab.obesity15(1)，58‑64)；神经降压素受体偏激受体亚型(ntr1，ntr2，ntr3)；物资p受体偏激受体亚型(举例神经胶质肿瘤的nk1受体，hennig i m，等1995int.j.cancer 61，786–792)；神经肽y(npy)受体偏激受体亚型(y1–y6)；归巢肽包括rgd(arg‑gly‑asp)、ngr(asn‑gly‑arg)、二聚和多聚环状rgd肽(如crgdfv)(laakkonen p，vuorinen k.2010，integr biol(camb).2(7–8)：326–337；chen k，chen x.2011，theranostics.1:189–200；garanger e，等，anti‑cancer agents med chem.7(5)：552–558；kerr，js等，anticancer research，19(2a)，959‑968；thumshirn，g，等，2003chem.eur.j.9，2717‑2725)，及taasgvrsmh或ltlrwvglms(硫酸软骨素卵白多糖ng2受体)和f3肽(与细胞名义抒发的核仁素受体结合的31个氨基酸肽)(zitzmann，s.，2002cancer res.，62，18，5139–5143；temminga，k.，2005，drug resistance updates，8，381–402；p.laakkonen和k.vuorinen，2010integrative biol，2(7‑8)，326–337；m.a.burg，1999cancer res.，59(12)，2869–2874；k.porkka等2002，proc.nat.acad.sci.usa 99(11)，7444‑9)；细胞穿透肽(cpps)(nakase i，等，2012，j.control release.159(2)，181–188)；肽激素，举例促黄体激素开释激素(lhrh)的激昂剂和拮抗剂，促性腺激素开释激素(gnrh)激昂剂，通过靶向卵泡刺激素(fsh)和促黄体激素(lh)以及睾酮产生而作用，如布舍瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑d‑ser(otbu)‑leu‑arg‑pro‑nhet)、戈那瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑gly‑leu‑arg‑pro‑gly‑nh2)、戈舍瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑d‑ser(otbu)‑leu‑arg‑pro‑azgly‑nh2)、组氨瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑d‑his(n‑bn)‑leu‑arg‑pro‑nhet)、亮丙瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑d‑leu‑leu‑arg‑pro‑nhet)、那法瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑2nal‑leu‑arg‑pro‑gly‑nh2)、曲普瑞林(pyr‑his‑trp‑ser‑tyr‑d‑trp‑leu‑arg‑pro‑gly‑nh2)、纳法瑞林、地洛林、阿贝瑞林(ac‑d‑2nal‑d‑4‑chlorophe‑d‑3‑(3‑pyridyl)ala‑ser‑(n‑me)tyr‑d‑asn‑leu‑isopropyllys‑pro‑dala‑nh2)、西曲瑞克(ac‑d‑2nal‑d‑4‑chloro‑phe‑d‑3‑(3‑pyridyl)ala‑ser‑tyr‑d‑cit‑leu‑arg‑pro‑d‑ala‑nh2)、地加瑞克(ac‑d‑2nal‑d‑4‑chlorophe‑d‑3‑(3‑pyridyl)ala‑ser‑4‑aminophe(l‑hydroorotyl)‑d‑4‑aminophe(carba‑moyl)‑leu‑isopropyllys‑pro‑d‑ala‑nh2)和甘乃利(ac‑d‑2nal‑d‑4‑chlorophe‑d‑3‑(3‑pyridyl)ala‑ser‑tyr‑d‑(n9，n10‑diethyl)‑homoarg‑leu‑(n9，n10‑diethyl)‑homoarg‑pro‑d‑ala‑nh2)(thundimadathil，j.，j.amino acids，2012，967347；boccon‑gibod，l.；等，2011，therapeutic advances in urology 3(3)：127–140；debruyne，f.，2006，future oncology，2(6)，677–696；schally a.v；nagy，a.1999eur j endocrinol 141:1–14；koppan m，等1999prostate 38:151–158)；模式识别受体(prrs)，如toll样受体(tlrs)、c型凝集素和结节状的受体(nlrs)(fukata，m.等，2009，semin.immunol.21，242–253；maisonneuve，c.等，2014，proc.natl.acad.sci.usa 111，1–6；botos，i.等，2011，structure 19，447–459；means，t k等，2000，life sci.68，241–258)，其分子量范围从小分子(咪喹莫特、鸟嘌和腺苷同系物)到大型和复杂的生物大分子，如脂多糖(lps)、核酸(cpg dna，polyi:c)和脂肽(pam3csk4)(kasturi，s p等，2011，nature 470，543–547；lane，t.，2001，jr soc.med.94，316；hotz，c.，和bourquin，c.，2012，oncoimmunology 1，227‑228；dudek，a z等，2007，clin.cancer res.13，7119–25)；降钙素受体，它是一种32‑氨基酸神经肽，主要通过其对破骨细胞和肾脏的作用参与钙水平的颐养(zaidi m，等，1990crit rev clin lab sci 28，109–174；gorn，a h，等1995j clin invest95:2680–91)；整合素受体偏激受体子类(如αvβ1，αvβ3，αvβ5，αvβ6，α6β4，α7β1，αlβ2，αiibβ3等)，不时在血管生成中起强大作用，在多种细胞，出奇是破骨细胞、内皮细胞和肿瘤细胞的名义抒发(ruoslahti，e.等，1994cell 77，477‑8；albelda，sm等，1990cancer res.，50，6757‑64)。短肽，grgdspk和环状rgd五肽，如环(rgdfv)(l1)偏激繁衍物(环(‑n(me)r‑gdfv)、环(r‑sar‑dfv)、环‑(rg‑n(me)d‑fv)、环(rgd‑n(me)fv)、环(rgdf‑n(me)v‑)(西仑吉肽))具有对整合素受体高亲和力(dechantsreiter，ma等，1999j.med.chem.42，3033‑40，goodman，sl，等，2002j.med.chem.45，1045‑51)。[0275]细胞结合分子或配体或细胞受体激昂剂不错是基于ig和非基于ig的卵白质支架分子。基于ig的支架不错选自但不限于，纳米抗体(vhh的繁衍物(骆驼科动物ig))(muyldermans s.，2013annu rev biochem.82，775–97)；结构域抗体(dab，vh或vl结构域的繁衍物)(holt，l.j，等，2003，trends biotechnol.21，484–90)；双特异性t细胞参议(bite、双特异性双抗体)(baeuerle，p.a等，2009，curr.opin.mol.ther.11，22–30)；双重亲和力复位向剂(dart，双特异性双抗体)(moore pa p等.2011，blood 117(17)，4542–51)；四价串联抗体(t和ab，、二聚双特异性双抗体)(cochlovius，b等.2000，cancer res.60(16):4336–4341)。非ig支架不错选自但不限于，anticalin(lipocalins的繁衍物)(skerra a.2008，febs j.，275(11)：2677–83；beste g等，1999proc.nat.acad.usa.96(5):1898–903；skerra，a.2000biochim biophys acta，1482(1‑2)：337–50；skerra，a.2007，curr opin biotechnol.18(4)：295–304；skerra，a.2008，febs j.275(11):2677–83)；adnectin(第10个fn3(纤连卵白))(koide，a等，1998j.mol.biol.，284(4):1141–51；batori v，2002，protein eng.15(12)：1015–20；tolcher，a.w，2011，clin.cancer res.17(2)：363–71；hackel，b.j，2010，protein eng.des.sel.23(4)：211–19)；瞎想的锚卵白重复卵白(darpins)(锚卵白重复(ar)卵白的繁衍物)(boersma，y l等，2011curr opin biotechnol.22(6)：849–57)，举例darpin c9、darpin ec4及darpine69_lz3_e01(winkler j等，2009mol cancer ther.8(9)，2674–83；patricia mk.m.等，clin cancer res.2011；17(1):100–10；boersma y.l等，2011j.biol.chem.286(48)，41273–85)；高亲和性多聚体(域a/低密度脂卵白(ldl)受体)(boersma y.l，2011j.biol.chem.286(48)：41273–41285；silverman j等，2005nat.biotechnol.，23(12):1556–61)。[0276]本专利央求的小分子细胞结合分子/配体或细胞受体激昂剂的结构示举例下：lb01(叶酸)、lb02(pmsa配体)、lb03(pmsa配体)、lb04(pmsa配体)、lb05(滋长扼制素)、lb06(滋长扼制素)、lb07(奥曲肽、滋长扼制素同系物)、lb08(兰瑞肽、滋长扼制素同系物)、lb09(伐普肽(sanvar)、滋长扼制素同系物)、lb10(caix配体)、lb11(caix配体)、lb12(胃泌素开释肽受体(grpr)、mba)、lb13(促黄体激素开释激素(lh‑rh)和gnrh配体)、lb14(促黄体激素开释激素(lh‑rh)和gnrh配体)、lb15(gnrh拮抗剂、abarelix)、lb16(钴胺素、维生素b12同系物)、lb17(钴胺素、维生素b12同系物)、lb18(用于αvβ3整联卵白受体、环状rgd五肽)、lb19(vegf受体的异二价肽配体)、lb20(神经髓质素b)、lb21(蛙皮素，作用于g卵白偶联受体)、lb22(tlr2，作用于类toll受体)、lb23(作用于雄性激素受体)、lb24(西仑吉肽或环(‑rgdfv‑)结合物，作用于αv整合素受体)lb25(利福布汀同系物)、lb26(利福布汀同系物)、lb27(利福布汀同系物)、lb28(氟氢可的松)、lb29(地塞米松)、lb30(丙酸氟替卡松)、lb31(丙酸倍氯米松)、lb32(醋酸曲安奈德)、lb33(泼尼松龙)、lb35(甲基强的松龙)、lb36(倍他米松)、lb37(伊立替康同系物)、lb38(克唑替尼同系物)、lb39(硼替佐米同系物)、lb40(卡菲佐米同系物)、lb41(卡非佐米同系物)、lb42(亮丙瑞林同系物)、lb43(曲普瑞林同系物)、lb44(克林霉素)、lb45(利拉鲁肽同系物)、lb46(半长春新碱同系物)、lb47(瑞他帕林同系物)、lb48(丁布尔同系物)、lb49(长春碱同系物)、lb50(利西森肽同系物)、lb51(奥西丁尼同系物)、lb52(核苷同系物)、lb53(厄洛替尼同系物)和lb5 4(拉帕替尼同系物)，其结构如下所示：[0277]lb01(叶酸偶联物)，[0278]lb02(pmsa配体偶联物)，[0279]lb03(pmsa配体偶联物)，[0280]lb04(pmsa配体)，[0281]lb05(滋长激素扼制素)，[0282]lb06(滋长激素扼制素)，[0283]lb07(奥曲肽、滋长扼制素同系物)，[0284]lb08(兰肽、滋长扼制素同系物)，lb09(氨肽(sanvar)、滋长扼制素同系物)，[0285]lb10(caix配体)，[0286]lb11(caix配体)，lb12(胃泌素开释肽受体(grpr)，mba)，[0287][0288]lb13(促黄体激素开释激素(lh‑rh)和促性腺激素开释激素gnrh配体)，[0289][0290]lb14(促黄体激素开释激素(lh‑rh)和促性腺激素开释激素gnrh配体)，[0291][0292]lb15(gnrh拮抗物、阿巴瑞克)，[0293]lb16(钴胺素，维生素b12同系物)，[0294]lb17(钴胺素，维生素b12同系物)，[0295][0296]lb18(环rgd五肽，作用于αvβ3整联卵白受体)，[0297][0298]lb19(异源二价肽配体偶联物，作用于血管内皮滋长因子vegf受体)，[0299]lb20(神经髓质素b)，[0300][0301]lb21(蛙皮素偶联物，作用于g卵白偶联受体)，[0302]lb22(tlr2偶联物，作用于类toll受体)，[0303]lb23(雄激素受体)，[0304]lb24(西伦吉肽/环(‑rgdfv‑)偶联物，作用于αv整合素受体)[0305]lb25(利福布汀同系物)，[0306]lb26(利福布汀同系物)，lb27(利福布汀同系物)，[0307]lb28(氟氢可的松)，[0308]lb29(地塞米松)，[0309]lb30(丙酸氟替卡松)，[0310]lb31(倍氯米松丙酸酯)，[0311]lb32(曲安奈德)，[0312]lb33(泼尼松)，[0313]lb34(泼尼松龙)，[0314]lb35(甲基强的松龙)，[0315]lb36(倍氟好意思松)，[0316]lb37(伊立替康同系物)，[0317]lb38(克唑替尼同系物)，[0318]lb39(硼替佐米同系物)，其中y5是n、ch、c(cl)、c(ch3)或c(coor1)；r1是h、c1‑c6烷基、c3‑c8芳基；[0319]lb40(卡菲佐米同系物)，[0320]lb41(卡菲佐米同系物)，[0321]lb42(亮丙瑞利同系物)，[0322]lb43(曲普瑞林同系物)，[0323]lb44(克林霉素)，[0324]lb45(利拉鲁肽同系物)，[0325]lb46(索马鲁肽同系物)，[0326]lb47(瑞他帕林同系物)，[0327]lb48(丁布尔同系物)，[0328]lb49(长春碱同系物)，[0329]lb50(利西森肽同系物)，[0330]lb51(奥西丁尼同系物)，[0331]lb52(核苷同系物)，[0332]lb53(埃罗替尼同系物)，[0333]lb54(拉帕替尼同系物)，[0334]其中是支链衔接子的衔接位置；x4和y1独速便是o、nh、nhnh、nr1、s、c(o)o、c(o)nh、oc(o)nh、oc(o)o、nhc(o)nh、nhc(o)s、oc(o)n(r1)、n(r1)c(o)n(r1)、ch2、c(o)nhnhc(o)和c(o)nr1；x1是h、ch2、oh、o、c(o)、c(o)nh、c(o)n(r1)、r1、nhr1、nr1、c(o)r1或c(o)o；x5是h、ch3、f、或cl；m1和m2稳固的是h、na、k、ca、mg、nh4、n(r12r12’r13 r13’)；r12、r12’、r13和r13’界说同式(i)。[0335]偶联物的诓骗[0336]在一个具体扩充例中，通过本专利的支链衔接子衔接的细胞结合剂‑药物偶联物，可用作癌症靶向颐养。狡计癌症包括但不限于，肾上腺皮质癌、肛门癌、膀胱癌、大脑肿瘤(脑干神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、室管膜瘤、成神管理细胞瘤、幕上原始神经外胚层和松果体肿瘤、视觉通路和下丘脑胶质瘤)、乳腺癌、类癌肿瘤、胃肠说念癌症、未知小细胞癌、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、食说念癌、肝外胆管癌、尤因眷属肿瘤(pnet)、颅内生殖细胞肿瘤、眼癌、眼内玄色素瘤、胆囊癌、胃癌(胃癌)、性腺外生殖细胞瘤、孕周滋补细胞瘤、头颈癌、下咽癌、胰岛细胞癌、肾癌(肾细胞癌)、喉癌、白血病(急性淋巴细胞，急性髓系，慢性淋巴细胞，慢性粒细胞，毛细胞)、嘴唇和口腔癌症、肝癌、肺癌(非小细胞，小细胞)、淋巴瘤(艾滋病干系，核心神经系统，皮肤t细胞，霍奇金病，非霍奇金病)、恶性间皮瘤、玄色素瘤、梅克尔细胞癌、出动性鳞状颈癌与隐退性原发性癌、多发性骨髓瘤和其他浆细胞肿瘤、蕈样肉芽肿、骨髓增生非常详尽征、骨髓增生非常、鼻咽癌、神经母细胞瘤、口腔癌、口咽癌、骨赘瘤、卵巢癌(上皮、生殖细胞瘤、低恶性肿瘤)、胰腺癌(外分泌，胰岛细胞癌)、副鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、嗜铬细胞瘤、垂体肿瘤、浆细胞肿瘤、前方腺癌横纹肌赘瘤、直肠癌、肾细胞癌(肾癌)、肾盂和输尿管(移行细胞)、唾腺癌、赛塞里详尽症、皮肤癌(皮肤t细胞淋巴瘤，卡波西氏赘瘤，玄色素瘤)、小肠肿瘤、软组织赘瘤、胃癌、睾丸癌、胸腺瘤(恶性)、甲状腺癌、尿说念癌症、子宫癌、不寻常的少年癌症、阴说念肿瘤、外阴肿瘤和维尔姆斯瘤。[0337]在另一个具体的扩充例中，通过本专利的支链衔接子衔接的细胞结合剂‑药物偶联物，可用作颐养或防护自身免疫疾病的身分和轨范。自身免疫性疾病包括但不限于，achlorhydra自身免疫性行径性慢性肝炎、急性播散性脑脊髓炎、急性出血性脑白质炎、艾迪生病、无精症、斑秃、肌萎缩侧索硬化症、强直性脊柱炎、抗gbm/tbm肾炎、抗磷脂详尽征、抗非常酶详尽征、环节炎、特应性过敏、特应性皮炎、自身免疫性再生清苦性贫血、自身免疫性心肌病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳疾病、自身免疫性淋巴组织增生详尽征、自身免疫性周围精神病、自身免疫性胰腺炎、自身免疫性多内分泌详尽征i、ii和iii型、自身免疫性黄体酮皮炎、自身免疫性血小板减少性紫癜、自身免疫性葡萄膜炎、balo病/balo齐心硬化症、bechets详尽征、berger氏病、bickerstaff脑炎、blau详尽征、大疱性类天疱疮、castleman病、chagas病、慢性疲困免疫功能清苦详尽征、慢性炎性脱髓鞘性多发性精神病、慢性复发性多灶性骨髓炎、慢性莱姆病、慢性阻拦性肺病、churg‑strauss详尽征、瘢痕性类天疱疮、乳糜泄、cogan详尽征、冷凝集素病、补体身分2空泛症、颅骨动脉炎、crest详尽征、crohns病(特发性炎症性肠病)、库欣详尽征、皮肤白细胞增多性血管炎、德戈氏病、dercum氏病、疱疹样皮炎、皮肌炎、1型糖尿病、弥漫性皮肤系统性硬化症、dressler详尽征、盘状红斑狼疮、湿疹、子宫内膜异位症、附着点炎干系的环节炎、eosinophilic筋膜炎、大疱性表皮松解症、结节性红斑、特发性混杂性冷球卵白血症、伊文氏详尽征、纤维发育不良性骨化症、纤维肌痛、纤维化性肌炎、纤维性肺泡炎、胃炎、胃肠类天疱疮、巨细胞动脉炎、肾小球肾炎、古德帕斯丘尔详尽征、格雷夫斯病、格林‑巴利详尽征、桥本氏脑炎、桥本氏甲状腺炎、溶血性贫血、过敏性紫癜、妊娠性肝炎、化脓性汗腺炎、休斯详尽征(抗磷脂详尽征)、低丙球卵白血症、特发性炎性脱髓鞘疾病、特发性肺纤维化、特发性血小板减少性紫癜(自身免疫性血小板减少性紫癜)、iga肾病(伯杰氏病)、宥恕体肌炎、炎性脱髓鞘性多神经炎、间质性膀胱炎、过敏性肠详尽征、少年特发性环节炎、青少年类风湿性环节炎、川崎氏病、朗伯‑伊顿重症肌无力详尽征、白细胞碎片性血管炎、扁平苔癣、硬化性硬化症、线状iga疾病(lad)、lou gehrig病(也称肌萎缩侧索硬化症)、狼疮性肝炎、红斑狼疮、majeed详尽征、好意思尼尔氏病、显微镜下多动脉炎、米勒‑费希尔详尽征、混杂性结缔组织病、硬斑病、穆罕默德‑哈贝曼病、麦考利详尽征、多发性骨髓瘤、多发性硬化症、重症肌无力、肌炎、嗜睡症、视神经脊髓炎(devic病)、神经性肌强直、眼睑瘢痕性类天疱疮、opsoclonus myoclonus详尽征、ord甲状腺炎、回环风湿病、pandas(与链球菌干系的赤子自身免疫性神经精神病)、paraneoplastic小脑变性、阵发性就寝性血红卵白尿症、parry romberg详尽征、parsonnage‑turner详尽征、睫状体平部炎、天疱疮、寻常型天疱疮、贫血、周围脑脊髓炎、poems详尽征、结节性多动脉炎、风湿性多肌痛、多发性肌炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、进行性炎症性精神病变、牛皮癣、牛皮癣性环节炎、坏疽性皮肤炎、纯红细胞再生清苦、rasmussen脑炎、雷诺表象、复发性多软骨炎、赖特详尽征、不宁腿详尽症、后神经纤维化、类风湿性环节炎、类风干冷、结节病、精神分裂症、施密特详尽征、schnitzler详尽征、施尼茨勒详尽征、巩膜炎、硬皮病、干燥详尽征、脊椎环节病、宽广血症、still病、僵东说念主详尽征、亚急性细菌性心内膜炎、苏萨克详尽征、sweet详尽征、小跳舞病、交感神经性贫血、takayasu动脉炎、颞动脉炎(巨细胞动脉炎)、tolosa‑hunt详尽征、横贯性脊髓炎、溃疡性结肠炎(特发性炎性肠病)、未分化结缔组织病、未分化脊柱环节病、血管炎、白癜风、韦格纳肉芽肿病、威尔逊氏详尽征、威斯科特‑奥尔德里奇详尽征。[0338]在另一个具体的扩充例中，在用于颐养或防护自身免疫性疾病的偶联物上，和药物分子通过本专利的支链衔接子衔接的结合分子，包括但不限于，抗弹性卵白抗体、abys抗上皮细胞抗体、抗地下室膜iv型胶原卵白抗体、抗核抗体、抗ds dna、抗ss dna、抗心磷脂抗体igm、igg、抗乳糜泻抗体、抗磷脂抗体igk、igg、抗sm抗体、抗线粒体抗体、甲状腺抗体、微粒体抗体、t细胞抗体、甲状腺球卵白抗体、抗scl‑70、抗jo、抗u.sub.1rnp、抗la/ssb、抗ssa、抗ssb、抗壁细胞抗体、抗组卵白、抗rnp、c‑anca、p‑anca、抗着丝粒、抗纤维卵白原、抗gbm抗体、抗神经节苷脂抗体、抗desmogein 3抗体、抗p62抗体、抗sp100抗体、抗线粒体(m2)抗体、类风湿因子抗体、抗mcv抗体、抗拓扑异构酶抗体、抗中性粒细胞胞质(canca)抗体。[0339]在某些优选的扩充例中，本专利中偶联物上的结合分子，不错与自身免疫性疾病干系的活化淋巴细胞上抒发的受体或受体复合物相结合。受体或受体复合物包含，免疫球卵白基因超眷属成员(举例cd2、cd3、cd4、cd8、cd19、cd20、cd22、cd28、cd30、cd33、cd37、cd38、cd56、cd70、cd79、cd79b、cd90、cd125、cd147、cd152/ctla‑4、pd‑1或icos)、tnf受体超眷属成员(举例cd27、cd40、cd95/fas、cd134/ox40、cd137/4‑1bb、inf‑r1、tnfr‑2、rank、taci、bcma、骨保护素、apo2/trail‑r1、trail‑r2、trail‑r3、trail‑r4和apo‑3)、整合卵白、细胞因子受体、趋化因子受体、主要组织兼容性卵白、凝集素(c型、s型或i型)或补体限度卵白。[0340]在另一个具体扩充例中，可用的对病毒或微生物抗原具有免疫特异性的细胞结合配体是东说念主源化或东说念主单克隆抗体。“病毒抗原”包括但不限于，任何大要激发免疫搪塞的病毒肽，多肽卵白(举例hiv gp120，hiv nef，rsv f糖卵白，流感病毒神经氨酸苷酶，流感病毒血凝素，htlv tax，疱疹单纯疱疹病毒糖卵白(举例gb，gc，gd和ge)和乙型肝炎名义抗原)。“微生物抗原”包括但不限于，任何大要激发免疫搪塞的微生物肽，多肽，卵白质，糖，多糖或脂质分子(举例细菌，真菌，致病原纯真物或酵母多肽，包括如lps和荚膜多糖)。可用于颐养病毒或微生物感染的抗体的实例，包括但不限于：帕利珠单抗，它是用于颐养rsv感染的，东说念主源化抗呼吸说念合胞病毒单克隆抗体；pro542，是一种cd4和会抗体，用于颐养hiv感染；奥斯他韦，是一种用于颐养乙型肝炎病毒的东说念主抗体；protvir，是一种东说念主源化igg1抗体，用于颐养巨细胞病毒，和抗lps抗体。[0341]通过本专利的支链衔接子制得的细胞结合分子‑药物偶联物可用于颐养感染性疾病。这些感染性疾病包括但不限于，不动杆菌属感染、放线菌病、非洲昏睡病(非洲锥虫病)、艾滋病(获取性免疫弱势详尽症)、阿米巴病、无形骸病、炭疽、溶血性耶尔森菌感染、阿根廷出血热、蛔虫病、曲霉病、星状病毒感染、巴贝斯虫病、蜡状芽孢杆菌感染、细菌性肺炎、细菌性阴说念炎、类杆菌感染、小袋虫病、蛔虫感染、bk病毒感染、玄色发结节病、东说念主芽囊原虫感染、芽生菌病、玻利维亚出血热、疏螺旋体感染、肉毒中毒(和婴儿肉毒中毒)、巴西出血热、布鲁氏杆菌病、伯克霍尔德氏菌感染、布鲁里溃疡、杯状病毒感染(诺如病毒和沙波病毒)、迤逦杆菌病、念珠菌病(念珠菌病、鹅口疮)、猫执病、蜂窝组织炎、chagas病(好意思洲锥虫病)、子囊、水痘、衣原体、肺炎衣原体感染、霍乱、色素母细胞瘤、华支睾吸虫、粗重梭状芽孢杆菌感染、球孢子菌病、科罗拉多蜱热病、平常感冒(急性病毒性鼻咽炎、急性鼻炎)、克雅氏病、克里米亚‑刚果出血热、隐球菌病、隐孢子虫病、皮肤幼虫挪动、环孢子虫病、肠杆菌感染、肠说念病毒感染、流行性斑疹伤寒、传染性红斑(第五种疾病)、急疹、姜片虫病、肝片吸虫病、致命性眷属性失眠、丝虫病、产气荚膜梭菌食品中毒、目田活体阿米巴感染、梭杆菌感染、气性坏疽(梭菌性肌坏死)、地丝菌病、格斯特曼‑斯特拉斯勒‑谢克尔病详尽征、贾第鞭毛虫病、马鼻疽、淋病、肉芽肿性泻肚(第五性病)、a群链球菌感染、b群链球菌感染、流感嗜血杆菌感染、昆玉口病(hfmd)、汉坦病毒肺详尽征、幽门螺杆菌感染、溶血性尿毒详尽征、肾详尽征出血热、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、单纯性疱疹、组织胞浆菌病、钩虫感染、东说念主类博卡病毒感染、东说念主类ewingii埃里希体病、东说念主类粒细胞无形骸病、东说念主类偏肺病毒感染、东说念主类单核细胞埃里希体病、东说念主乳头瘤病毒感染、东说念主副流感病毒感染、膜壳绦虫病、艾巴氏病毒传染性单核细胞增多症(单)、流行性感冒、等孢子虫病、川崎病、角膜炎、金格杆菌感染、库鲁病、拉沙热、军团病(退伍军东说念主症)、军团病(庞蒂亚克热)、利什曼病、莱姆病、淋巴丝虫病(象皮病)、淋巴细胞性端倪丛脑膜炎、疟疾、马尔堡出血热、麻疹、类鼻疽病(惠氏病)、脑膜炎、脑膜炎球菌病、后殖吸虫病、微孢子虫病、传染性软疣、腮腺炎、小鼠斑疹伤寒(所在性斑疹伤寒)、支原体肺炎、足菌肿、蝇蛆病、新生儿结膜炎(新生儿眼病)、变异型克雅氏病(vcjd、nvcjd)、诺卡氏菌病、盘尾丝虫病(河盲症)、副球孢子菌病(南好意思芽生菌病)、肺吸虫病、巴斯德氏菌病、头虱、体虱、阴虱、盆腔炎、百日咳、鼠疫、肺炎球菌感染、肺孢子虫肺炎、肺炎、脊髓灰质炎、普氏菌感染、原发性阿米巴脑膜脑炎、进行性多灶性白质脑病、鹦鹉热、q热、狂犬病、鼠咬热、呼吸说念合胞病毒感染、鼻孢子虫病、鼻病毒感染、立克次体感染、立克次体痘、裂谷热、落基山斑疹热、轮状病毒感染、风疹、梵衲氏菌病、sars(严重急性呼吸详尽征)、疥疮、血吸虫病、败血症、志贺氏菌病(bacillary痢疾)、带状疱疹(带状疱疹)、天花(天花)、孢子丝菌、葡萄球菌食品中毒、感染金黄色葡萄球菌、粪类圆线虫病、梅毒、绦虫病、破感冒、须癣(barber痒)、头皮癣、体癣、股癣、手癣、掌黑癣、足癣(香港脚)、甲癣(灰指甲)、花斑癣、弓蛔虫病(眼幼虫移行症)、弓蛔虫病(内脏幼虫移行症)、弓形骸病、旋毛虫病、滴虫病、鞭虫病(鞭虫感染)、肺结核、兔热病、解脲脲原体感染、委内瑞拉马脑炎、委内瑞拉出血热、病毒性肺炎、西尼罗河热、白毛结节病(白癣)、假结核耶尔森氏菌、耶尔森氏鼠疫杆菌肠说念病、黄热病、接合菌病。[0342]本发明的偶联物优选的能叛逆的病原菌株包括但不限于，鲍氏不动杆菌、以色列放线菌、放线菌和丙酸杆菌、布氏锥虫、hiv(东说念主免疫弱势病毒病毒)、溶组织内阿米巴、无形骸属、炭疽芽孢杆菌、溶血弧菌、胡宁病毒、蛔虫属、曲霉属、星状病毒科、巴贝虫属、蜡状芽孢杆菌、多种细菌、拟杆菌属、大肠杆菌、蛔虫属、bk病毒、结节菌、东说念主芽囊原虫、皮炎芽生菌、马丘波病毒、疏螺旋体属、肉毒梭菌、清风藤属、布鲁氏菌属、不时为洋葱伯克霍尔德菌和其他伯克霍尔德氏菌种、溃疡分枝杆菌、杯状病毒科、迤逦杆菌属、不时为白色假丝酵母和其他假丝酵母属、汉赛巴尔通体、a群链球菌和葡萄球菌、克氏锥虫、杜克雷嗜血杆菌、vzv、沙眼衣原体、科罗拉多蜱热病毒、鼻病毒、冠状病毒、cjd朊病毒、克里米亚‑刚果出血热病毒、新式隐球菌、隐孢子虫属、巴西钩虫、多种寄生虫、环孢子虫、带状绦虫、巨细胞病毒、登革热病毒(den‑1、den‑2、den‑3和den‑4)‑黄病毒、脆弱双歧杆菌、白喉棒状杆菌、裂头绦虫、麦地那龙线虫、埃博拉病毒、棘球绦虫属、埃立克体肠球菌属、肠说念病毒属、普氏立克次体、细微恙毒b19、东说念主疱疹病毒6和东说念主疱疹病毒7、布氏姜片虫、肝片吸虫和巨大片吸虫、ffi朊病毒、丝虫目超眷属、产气荚膜梭菌、梭杆菌属、其他梭状芽孢杆菌、白地霉、gss朊病毒、肠说念贾第虫、伯克霍尔德氏菌、刺孢小芽孢杆菌和革兰氏假丝酵母、淋球菌、肉芽肿克雷伯氏菌、化脓性链球菌、无乳链球菌、流感嗜血杆菌、肠说念病毒、主如果柯萨奇a病毒和肠说念病毒71、无名病毒、幽门螺旋杆菌、大肠杆菌o157：h7、布尼亚病毒科、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、单纯疱疹病毒1、单纯疱疹病毒2、荚膜组织胞浆菌、十二指肠腺瘤和壶腹癌流感嗜血杆菌、东说念主博卡病毒、埃里希体、嗜并吞细胞无嗜血杆菌、东说念主偏肺病毒、查菲埃里希体、东说念主乳头瘤病毒、东说念主副流感病毒、轻细膜壳绦虫和缩小膜壳绦虫、艾巴氏病毒、正粘病毒科眷属、贝氏等孢球虫、金格杆菌、肺炎克雷伯菌、克雷伯氏菌、嗜肺军团菌、嗜肺军团菌、嗜肺军团菌、利什曼原虫属、麻风分枝杆菌和结核分枝杆菌、钩端螺旋体属、单核细胞增多性李斯特氏菌、伯氏疏螺旋体和其他疏螺旋体属物种、班氏旋毛虫和马来丝虫、淋巴细胞端倪丛脑膜炎病毒(lcmv)疟原虫属、马尔堡病毒、麻疹病毒、类鼻疽伯克霍尔德氏菌、脑膜炎奈瑟氏球菌、横川后殖吸虫、小孢子虫目门、传染性软疣病毒(mcv)、腮腺炎病毒、伤寒立克次氏体、肺炎支原体、多种细菌和真菌寄生双翅蝇幼虫、沙眼衣原体和淋病奈瑟菌、vcjd朊病毒、诺卡氏菌和其他诺卡氏菌属、盘尾丝虫属、盘鲍拟亚科、副龙属西马尼和其他副属、巴斯德氏菌属、头虱、东说念主体虱、百日咳博德特氏菌鼠疫耶尔森氏菌、肺炎链球菌、肺炎球菌、脊髓灰质炎病毒、普雷沃氏菌属、奈氏格氏杆菌、jc病毒、鹦鹉热衣原体、伯氏考克斯体、狂犬病病毒、单链球菌和螺旋菌、呼吸说念合胞病毒、鼻孢子菌、鼻病毒、立克次体属、由小株立克次体、裂谷热病毒、立克次体立克次体、轮状病毒、风疹、梵衲氏菌属、sars冠状病毒、东说念主疥螨、血吸虫属、体细胞属、志贺菌属、水痘带状疱疹病毒、天花少校或天花小、申克孢子丝菌、金黄色葡萄球菌属、金黄色葡萄球菌、链球菌化脓、圆线虫、梅毒螺旋体、绦虫属、破感冒、癣属癣音铀、癣属、絮状表皮癣菌、红色毛癣菌、须毛癣菌、红色毛癣菌、威尼克外瓶霉、毛癣菌属属、细胞牺牲属、弓箭毒或弓箭毒、刚地弓形虫、旋毛虫、阴说念毛滴虫、三丘里三种、结核分枝杆菌、弗朗西拉图拉菌、尿素和马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、霍乱弧菌、瓜纳里称疾毒、西尼罗河病毒、beigelii丝孢、假结核耶尔森氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、黄热病病毒、毛霉菌目阶(毛霉菌病)和虫霉目阶(虫霉属真菌病)、毛霉菌目绿脓杆菌、迤逦杆菌(弧菌)、气单胞菌、艾氏菌、耶尔森氏菌、志贺痢疾杆菌、志贺氏杆菌、志贺氏菌、梵衲氏菌、伤寒梵衲氏菌、雅司螺旋体、奋森氏螺旋体、伯氏疏螺旋体、细螺旋体、卡氏肺孢子虫、流产布鲁氏菌、布鲁杆菌、布鲁氏菌、支原体属、普氏立克次体、恙虫病立克次氏体、衣原体属、致病性真菌(烟曲霉、白色念珠菌、荚膜组织胞浆菌)、原纯真物(溶组织内阿米巴、tenas毛滴虫、hominis毛滴虫、冈比亚锥虫、罗得西亚锥虫、罗氏利什曼原虫、热带利什曼原虫、巴西利什曼原虫、肺孢子虫肺炎、间日疟原虫、恶性疟原虫、疟原虫疟疾)或helminiths(日本血吸虫、曼氏血吸虫、埃及血吸虫和钩虫)。[0343]其他用作颐养病毒性疾病的偶联物、包括但不限于，抗下列致病性病毒抗原的抗体：痘病毒、疱疹病毒、腺病毒、小黄病毒、肠病毒、小核糖核酸病毒、细微恙毒、呼肠病毒、逆转录病毒、流感病毒、副流感病毒、腮腺炎、麻疹、呼吸说念合胞病毒、风疹、虫媒病毒、弹状病毒、梵衲氏菌、非a/非b型肝炎病毒、鼻病毒、冠状病毒、罗称疾毒、致癌病毒，如hbv(肝细胞癌)、东说念主乳头状瘤病毒(宫颈癌、肛门癌)、卡波济氏赘瘤干系的疱疹病毒(卡波济氏赘瘤赘瘤)、东说念主类疱疹病毒第四型(鼻咽癌、伯基特淋巴瘤、原发性核心神经系统淋巴瘤)、瘤病毒(默克尔细胞癌)、sv40(猿猴病毒40)、hcv(肝细胞癌)、htlv‑1(成东说念主t细胞白血病/淋巴瘤)、免疫芜杂导致病毒，如东说念主类免疫弱势病毒(艾滋病)、核心神经系统病毒，如jcv(进行性多灶性脑白质病)、丙型肝炎病毒(亚急性硬化性全脑炎)、lcv(淋巴细胞性端倪丛脑膜炎)、亚博病毒脑炎、正粘病毒(脑炎性脑炎)、rv(狂犬病)、长鼻病毒、疱疹病毒脑膜炎、拉姆王人亨特详尽征ii型、脊髓灰质炎病毒(脊髓灰质炎病毒、后脊髓灰质炎详尽征)、htlv‑1(热带麻木性麻木))、巨细胞病毒(巨细胞病毒视网膜炎、hsv(疱疹性角膜炎)、心血管病毒、如cbv(心包炎、心肌炎)、呼吸系统/急性病毒性鼻内炎/病毒性肺炎、如爱泼斯坦‑巴尔病毒(ebv感染/传染性单核病)、巨细胞病毒、非典冠状病毒(严重急性呼吸详尽征)或正黏液病毒、流感病毒a/b/c(流感/禽流感)、副粘病毒、东说念主类副流感病毒、rsv(东说念主类呼吸说念合胞病毒)、hmpv、消化系统病毒(腮腺炎病毒、巨细胞病毒(巨细胞病毒食管炎)、腺病毒(腺病毒感染)、轮状病毒、诺瓦克病毒、星状病毒、冠状病毒、乙型肝炎病毒、cbv、甲型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、hgv)、泌尿生殖病毒，如bk病毒、muv(腮腺炎)。[0344]更进一步，本发明也包括本发明中偶联物和可给与的载体，稀释剂或辅料组成的组合物，以颐养癌症、感染或自身免疫性疾病。颐养癌症、感染和自身免疫性疾病的轨范不错在体外，体内或离体扩充。体外用途的实例包括用它处理细胞培养物，以杀死除了不抒发靶抗原的变体除外的通盘细胞；或者杀死抒发不需要的抗原的变体。离体使用的例子包括在进行移植(hsct)之前对造血干细胞(hsc)进行处理，以杀死患病或恶性肿瘤细胞。举例，在癌症颐养中的自体移植之前或在自身免疫性疾病的颐养中从骨髓中去除肿瘤细胞或淋巴细胞，或在移植之前为了防护移植物抗宿主疾病从同种异体骨髓或组织中颤抖t细胞和其他淋巴细胞。这么的临床离体颐养不错按如下本领进行：从患者或其他个体得益骨髓，然后在含有血清的培养基中约37℃下孵育约15分钟至约48小时，在该培养基中加入本发明的偶联物，浓度范围从约1pm至0.1mm。具体的药物浓度和孵育时分应当由专科临床大夫决定。孵育后，用含血清的培养基洗涤骨髓细胞，并按照已知的轨范通过静脉打针给患者。若患者在骨髓汇聚和再输注颐养细胞之间，还给与其它颐养(举例消溶化疗或全身辐射疗程)的情况下，应使用圭表医疗竖立将处理后的骨髓细胞在液氮中冷冻储存。[0345]用于协同作用的化学颐养药物或细胞毒性药物[0346]不错与本发明一王人协同作用的化学颐养药物是包括细胞毒性剂在内的小分子药物。本发明中的“小分子药物”泛指分子量为100至2500，更优200至2000的有机、无机或金属有机化合物。这些小分子药物在才能域文件中已被充分描绘，如wo05058367a2和好意思国专利4，956，303，以及chessum，n.，等，prog med chem.2015，54：1‑63；eder，j.，等，nat rev drug discov.2014，13(8)：577‑87；zhang，m.‑q.，等，curr opin biotechnol.2007，18(6)：478‑88；此处引作参考。小分子药物包括已知的药物和行将被公开的药物。[0347]已知的药物包括但不限于：[0348]1)化疗药物：a)烷基化剂、如氮芥：氯苯那普、氯普那嗪、环磷酰胺、达喀尔巴嗪、雌二醇氮芥、异环磷酰胺、氮芥、盐酸二甲氧胺、氧化二氮芥、盐酸氨氯地平、麦考酚酸、卫矛醇、呱泊溴烷、新氮芥、苯芥胆甾醇、松龙苯芥、噻替呱、曲磷胺对、尿嘧啶；cc‑1065(包括其阿多来新、卡折来新、比折来新偏激合成同系物)；多卡霉素(包括kw‑2189和cbi‑tmi、偏激合成同系物)；苯并二氮卓二聚体(举例吡咯苯并二氮卓(pbd)或托好意思霉素、吲哚苯并二氮卓、咪唑苯并噻二氮卓或恶唑烷苯并二氮卓的二聚体)；亚硝基脲(卡莫司汀、洛莫司汀、氯化梭菌素、福莫司汀、尼莫司汀、拉莫司汀)；烷基磺酸盐(白苏芬、树苏芬、磺胺异丙磺胺和皮苏芬)；三氮烯(达喀尔巴嗪)；含铂化合物(卡铂、顺铂、奥沙利铂)；吖丙啶类、如苯并二氢吡喃酮、卡洛酮、好意思妥替派和乌雷多巴；乙烯亚胺和甲基三聚氰胺、包括六甲蜜胺、三亚乙基三胺、三乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基甲基胺；b)植物生物碱：如长春花生物碱(长春新碱、长春碱、长春地辛、长春瑞滨、去甲长春碱)；紫杉醇类(紫杉醇、多西紫杉醇偏激同系物)；好意思登素类(dm1、dm2、dm3、dm4、好意思登素、安沙霉素偏激同系物)；cryptophycin(出奇是cryptophycin 1和cryptophycin 8)；埃博霉素、软珊瑚醇、迪莫利德、草苔虫内酯、海兔毒素、奥瑞他汀、cephalostatin；pancratistatin；sarcodictyin；海绵扼制素；c)dna拓扑异构酶扼制剂、举例依托泊苷替尼(9‑氨基喜树碱、喜树碱、克立那托、多拉霉素、依托泊苷、磷酸依托泊苷、伊立替康、米托蒽醌、诺消灵、视黄酸(视黄醇)、替尼泊苷、拓扑替康、9‑硝基喜树碱(rfs 2000))；丝裂霉素(丝裂霉素c)；d)抗代谢物、举例抗叶酸剂、dhfr扼制剂(甲氨蝶呤、曲麦克特、二甲叶酸、蝶罗呤、氨喋呤(4‑氨基苯甲酸)或其他叶酸同系物)；imp脱氢酶扼制剂(麦考酚酸、噻唑呋林、利巴韦林、eicar)；核糖核苷酸还原酶扼制剂(羟基脲、去铁胺)；嘧啶同系物、尿嘧啶同系物(安西他滨、阿扎胞苷、6‑氮尿嘧啶、卡培他滨(希罗达)、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、脱氧氟尿苷、依诺他滨、5‑氟尿嘧啶、氟尿苷、ratitrexed(tomudex)；胞嘧啶同系物(阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷、氟达拉滨)；嘌呤同系物(硫唑嘌呤、氟达拉滨、巯嘌呤、硫胺素、硫鸟嘌呤)；叶酸补充剂、如弗洛林酸；e)激素疗法剂、如受体拮抗剂、抗雌激素(甲地孕酮、雷洛昔芬、他莫昔芬)、lhrh抖擞剂(戈斯他林、醋酸亮丙瑞林)；抗雄激素药(比卡鲁胺、氟他胺、卡鲁司酮、丙酸倍他雄酮、表雄甾醇、戈舍瑞林、亮丙瑞林、好意思替利定、尼鲁米特、睾内酯、曲洛司坦偏激他雄激素扼制剂)；维甲类化合物、维生素d3同系物(cb1093、eb1089、kh1060、胆钙化醇、麦角钙化甾醇)；光能源疗法剂(维替泊芬、酞菁、光敏剂pc4、去甲氧基‑竹红菌素a)；细胞因子(干涉素‑α、干涉素‑γ、肿瘤坏死因子(tnf)、含tnf的东说念主卵白)；f)激酶扼制剂、如bibw 2992(抗‑egfr/erb2)、伊马替尼、吉非替尼、呱加他尼、索拉非尼、达沙替尼、舒尼替尼、厄洛替尼、尼洛替尼、拉帕替尼、阿西替尼、帕唑帕尼、凡德他尼、e7080(抗vegfr2)、mubritinib、普纳替尼(ap24534)、bafetinib(inno‑406)、bosutinib(ski‑606)、卡博替尼、维莫德吉、iniparib、鲁索利替尼、cyt387、阿西替尼、tivozanib、索拉非尼、贝伐单抗、西妥昔单抗、曲妥珠单抗、雷珠单抗、帕尼单抗、伊斯平斯；g)聚(adp‑核糖)团聚酶(parp)扼制剂、如奥拉帕里、尼拉帕里、依尼帕里、塔拉佐帕里、维利帕里、维利帕里、cep 9722(cephalon)、e7016(eisai)、bgb‑290(beigene)、3‑氨基苯甲酰酰胺；h)抗生素、如烯二炔类抗生素(加利车霉素、出奇是加利车霉素γ1、δ1、α1和β1(参考j.med.chem.1996，39(11)，2103‑2117；angew chem intl.ed.engl.1994，33:183‑186)，达因霉素，包括达因霉素a和脱氧米霉素、埃斯培拉霉素、卡塔尔霉素、c‑1027、maduropeptin、新卡嗪奥斯汀和干系色卵白烯二炔抗生素)、aclacinomysins、放线菌素、安曲霉素、重氮丝氨酸、博来霉素、卡诺霉素、卡拉霉素、洋红霉素、嗜癌素、色霉素、达金霉素、柔红霉素、去柔红霉素、6‑重氮‑5‑氧代‑l‑去甲亮氨酸、阿霉素、吗啉‑阿霉素、氰基吗啉‑阿霉素、2‑吡咯啉阿霉素和脱氧柔红霉素、表柔比星、阿柔比星、伊达比星、马可霉素、nitomycin、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、peplomycin、potfiromycin、嘌呤霉素、奎拉霉素、罗说念霉素、链黑霉素、链脲霉素、杀结核菌素、乌苯好意思司、净司他丁、佐柔比星；i)其他、如聚酮化合物(番荔素)、出奇是bullatacin和bullatacinone；吉西他滨、环氧酶素(如卡菲偌米布)、硼替佐米、沙利度胺、来那度胺、pomalidomide、tosedostat、zybrestat、plx4032、sta‑9090、stimuvax、allovectin‑7、xegeva、provenge、yervoy、异戊二烯化扼制剂(如洛伐他汀)、多巴胺能神经毒素(如星形孢菌素)、放线菌素(如放线菌素d、重生霉素)、博莱霉素(如博来霉素a2、博莱霉素b2、培洛霉素)、蒽环类抗生素(如柔红霉素)、鹅膏毒素、阿霉素(亚德里亚霉素)、伊达比星、表柔比星、吡柔比星、佐柔比星、米托蒽醌、mdr扼制剂(如维拉帕米)、ca2+atp酶扼制剂(如毒胡萝卜素)、组卵白去乙酰酶扼制剂(伏立诺他、罗米地辛、帕比司他、丙戊酸、mocetinostat(mgcd0103)、belinostat、pci‑24781、恩替诺特、sb939、resminostat、givinostat、ar‑42、cudc‑101、萝卜硫素、曲古抑菌素a)；塞来昔布、格列酮类、表没食子儿茶素没食子酸酯、双硫仑、salinosporamide a；抗肾上腺药物、如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦、醋葡醛内酯、醛磷酰胺、氨基乙酰丙酸、安吖啶、阿拉伯糖苷、bestrabucil、比生群、edatraxate、defofamine、好意思可辛、地吖醌、依氟鸟氨酸(dfmo)、elfomithine、依利醋铵、依托格鲁、硝酸镓、胞嘧啶、羟基脲、伊班膦酸盐、香菇多糖、氯尼达明、米托胍腙、米托蒽醌、莫呱达醇、二胺硝吖啶、喷司他丁、蛋氨氮芥、吡柔比星、鬼臼酸、2‑乙肼、甲基苄肼；呱嗪二酮丙烷；根霉素；西佐；螺环锗；细格孢氮杂酸；三亚胺醌；三氯三乙胺；单端孢霉烯(出奇是t‑2毒素、疣孢菌素a、杆孢菌素a和anguidine)、聚氨酯、sirna、反义药物和核酸宗旨酶。[0349]2)自身免疫疾病药物，包括但不限于，环孢菌素、环孢菌素a、氨基己酸、硫唑嘌呤、溴隐亭、苯丁酸氮芥、氯喹、环磷酰胺、皮质类固醇(举例安西奈德、倍他米松、布地奈德、氢化可的松、氟尼缩松、丙酸氟替卡松、氟可龙达那唑、地塞米松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松)、dhea、依那西普、羟基氯喹、英夫利昔单抗、好意思洛昔康、甲氨蝶呤、麦考酚酸酯、泼尼松、西罗莫司、他克莫司。[0350]3)抗感染性疾病药物，包括但不限于a)氨基糖苷类：阿米卡星、阿司米星、庆大霉素(奈替米星、西索米星、异帕米星)、潮霉素b、卡那霉素(阿米卡星、阿贝卡星、氨基脱氧卡那霉素、地贝卡星、妥布霉素)、新霉素(framycetin、巴龙霉素、核糖霉素)、奈替米星、壮不雅霉素、链霉素、妥布霉素、甲基姿苏霉素；b)酰胺醇类：迭氮氯霉素、氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素；c)安沙霉素：格尔德霉素、除莠霉素；d)碳青霉烯类：比阿培南、多利培南、厄他培南、亚胺培南/西司他丁、好意思罗培南、帕尼培南；e)头孢烯：碳头孢烯(洛拉卡比)、头孢乙腈、氯氨苄青霉素、头孢拉定、头孢羟氨、头孢洛宁、头孢噻啶、头孢噻吩或头孢金素、头孢氨苄、头孢来星、头孢孟多、头孢匹林、羟胺唑头孢菌素、氟唑头孢菌素、孢西酮、唑啉头孢菌素、头孢拉宗、头孢卡品、头孢达肟、头孢吡、头孢克肟、头孢西丁、头孢罗王人、头孢甲氧环烯胺、头孢替唑、头孢呋辛、头孢克肟、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡、头孢他好意思、头孢甲肟、头孢地嗪、头孢尼西、头孢呱酮、头孢雷特、头孢噻肟、噻乙胺唑头孢菌素、头孢唑兰、头孢氨苄、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢泊肟、头孢罗王人、头孢喹诺、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢布腾、头孢噻林、头孢唑肟、头孢吡普、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑南、头霉素(头孢西丁、头孢替坦、头孢氰唑)、氧(碳)头孢烯(氟氧头孢、拉氧头孢)；f)糖肽：博来霉素、永劫霉素(奥利万星、特拉万星)、替考拉宁(达巴万星)、雷莫拉宁；g)甘氨酰环素：如替加环素；h)β‑内酰胺酶扼制剂：青霉烷(舒巴坦、他唑巴坦)、氧青霉烷(克拉维酸)；i)林可酰胺：克林霉素、林可霉素；j)脂肽：达托霉素、a54145、钙依赖性抗生素(cda)；k)大环内酯类：阿奇霉素、克霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、氟雷霉素、交沙霉素、酮内酯(泰利霉素、塞红霉素)、麦迪霉素、米卡霉素、竹桃霉素、利福霉素(异烟肼、利福平、利福布丁、利福喷汀)、罗匹霉素、罗红霉素、大不雅霉素、螺旋霉素、他克莫司(fk506)、醋竹桃霉素、泰利霉素；l)单环胺：氨曲南、替吉莫南；m)恶唑烷酮类：利奈唑胺；n)青霉素类：阿莫西林、氨苄青霉素(匹氨西林、海洛西林、巴氨西林、氨苄青霉素、阿霉素)、阿替代西林、阿洛西林、苄青霉素、苄星青霉素苄青霉素、苄星青霉素苯氧甲基青霉素、克洛西林、普鲁卡因青霉素(好意思替西林)、好意思洛西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、醋甲西林、青霉素、非奈西林、苯氧基甲基青霉素、呱拉西林、氨苄西林、磺苯西林、替莫西林、替卡西林；o)多肽：杆菌肽、粘菌素、多粘菌素b；p)喹诺酮类：阿拉曲沙星、巴洛沙星、环丙沙星、克林沙、达氟沙星、二氟沙星、依诺沙星、恩诺沙星、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、格帕沙星、卡诺曲伐沙星、左氧氟沙星、洛好意思沙星、麻保沙星、莫西沙星、那氟沙星、诺氟沙星、奥比沙星、氧氟沙星、培氟沙星、曲伐沙星、格帕沙星、西他沙星、司帕沙星、替马沙星、托沙星、曲伐沙星；q)链阳性菌素：普那霉素、奎奴普丁/达福普汀；r)磺胺类：氨芐磺胺、偶氮磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲异唑、磺胺酰亚胺、磺胺吡啶、磺胺异恶唑、甲氧苄啶、磺胺甲恶唑(复方磺胺甲恶唑)；s)类固醇抗菌药物：如夫西地酸；t)四环素类：强力霉素、金霉素、氯米西环素、地好意思环素、雷莫昔林、好意思西环素、好意思他环素、米诺环素、土霉素、潘好意思环素、吡咯烷甲基四环素、四环素、甘氨酰环素(如替加环素)；u)其他类型的抗生素：番荔枝素、胂凡纳明、细菌萜醇扼制剂(杆菌肽)、danal/ar扼制剂(环丝氨酸)、dictyostatin、圆皮海绵内酯、软珊瑚醇、埃博霉素、乙胺丁醇、依托泊苷、法罗培南、夫西地酸、呋喃唑酮、异烟肼、laulimalide、甲硝唑、莫匹罗星、nam合成扼制剂(举例磷霉素)、呋喃妥因、紫杉醇、普兰西霉素、吡嗪酰胺、奎奴普丁/达福普汀、利福平、他唑巴坦替硝唑、乌菊花素。[0351]4)抗病毒药物：a)侵入/和会扼制剂：阿帕韦洛、马拉韦罗、vicriviroc、gp41(恩夫韦肽)、pro 140、cd4(艾巴利珠单抗)；b)整合酶扼制剂：雷特格韦、elvite‑gravir、globoidnan a；c)熟悉扼制剂：bevirimat、vivecon；d)神经氨酸酶扼制剂：奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦；e)核苷和核苷酸：阿巴卡韦、阿昔单韦、阿德福韦、阿莫西韦、阿昔单抗、溴夫定、西多福韦、克拉夫定、地塞米松、去羟肌苷(ddi)、elvucitabine、恩曲他滨(ftc)、恩替卡韦、泛昔洛韦、氟拉西林(5‑fu)、3’‑氟取代的2’，3’‑脱氧核苷同系物、如3’‑氟‑2’，3’‑双脱氧胸苷(flt)和3’‑氟‑2’，3’‑双脱氧鸟苷(flg)、福米韦生、9‑鸟嘌呤、碘苷、拉米夫定(3tc)、1‑核苷(举例β‑1‑胸苷和β‑1‑2'‑脱氧胞苷)、喷昔洛韦、racivir、利巴韦林、迪替丁、司他夫定(d4t)、塔利巴韦林(viramidine)、替比夫定、替诺福韦、三氟尿苷伐昔洛韦、缬更昔洛韦、扎西他滨(ddc)、王人多夫定(azt)；f)非核苷类：金刚烷胺、阿替吡啶、卡普韦林、二芳基嘧啶(依曲韦林、rilpivirine)、地拉夫定、二十二烷醇、乙米韦林、照章韦仑、膦甲酸(磷酰基甲酸)、咪喹莫特、聚乙二醇干涉素、洛韦胺、洛德腺苷、甲吲噻腙、奈韦拉平、nov‑205、长效干涉素α、鬼臼毒素、利福平、金刚乙胺、瑞喹莫德(r‑848)、醋胺金刚烷；g)卵白酶扼制剂：安普那韦、阿扎那韦、boceprevir、darunavir、福萨那韦、印地那韦、洛匹那韦、奈非那韦、普来可那立、利托那韦、沙奎那韦、telaprevir(vx‑950)、替拉那韦；h)其它类型的抗病毒药物：抗体酶、阿比朵尔、calanolide a、ceragenin、氰维林‑n、二芳基嘧啶、表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)、膦甲酸、格里菲辛、taribavirin(viramidine)、羟基脲、kp‑1461、米替福新、普来可那立、混成扼制剂、利巴韦林、seliciclib。[0352]5)发射颐养使用的发射性同位素。发射性同位素(发射性核素)的实例有3h、11c、14c、18f、32p、35s、64cu、68ga、86y、99tc、111in、123i、124i、125i、131i、133xe、177lu、211at或213bi。发射性同位素符号的抗体可用于受体靶向成像实验，或者可用于如本发明的抗体‑药物偶联物的靶向颐养(wu等nature biotechnology 2005，23(9)：1137‑1146)。细胞结合分子，举例抗体不错通过本专利的衔接子团结配体试剂，进行符号。配体不错用文件(current protocols in immunology，volumes 1and 2，coligen et al，ed.wiley‑interscience，new york，n.y.，pubs.(1991))所述的轨范与发射性金属结合、螯合或生成复合物。不错络合金属离子的螯合配体包括dota，dotp，dotma，dtpa和teta(macrocyclics，dallas，tx)等。[0353]6)另一种细胞结合分子‑药物偶联物四肢协同剂。优选的协同偶联物上的细胞毒性分子为：鹅膏毒素类似物、好意思登木素生物碱同系物、紫杉醇(紫杉烷)同系物、cc‑1065同系物、柔红霉素和多柔比星化合物、鹅膏毒素同系物、苯并二氮杂二聚体(如吡咯苯并二氮杂的二聚体(pbd、托马霉素、安曲霉素、吲哚苯并噻二氮卓类、咪唑苯并噻二氮卓类或恶唑烷苯并二氮卓类)、加利西霉素和烯二炔类抗生素化合物、放线菌素、重氮丝氨酸、博莱霉素、表柔比星、他莫昔芬、伊达比星、海兔毒素、奥瑞他汀(如mmae、mmaf、奥瑞他汀pye、奥瑞他汀tp、奥瑞他汀2‑aq、6‑aq、eb(aeb)和efp(aefp))、多卡米星、格尔德霉素、氨甲喋呤、噻替派、长春碱、长春新碱、hemiasterlin、纳沙酰胺、小金霉素、radiosumin、互花米草素、microsclerodermin、噻吩甲酰胺、埃斯呱霉素、pnu‑159682，以及它们的其同系物及以上所述物资的繁衍物。[0354]7)上述任何药物的在药学上可给与的盐、酸或繁衍物。[0355]在另一个扩充例中，免疫毒素不错四肢协同药物与细胞结合分子偶联。本发明的免疫毒素是大分子药物，不时是源自细菌或植物卵白的细胞毒性卵白，举例白喉毒素(dt)、霍乱毒素(ct)、天花粉卵白(tcs)、香石竹毒卵白、假单胞菌外毒素a(eta)、红细胞毒素、白喉毒素、ab毒素、iii型外毒素等。它也不错是一种带有剧毒的细菌成孔原毒素，经过卵白酶水解启动。原毒素的一个例子是前溶血素偏激基因校正的姿色topsalysin。topsalysin是一种经过改性的重组卵白，经过校正后被前方腺中的酶选拔性地启动，致使局部细胞牺牲和组织碎裂，却不会损害临近的组织和神经。[0356]在另一种协同免疫疗法中，下列分子的抗体：搜检点扼制剂、tcr(t细胞受体)t细胞、car(嵌合抗原受体)t细胞、b细胞受体(bcr)、当然杀伤(nk)细胞，或cd3、cd4、cd8、cd16(fcγriii)、cd19、cd20、cd22、cd25、cd27、cd30、cd33、cd37、cd38、cd40、cd40l、cd45ra、cd45ro、cd56、cd57、cd57bright、cd70、cd79、cd123、cd138、tnfβ、脂肪酸合成酶配体、mhcⅰ类分子(hla‑a、b、c)、vegf、或nkr‑p1的抗体，优选与本发明的偶联物用于协同颐养。[0357]制剂与诓骗[0358]本专利央求的偶联物被配制成液体，或者适于冻干的形态，冻干后被从头制成液体制剂。液体配方或配制的冻干粉末中的偶联物，为配方的主要身分，占0.01％‑99％的分量。一般而言，可在病东说念主上施用，无高水平抗体聚拢的液体制剂除了包含0.1克/升‑300克/升的偶联物活性身分，还包括一种或多种多元醇(举例糖)、ph值为4.5至7.5的缓冲液、名义活性剂(如聚山梨酸20或80)、抗氧化剂(举例抗坏血酸和/或蛋氨酸)、强化剂(如甘雨醇、山梨醇或氯化钠)、螯合剂(如edta)、金属络合物(如锌‑卵白络合物)、可生物降解团聚物(如聚酯)、防腐剂(如苯甲醇)和/或游离氨基酸。[0359]用于制剂的合适缓冲液包括但不限于，有机酸盐，举例柠檬酸、抗坏血酸、葡糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸或邻苯二甲酸的钠、钾、铵或三羟乙基氨基盐，氨基丁三醇盐酸、硫酸或磷酸缓冲液。此外，氨基酸阳离子也可用作缓冲液。这些氨基酸包括但不限于，精氨酸、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸和组氨酸。精氨酸缓冲液包括精氨酸乙酸盐、精氨酸氯化物、精氨酸磷酸盐、精氨酸硫酸盐，精氨酸琥珀酸盐等。在一个扩充例中，精氨酸缓冲液是精氨酸乙酸盐。组氨酸缓冲液的实例包括组氨酸氯化物‑精氨酸氯化物、组氨酸乙酸盐‑精氨酸乙酸盐、组氨酸磷酸盐‑精氨酸磷酸盐、组氨酸硫酸盐‑精氨酸硫酸盐、组氨酸琥珀酸盐‑精氨酸琥珀酸盐等。缓冲液的ph是4.5至ph7.5，优选约4.5至约6.5，更优选约5.0至约6.2。在一些扩充例中，缓冲液中有机酸盐的浓度为约10mm至约500mm。[0360]在制剂中可选地含有的“多元醇”是具有多个羟基的物资。多元醇可用作液体和冻干制剂中的踏实辅料和/或等渗剂。多元醇不错保护生物药物免受物理和化学降解。最佳能被撤废的共溶剂加多了卵白质接口处溶剂的有用名义张力，能量最故意的结构构像是名义积最小的那些溶剂。多元醇包括糖(还原和非还原糖)、糖醇和糖酸。“还原糖”是指含有半缩醛基团的糖，它大要还原金属离子，或与卵白质中的赖氨酸和其他氨基发生反馈，“非还原糖”是指不具有还原糖性质的糖。还原糖的例子有果糖、甘雨糖、麦芽糖、乳糖、阿拉伯糖、木糖、核糖、鼠李糖、半乳糖和葡萄糖。非还原糖包括蔗糖、海藻糖、山梨糖、松解糖和棉子糖。糖醇选自甘雨醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、赤藓糖醇、苏糖醇、山梨醇和甘油。糖酸包括l‑葡萄糖酸盐偏激金属盐。液体配方或冻干制剂中的多元醇含量，按分量计，为0.0％‑20％。在配方中优选浓度约为0.1％到15％的非还原糖，蔗糖或海藻糖，其中由于海藻糖的溶液踏实性，海藻糖更优。[0361]在制剂中可选的名义活性剂可选自聚山梨醇酯(聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯65、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯81、聚山梨醇酯85等)；泊洛沙姆(如泊洛沙姆188、聚(环氧乙烷)‑聚(环氧丙烷)、泊洛沙姆407或聚丙二醇‑丙二醇等)；triton；十二烷基硫酸钠(sds)；月桂基硫酸钠；辛基糖苷钠；十二烷基、肉荳蔻酰基、亚油基或硬脂基磺酰基甜菜碱；十二烷基、肉荳蔻酰基、亚油基或硬脂基肌氨酸；亚油酸、肉荳蔻基或十六烷基甜菜碱；月桂酰氨基丙基、椰油酰胺丙基、亚油酰胺基丙基、肉荳蔻酰基丙基、棕榈酰基丙基或异硬脂酰氨基丙基‑甜菜碱(举例月桂酰胺丙基)；肉荳蔻酰胺丙基、棕榈酰丙基或异硬脂酰氨基丙基‑二甲胺；甲基椰油酰基钠或甲基油基牛磺酸二钠；十二烷基甜菜碱、十二烷基二甲基氧化胺、椰油酰胺丙基甜菜碱和可可两性甘氨酸酯；monaquattm系列(如异硬脂基乙基亚胺鎓乙基硫酸盐)；聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇和丙二醇的共聚物(如pluronic、pf68等)。优选的名义活性剂是聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯，如聚山梨醇酯20、40、60或80(tween20、40、60或80)。制剂中名义活性剂的浓度范围，按照分量计，为0.0％至约2.0％。在某些特定扩充例中，名义活性剂浓度为约0.01％至约0.2％。在一个扩充例中，名义活性剂浓度为约0.02％。[0362]在制剂中可选的“防腐剂”是从根底上不错减小其中细菌的化合物。防腐剂的实例包括十八烷基二甲基芐基氯化铵、六甲基氯化铵、苯扎氯铵(烷基芐基二甲基氯化铵的混杂物，其中烷基为长链烷基)和芐索氯铵。其他类型的防腐剂包括芳醇醇如苯酚，丁基和芐基醇，对羟基苯甲酸烷基酯，如甲酯或丙酯、儿茶酚、间苯二酚、环己醇、3‑戊醇和间甲酚。液体配方或冻干粉末中的防腐剂含量，按照分量计，为0.0％‑5.0％。在一个扩充例中，所用防腐剂是苯甲醇。[0363]在制剂中四肢填充物资或张力剂或浸透压颐养剂的，合适的游离氨基酸，选自但不限于精氨酸、胱氨酸、甘氨酸、赖氨酸、组氨酸、鸟氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸谷氨酸或天冬氨酸中的一种或多种。优选碱性氨基酸为精氨酸、赖氨酸和/或组氨酸。如果组成中包含组氨酸，它不错充任缓冲剂和游离氨基酸，但是当使用组氨酸缓冲液时，不时还要包含一个非组氨酸的游离氨基酸，如赖氨酸。氨基酸不错以d‑和/或l‑型存在，但l‑型比较常见。氨基酸不错任何合适的盐的姿色存在，如精氨酸盐酸盐。液体配方或冻干粉末中的氨基酸含量，以分量计，为0.0％‑30％。[0364]可选地，制剂还包含甲硫氨酸，谷胱甘肽、半胱氨酸、胱氨酸或抗坏血酸四肢抗氧化剂，在液体配方中浓度最多为约5毫克/毫升，在冻干粉末中的含量，以分量计，为0.0％‑5.0％；可选地，制剂包含金属螯合剂，举例edta，egta等，在液体配方中浓度为约2mm，在冻干粉末中的含量，以分量计，为0.0％‑0.3％。[0365]最终的制剂不错用缓冲颐养剂(如一种酸，包括hcl、h2so4、乙酸，h3po4、柠檬酸等，或是碱，如naoh、koh、nh4oh、酒精胺、二酒精胺或三酒精胺、磷酸钠、磷酸钾、柠檬酸三钠、氨基丁三醇等)颐养至优选的ph值。制剂还应当被颐养至“等渗”，即狡计制剂具有与东说念主血基本雷同的浸透压。等渗制剂浸透压不时为250至350mosm。不错使用蒸气压或冰冻型浸透压计测量等渗性。等渗剂选自甘雨醇、山梨糖醇、乙酸钠、氯化钾、磷酸钠、磷酸钾、柠檬酸三钠或nacl。不时，缓冲盐和等渗剂在制剂中含量最多为30％(分量)。[0366]可用在本专利液体或冻干制剂中其他辅料还包括：如岩藻糖、纤维二糖、麦芽三糖、蜜二糖、辛酮糖、核糖、木糖醇、精氨酸、组氨酸、甘氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、赖氨酸、咪唑、甘氨酰甘氨酸、甘雨糖基甘油酸酯、triton x‑100、pluoronic f‑127、纤维素、环糊精、(2‑羟丙基)‑β‑环糊精、葡聚糖(10，40和/或70kd)、聚葡萄糖、麦芽糖糊精、聚蔗糖、明胶、羟丙基甲基纤维素、磷酸钠、磷酸钾、zncl2、锌、氧化锌、柠檬酸钠、柠檬酸三钠、氨基丁三醇、铜、纤连卵白、肝素、东说念主血白净卵白、鱼精卵白、甘油、edta、甲酚、苯甲醇、苯酚、多元醇、羰基被氢化还原成伯或仲羟基的糖。[0367]其它不错在本专利央求的液体制剂中使用的辅料还包括：如调味剂、抗微生物剂、甜味剂、抗氧化剂、抗静电剂、脂质如磷脂或脂肪酸脂、类固醇如胆固醇、卵白质辅料如血白净卵白(东说念主血白净卵白)、重组东说念主白卵白、明胶、酪卵白、成盐反离子如钠等。这些和另外的适用于本发明制剂的，已知的药物辅料和/或添加剂为才能域公知，如在由好意思国医药协会罗威(rowe)等东说念主编着的第四版《药用辅料手册》(the handbook of pharmaceutical excipients)中所列；以及由威尔金斯出书公司出书(2005)，热纳罗(gennaro)等东说念主编着的第21版《雷明顿：药学科学与实践》(remington：the science and practice of pharmacy)中所列。[0368]容纳本专利央求中的偶联物制剂的药物容器或工具有：小瓶、瓶、预填充打针器、预填充或自动打针器。液体配方不错在硼硅酸盐或钠钙玻璃小瓶中冷冻干燥，或滚筒干燥，成饼或粉末姿色。固体粉末也不错通过有用的喷雾干燥制备，然后用小瓶或药物容器包装，用于储存和配送。[0369]在更进一步的扩充例中，本发明提供了制剂的制备轨范，包括以下本领：(a)冻干包含偶联物，辅料和蔼冲体系的液体；(b)在介质中复溶本领(a)中的冻干混杂物，以使得复溶的制剂踏实。本领(a)重的液体可进一步包含踏实剂和一种或多种辅料，选自前述填充剂、盐、名义活性剂和防腐剂。复溶介质可遴选水，如无菌水，抑菌性打针用水(bwfi)、乙酸、丙酸、琥珀酸、氯化钠、氯化镁、氯化钠的酸性溶液、氯化镁的酸性溶液或精氨酸的酸性溶液，其含量为约10至约250mm。[0370]本专利央求的偶联物的液体制剂应具有各式设定的特征。需要探究的主要问题之一是其踏实性，因为卵白质/抗体在制造和储存时代，常会酿成可溶及不溶的聚拢体。此外，溶液中会发生各式化学反馈(脱酰胺、氧化、剪切、异构化等)，导致降解居品水平加多和/或生物活性丧失。液体或冻干制剂中的偶联物最佳应在25℃下，具有进取6个月的货架期。更优的液体或冻干制剂中的偶联物应在25℃下具有进取12个月的货架期。最为优选的液体制剂应该在2‑8℃下具有约24至36个月的货架期，冻干粉末在2‑8℃下，应该具有长达约60个月的货架期。液体制剂和冻干制剂应该具有在‑20℃或‑70℃下至少两年货架期。[0371]在某些扩充例中，制剂在冷冻(举例‑20℃或‑70℃)妥协冻后，如在冷冻妥协冻1、2或3个轮回后，照旧踏实的。踏实性不错通过各式不同的阵势进行定性和/或定量评估，包括评估药物/抗体(卵白质)比率和多聚体的生成(如使用紫外接收光谱、尺寸撤废色谱法、测量沾污度和/或通过目视搜检)；评估电荷异质性(使用阳离子交换色谱法、图像毛细管等电聚焦(icief)或毛细管电泳)；氨基末端或羧基末端序列分析；质谱分析或maldi/tof ms或hplc‑ms/ms分析；sds‑page分析，以比较还原及齐备的抗体；肽图(如胰卵白酶或lys‑‑c)分析；评估抗体的生物活性或抗原结合才气等。制剂不踏实性可能触及下列一种或多种践诺：聚拢、去酰胺(举例asn脱酰胺)、氧化(举例met氧化)、异构化(举例asp异构化)、剪切或水解或裂解(举例搭钮区裂解)、琥珀酰亚胺生成、半胱氨酸不成对、n端延长、c端加工及糖基化各别等。[0372]如果在给定时分(举例12个月)内，所述偶联物的生物活性变动大要保持在制备时活性的约20％，优选约10％(测定的罅隙范围内)，那么该踏实的偶联物在药物制剂中应当不错“保持其生物活性”。生物活性不错通过如抗原结合和/或者体外细胞毒性分析测定。[0373]用于临床，本发明的支链衔接子偶联物将以溶液或冻干固体的姿色提供，所述冻干固体可被从头溶解于无菌打针用水中。示例的施用偶联物的决策如下：每天、每周、每两周、每三周或每月一次，静脉推注8‑54周。在50至1000毫升的生理盐水中加入药物，可选地，加入东说念主血白净卵白(举例0.5至1毫升浓缩的东说念主血白净卵白溶液，100毫克/毫升)。每周给药量为约50μg至20mg/kg体重，静脉打针(每次打针10μg至200mg/kg体重)。颐养末端后4‑54周内，患者可给与第二疗程颐养。接洽给药路线、辅料、稀释剂、剂量、时分等的具体临床决策可由熟练的临床大夫细目。[0374]用体内或者离体杀死特定细胞的轨范，不错颐养的疾病的实例包括任何类型癌症的恶性肿瘤、自身免疫疾病、移植物放弃和感染(病毒、细菌或寄生虫)。[0375]达到所需颐养湮灭需要的偶联物的量取决于很多因素，包括偶联物的化学特质、效劳和生物利费用、疾病类型、患者所属物种、患者患病状态、给药路线，这些决定了所需药物剂量、给药阵势和给药决策。[0376]一般而言，可将本发明的偶联物配制成含有0.1至10％w/v偶联物的生理缓冲溶液中，供打针使用。典型的剂量范围是从1μg/kg至0.1g/kg(体重)，每天、每周、每两周、每三周或每月一次。优选的剂量范围是每天0.01mg/kg至25mg/kg体重/每天，每周，每两周、每三周或每月，或幼儿等效剂量。待施用的药物的优选剂量可能取决于诸如疾病或病症的推崇的类型和程度，特定患者的总体健康气象，所选化合物的相对生物功效，药物的配方，给药路线(静脉内，肌肉内或其他)，药物指定运输路线的药代能源学性质，以及给药速率(推注或连气儿输注)和给药决策(给定时老实的重复次数)。[0377]本发明的偶联物还大要以单元剂量姿色给药，其中术语“单元剂量”是指大要予以患者的单次剂量，何况不错很容易地处置和包装，同期活性偶联物本人或如下文所述的药学上可给与的组合物，保持物理和化学上踏实的单元剂量。典型的每天/每周/每两周/每月总剂量范围是从0.01至100mg/kg体重。四肢一般率领原则，东说念主类的单元剂量范围为1mg到3000mg每天/每周/每两周/每三周/每月。单元剂量优选1至900mg，一月一次至四次，更优选为1mg至500mg，每周/每两周/每三周一次。本文提供的偶联物不错通过与一种或多种药学上可给与的辅料混杂而配制成药物组合物。这么的单元剂量组合物不错通过口服给药，如片剂，毛糙胶囊或软凝胶胶囊的姿色的药物；或鼻内给药，如粉剂，滴鼻剂或气雾剂的药物；或皮肤给药，如使用局部用软膏，乳膏，乳液，凝胶或喷雾剂或通过透皮贴剂给药。[0378]在另一个扩充决策中，包含颐养有用剂量的结构式为(i)或(iii)的偶联物，或本发明中描绘的其它任何偶联物的药物组合物，不错与其他颐养剂，如化学颐养剂、发射颐养剂、免疫颐养剂、自身免疫病症颐养剂、抗感染剂或其他偶联物协同给药、以有用颐养或防护癌症或自身免疫疾病或感染性疾病。协同剂优选自以下药物中的一种或几种：阿巴西普、对乙酰氨基酚/氢可酮、阿达木单抗、阿法替尼马来酸盐、阿仑单抗、阿利维a酸、曲妥珠单抗、苯丙胺混杂盐(苯丙胺/右苯丙胺)阿那曲唑、阿立呱唑、阿扎那韦、atezolizumab、阿托伐他汀、阿昔替尼、贝林、贝伐单抗、卡巴他赛、卡博替、贝沙罗汀、blinatumomab、硼替佐米、波舒替尼、brentuximab vedotin、布地奈德、布地奈德/福莫特罗、丁丙诺啡、卡培他滨、卡非佐米、塞来考昔、ceritinib、西妥昔单抗、环孢素、西那卡塞、克里唑替尼、达比加群、达拉菲尼、阿法达贝汀、地瑞那韦、甲磺酸伊马替尼、达沙替尼、地尼白介素、狄诺塞麦、双丙戊酸钠、右兰索拉唑、右呱甲酯、dinutuximab、多西环素、度洛西汀、恩曲他滨/利匹韦林/替诺福韦地索普西富马酸盐、恩曲他滨/替诺福韦/照章韦仑、依诺肝素、恩杂鲁胺、阿法依泊汀、厄洛替尼、埃索好意思拉唑、依折麦布、依折麦布/辛伐他汀、非诺贝特、非格司亭、芬戈莫德、丙酸氟替卡松、氟替卡松/沙好意思特罗、氟维司群、吉非替尼、格拉替雷、醋酸戈舍瑞林、伊马替尼、替伊莫单抗、依鲁替尼、胰岛素门冬胰岛素、地特胰岛素、甘精胰岛素、赖脯胰岛素、干涉素β1a、干涉素β1b、拉帕替尼、ipilimumab、异丙托溴铵/沙丁胺醇、醋酸兰乐肽、来那度胺、挽救二甲苯磺酸盐、来曲唑、左甲状腺素、左旋甲状腺素、利多卡因、利奈唑胺、利拉鲁肽、medi4736、好意思金刚、呱醋甲酯、好意思托洛尔、莫达非尼、莫米松、尼罗替尼、nivolumab、奥法木单抗、奥立他珠单抗、帕唑帕尼、派姆单抗、培好意思曲塞、帕妥珠单抗、肺炎球菌结合疫苗、泊马度胺、普瑞巴林、喹硫平、雷贝拉唑氯化镭223、雷洛昔芬、拉替拉韦、雷莫瑞单抗、雷珠单抗、利妥昔单抗、利伐沙班、罗米地辛、罗苏伐他汀、鲁索替尼磷酸盐、沙丁胺醇、司维拉明、西地那非、siltuximab、西他列汀、西他列汀/二甲双胍、索非那新、索拉非尼、舒尼替尼、他达拉非、他莫昔芬、替拉普韦、替西罗莫司、替诺福韦/恩曲他滨、睾酮凝胶、沙利度胺(talidex)、噻托溴铵、托瑞米芬、曲好意思替尼、曲妥珠单抗、tretinoin、尤特克单抗、缬沙坦、凡德他尼、维罗非尼、伏立诺他、阿柏西普、zostavax偏激同系物、繁衍物、药学上可给与的盐、载体、稀释剂或辅料、或其组合。[0379]通过本发明中的支链衔接子偶联的药物/细胞毒性剂，不错是本发明中描绘的鹅膏毒素的任何同系物和/或繁衍物。药物/细胞毒剂领域的专科时期东说念主员不错意会，本发明所述的鹅膏毒素均不错被修饰，只消获取的化合物仍保留肇端化合物的特异性和/或活性。才能域时期东说念主员应意会，不错使用这些化合物来代替本发明所述的鹅膏毒素同系物。因此，本发明的鹅膏毒素同系物还包括这些繁衍和被修饰的化合物。[0380]本阐发书和下文扩充例中援用的通盘文件参考数据均全文援用四肢参考。扩充例[0381]本发明用底下的扩充例进一风物阐发，这些扩充例的践诺并不旨在松抄本发明的范围。在扩充例中细胞系，除了特殊阐发之外，均是依据好意思王圭表培养物收藏中心(atcc)、德国菌种收藏中心(dsmz)或中国科学院上海细胞培养中心表率的条款保存。除了特殊阐发外，细胞培养试剂来自于invitrogen公司。通盘的无水试剂均由买卖路线获取，并储存于sure‑seal密封瓶中。其他的试剂和溶剂均按照最高规格购买，使用时未经进一步的处理。用varain prestar hplc进行制备hplc分离。nmr谱在bruker 500mhz仪器上获取，化学位移以ppm为单元，四甲基硅烷为参考(0ppm)，耦合常数(j)的单元是hz。质谱数据在waters xevo g2 qtof质谱仪(衔接waters acquity uplc高效液相色谱仪和tuv检测器)上获取。不时，uplc分离在c8柱上初始，流动相a相为1％甲酸，b相为100％ch3cn。[0382]扩充例1.fmoc‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(1‑1)的合成。[0383][0384]在0℃下，向h‑ile‑otbu·hcl(25.0g，0.11mol)的dmf(300ml)溶液中，按次加入fmoc‑hyp(otbu)‑oh(45.9g，1.0eq)，hobt(16.7g，1.1eq)，edc(23.7g，1.1eq)和dipea(48.7ml，2.5eq)。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动4小时，用水(500ml)稀释，并用乙酸乙酯(300ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品。粗居品通过硅胶柱纯化(10∶1至1∶1的石油醚/乙酸乙酯)，得到44.5g(收率68.8％)化合物1‑1，为白色固体。esi m/z c34h47n2o6[m+h]+：狡计值578.33；实测值578.35。[0385]扩充例2.h‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(2)的合成。[0386][0387]向化合物1‑1(44.5g，76.9mmol)的dmf(200ml)溶液中，加入哌啶(40ml)，并将混杂物在10‑25℃下搅动1小时，在高真空下颤抖dmf得到固体粗居品，将其通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)，得到标题化合物27.2g(收率93.7％)，为无色油状物。esi m/z c19h37n2o4[m+h]+：狡计值357.2753；实测值357.2768。[0388]扩充例3.fmoc‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(2‑1)的合成。[0389][0390]在0℃下，向fmoc‑asn(trt)‑oh(50g，1.1eq)和nmm(27.2ml，3.0eq)的thf(500ml)溶液中滴加ibuo2ccl(10.9ml，1.1eq)，将混杂物在0℃下搅动30分钟，在室温下赓续搅动3小时，然后在0℃下滴加到搅动的化合物2(27.2g，1.0eq)的thf(200ml)溶液中。在室温赓续搅动16小时，加入水(500ml)，并将混杂物用乙酸乙酯(300ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，将其通过硅胶柱纯化(10∶1至1∶1石油醚/乙酸乙酯)，得到52.3g化合物2‑1，(收率70.2％)，为白色固体。esi m/zc57h67n4o8[m+h]+：狡计值935.4882；实测值935.4895。[0391]扩充例4.h‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(3)的合成。[0392][0393]向化合物2‑1(20g，21.4mmol)的dmf(100ml)溶液中加入哌啶(20ml)。将混杂物在10‑25℃下搅动1小时，并在高真空下浓缩颤抖dmf，得到固体粗居品，将其通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)得到标题化合物14.0g(收率92.3％)，为无色油状物。esi m/z c42h57n4o6[m+h]+：狡计值713.4279；实测值713.4285。[0394]扩充例5.fmoc‑cys(trt)‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(3‑1)的合成。[0395][0396]在室温下将化合物3(7.3g，10.2mmol)，fmoc‑cys(trt)‑oh(6.0g，1eq)和edc(9.7g，5.0eq)在二氯甲烷(80ml)中的混杂物赓续搅动16小时。加入水(500ml)，并用乙酸乙酯(300ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，将其通过硅胶柱纯化(10∶1至1∶1石油醚/乙酸乙酯)，得到3‑1(9.8g，收率75.2％)，为白色泡状固体。esi m/zc78h84n5o9s[m+h]+：狡计值1266.5990；实测值1266.5980。[0397]扩充例6.h‑cys(trt)‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(4)的合成。[0398][0399]向化合物3‑1(9.0g，7.03mmol)的dmf(50ml)溶液中加入哌啶(10ml)，并将混杂物在10‑25℃下搅动1小时。在高真空下颤抖dmf后，将粗居品通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)，得到7g(收率95.2％)标题化合物，为无色油状物。esi m/z c64h76n5o7s[m+h]+：狡计值1058.5466；实测值1058.5460。[0400]扩充例7.cbz‑ile‑gly‑otbu(5‑1)的合成。[0401][0402]在0℃下，向cbz‑l‑ile‑oh(15g，57.1mmol，1.0eq)的dmf(120ml)溶液中加入h‑gly‑otbu·hcl(10.5g，1.0eq)，hobt(9.3g，1.2eq)，edc(13.2g，1.2eq)和dipea(25ml，2.5eq)。将反馈在10‑25℃下搅动16小时。然后加入水(300ml)，反馈混杂物用乙酸乙酯(200ml×3)萃取。合并有机相并用盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，将其通过硅胶柱纯化(10∶1至1∶1石油醚/乙酸乙酯)，得到5‑1，19.5g(90.1％收率)，为白色固体。esi m/z c20h31n2o5[m+h]+：狡计值379.2234；实测值379.2248。[0403]扩充例8.h‑ile‑gly‑otbu(6)的合成。[0404][0405]向化合物5‑1(19.5g)的甲醇混杂物中，加入pd/c(10wt％，2.0g，含有64.2％水)。将混杂物在氢气气球(1个大气压)下搅动16小时，然后过滤并将滤液浓缩，得到化合物6(11.5g，收率93.2％)，为无色油状物。esi m/z c12h25n2o3[m+h]+：狡计值245.1866；实测值245.1860。[0406]扩充例9.fmoc‑gly‑ile‑gly‑otbu(6‑1)的合成。[0407][0408]在0℃下，向化合物6(3.0g，12.3mmol，1.0eq)的dmf(30ml)溶液中加入fmoc‑gly‑oh(3.6g，1.0eq)，hobt(1.99g，1.2eq)，edc(2.82g，加入1.2eq)和dipea(3.2ml，1.5eq)。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动2.5小时。加入水(50ml)，混杂物用乙酸乙酯(30ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，将其通过硅胶柱纯化(10∶1至1∶1石油醚/乙酸乙酯)，得到6‑1(6.6g，收率100％)，为蜡状固体。esi m/z c29h38n3o6[m+h]+：狡计值524.2761；实测值524.2778。[0409]扩充例10.fmoc‑gly‑ile‑gly‑oh(7a)的合成。[0410][0411]向化合物6(6.6g)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入tfa(25ml)。将反馈混杂物在室温搅动16小时，然后浓缩，再与甲苯共浓缩3次，得到蜡状固体化合物7a(8.2g，粗居品)。esi m/z c25h30n3o6[m+h]+：狡计值468.2135；实测值468.2147。[0412]扩充例11.fmoc‑gly‑ile‑gly‑cys(trt)‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(7a‑1)的合成。[0413][0414]在0℃下，向化合物7a(8.2g，粗居品，1.1eq)的二氯甲烷(100ml)溶液中加入化合物4(9.0g，1.0eq)，edc(7.2g，5.0eq)和dipea(6.8ml，3.5eq)(ph7.5)。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动2.5小时。加入水(500ml)，并将混杂物用乙酸乙酯(300ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，其通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)，得到6.8g(收率53.1％)的7a‑1，为浅黄色油状物。esi m/zc89h103n8o12s[m+h]+：狡计值1507.7417；实测值1507.7442。[0415]扩充例12.h‑gly‑ile‑gly‑cys(trt)‑asn(trt)‑hyp(otbu)‑ile‑otbu(9)的合成。[0416][0417]向化合物7a‑1(6.8g)的dmf(30ml)溶液中，加入哌啶(6ml)，并将混杂物在10‑25℃下搅动1小时。然后在高真空下颤抖dmf，得到固体粗居品，将其通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)，得到5.2g(收率91.2％)标题化合物，为无色油状物。esi m/z c74h193n8o10s[m+h]+：狡计值1285.6736；实测值1285.6750。[0418]扩充例13. 6‑硝基‑d‑色氨酸(10a)的合成。[0419][0420]在剧烈搅动下，向d‑色氨酸(40.8g，0.20mol)和尿素(0.50g)的冰醋酸(500ml)悬浮液中加入发烟硝酸(7.5ml)的冰酸(30ml)溶液。固体溶解并变成黄色溶液，连接搅动，溶液变成悬浮液。在10℃下，向悬浮液中冉冉加入发烟硝酸(17.5ml)的冰醋酸(70ml)溶液。固体溶解，溶液从黄色变成棕色。待加完后，将溶液在室温下赓续搅动22小时。将反馈混杂物浓缩至约100ml，然后加入水(200ml)，酿成黄色千里淀并过滤收罗，用极少水和乙酸乙酯洗涤。将该固体在空气中干燥，重16.8g。将滤液进一步浓缩至干，并在5％硝酸中重结晶，得到另一批居品(10g)。esi ms m/z 11h12n3o4[m+h]+：狡计值250.0829；实测值250.0835。[0421]扩充例14. 6‑硝基‑n，n′‑双(叔丁氧基羰基)‑d‑色氨酸的合成(11)。[0422][0423]在0℃下，向化合物10a(6.0g，24.1mmol)的二氯甲烷(50ml)混杂物中，加入氢氧化钠(9.7g，10eq)，bu4nhso4(1.6g，0.2eq)，然后加入boc2o(20.2g，3.5eq)的二氯甲烷(30ml)溶液。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动16小时，然后加入水(60ml)，用二氯甲烷(300ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到标题化合物7.5g(收率69.4％)，为浅黄色油状物。esi ms m/z 21h28n3o8[m+h]+：狡计值450.0908；实测值450.0930。[0424]扩充例15. 6‑硝基‑n，n′‑双(叔丁氧基羰基)‑d‑色氨酸苄酯(12)的合成。[0425][0426]将化合物11(7.1g，15.8g，1.0eq)，碳酸钾(4.3g，2.0eq)，bnbr(3.5ml，1.1eq)和丙酮(80ml)混杂物回流2.5h，然后冷却至室温，加入水(30ml)，并用二氯甲烷(30ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，通过硅胶柱纯化(10：1至3：1石油醚/乙酸乙酯)，得到8.1g呈浅红色油状物12(收率95.2％)。esi ms m/z 28h34n3o8[m+h]+：狡计值540.2347；实测值540.2360。[0427]扩充例16. 2‑苄基8‑二叔丁基3a‑羟基‑6‑硝基‑3，3a‑二氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑1，2，8(2h，8ah)‑三羧酸酯(13)的合成。[0428][0429]dmdo的制备轨范：将蒸馏水(20ml)，丙酮(30ml)和碳酸氢钠(24g，0.285mol)在1升圆底烧瓶中混杂，在冰/水浴中冷却并磁力搅动。20分钟后，住手搅动，一次性加入oxone(25g，0.0406mol)。将烧瓶宽松地盖上，剧烈搅动15分钟，同期保持冰浴状态。然后将含有反馈物的烧瓶衔接至带有室温水浴锅的旋转浓缩仪。将缓冲球(250ml)在干冰/丙酮浴中冷却，并通过台式隔阂泵抽真空(165毫托)。15分钟后，水浴温度在10分钟内升至40℃。当水浴温度达到40℃时，开释真空并将烧瓶从加热的开水浴中起飞，立即住手蒸馏。将dmdo的浅黄色丙酮溶液从缓冲球中径直倒入有刻度的量筒中，以测量溶液的总体积(约25ml)，然后将溶液用硫酸钠干燥。[0430]通过过滤颤抖硫酸钠，并用5ml的丙酮洗涤滤饼。不错凭据adam等东说念主(adam，w.；chan，y.y.；cremer，d.；gauss，j.；scheutzow，d.；scheutzow，d.；schindler，m.j.org.chem.1987，52，2800‑2803)的轨范滴定所制备的dmdo溶液。湮灭一致骄气溶液中有2.1–2.3mmol的dmdo。滴定后立即使用dmdo溶液。[0431]在0℃下，向搅动的化合物12(0.60g，1.11mmol)的丙酮混杂物中滴加上述冷却的dmdo溶液。将混杂物在0℃下搅动2小时，然后在室温下赓续搅动16小时，浓缩，得到粗居品，加入水(20ml)，并将所得溶液用乙酸乙酯(20ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(20ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，通过硅胶柱纯化(10：1至3：1石油醚/乙酸乙酯)，得到0.41g的灰色固体13。esi ms m/z28h34n3o9[m+h]+：狡计值556.2296，实测值556.2320。[0432]扩充例17. 1，8‑双(叔丁氧羰基)‑3a‑羟基‑6‑硝基‑1，2，3，3a，8，8a‑六氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑2‑羧酸的合成(14)。[0433][0434]向化合物13(0.31g，0.56mmol)的thf(15ml)混杂物中加入氢氧化钠(0.089g，4.0eq)的水溶液(8ml)。将混杂物在40℃下搅动16小时。然后浓缩颤抖thf，将残余物用水(15ml)稀释，并用乙酸乙酯(30ml×2)洗涤。用1n hcl将得到的水相颐养ph至3，用乙酸乙酯(20ml×3)萃取。合并的有机相用盐水(20ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到油状物14(83.8％收率)。esi ms m/z 21h28n3o9[m+h]+：狡计值466.1826；实测值466.1840。[0435]扩充例18.n‑苯基硒代邻苯二甲酰亚胺的合成(15)。[0436][0437]在氮气下，向邻苯二甲酰亚胺钾(4.03g，21.8mmol)和苯基硒基氯(5.00g，26.1mmol)的混杂物中加入无水正己烷(20ml)。在室温下，赓续搅动3小时，加入无水二氯甲烷(100ml)，并将浅红色溶液过滤以颤抖固体物资。将滤液浓缩至约20ml，并用干燥的正己烷(80ml)稀释。通过过滤收罗得到的千里淀物，并用干燥的正己烷洗涤，在真空下干燥，得到浅黄色固体(4.55g，69％产率)。esi ms m/zc14h10no2se[m+h]+：狡计值303.9878；实测值303.9890。[0438]扩充例19. 6‑硝基‑d‑色氨酸甲酯(16)的合成。[0439][0440]向10a(2.00g，0.803mmol)的甲醇溶液中滴加二氯亚砜(0.58ml，8.03mmol)。然后将混杂物加热至回流并搅动2小时。冷却至室温后，将反馈混杂物用水(60ml)稀释，并使用10％氢氧化钠颐养ph至8.0，然后用乙酸乙酯(60ml×3)萃取。合并有机相并用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到浅红色固体(1.50g，71.4％)。esi ms m/z 12h14n3o4[m+h]+：狡计值264.0985；实测值264.0942。[0441]扩充例20. 6‑硝基‑n，n′‑双(叔丁氧基羰基)‑d‑色氨酸甲酯(17)的合成。[0442][0443]在0℃下，向化合物16(720mg，2.74mmol)的二氯甲烷(20ml)混杂物中，加入氢氧化钠(1.09g，10eq)，bu4nhso4(183mg，0.2eq)，然后加入boc2o(2.3g，3.5eq)的二氯甲烷(5ml)溶液。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动8小时，然后加入水(30ml)，用二氯甲烷(20ml×3)萃取。合并有机相，用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，通过硅胶柱纯化(10：1至3：1石油醚/乙酸乙酯)，得到8.1g呈浅黄色油状的标题化合物(收率64.2％)。esi ms m/z22h30n3o8[m+h]+：狡计值464.2034；实测值464.2058。[0444]扩充例21.(2s)‑1，8‑二叔丁基2‑甲基6‑硝基‑3a‑(苯基硒基)‑3，3a‑二氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑1，2，8(2h，8ah)‑三羧酸酯(18)的合成。[0445][0446]向化合物17(700mg，1.51mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入硫酸钠(1.8g)和4‑甲苯磺酸吡啶盐(68mg，0.2eq)和n‑苯基硒代邻苯二甲酰亚胺(715mg，1.5eq)。将反馈物在室温搅动过夜，然后用水(30ml)稀释，并用乙酸乙酯(30ml×3)萃取。合并有机相并用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，通过硅胶柱纯化(10：1至3：1石油醚/乙酸乙酯)，得到标题化合物400mg(收率43.0％)，为浅黄色油状物，同期回收部分肇端物料。esi ms m/z c28h34n3o8se[m+h]+：狡计值620.1512；实测值620.1545。[0447]扩充例22.(2s)‑1，8‑二叔丁基2‑甲基3a‑羟基‑6‑硝基‑3，3a‑二氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑1，2，8(2h，8ah)‑三羧酸酯(19)的合成。[0448][0449]在0℃下，向化合物18(1.80g，2.90mmol)的二氯甲烷(30mmol)溶液中加入碳酸钾(2.00g，5.0eq)和m‑cpba(85％，1.48g，2.5eq)。将反馈物加热至室温并搅动过夜，然后用二氯甲烷(100ml)稀释并过滤。滤液用饱和亚硫酸氢钠(30ml×3)和盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，用硅胶柱纯化(20：1至4：1石油醚/乙酸乙酯)，得到呈白色泡沫状标题化合物0.94g(产率67.7％)。esi ms m/z 22h30n3o9[m+h]+：狡计值479.1983；实测值479.1995。[0450]扩充例23. 1，8‑双(叔丁氧羰基)‑3a‑羟基‑6‑硝基‑1，2，3，3a，8，8a‑六氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑2‑羧酸的合成(14)。[0451][0452]向化合物19(0.90g，1.88mmol)的thf/甲醇/水(2∶2∶1)溶液中加入lioh(0.23g，5.0eq)。将该溶液在室温搅动过夜，然后浓缩，并通过硅胶柱纯化(1:20至1：3甲醇/二氯甲烷)，得到标题化合物(0.85g，97.3％产率)。esi ms m/z21h28n3o9[m+h]+：狡计值466.1826；实测值466.1845。[0453]扩充例24.(s)‑3‑(1h‑吲哚‑2‑基)‑2‑(三苯甲基氨基)丙酸的合成(32)。[0454][0455]在室温下，将氯代三甲基硅烷(3.4ml，26.9mmol)冉冉加入至l‑色氨酸(5.00g，24.5ml)的二氯甲烷(40ml)悬浮液中。将混杂物连气儿搅动4.5小时，并加入三乙胺(6.8ml，49.0mmol)，然后加入三苯甲基氯(7.17g，25.7mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。将混杂物在室温下搅动20小时，然后用甲醇(25ml)淬灭。将反馈浓缩至干并将其从头溶解在二氯甲烷中，用5％柠檬酸溶液(3×)和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物进一步溶解在二氯甲烷中，并通过硅藻土垫过滤，并将滤液浓缩，得到浅白色泡沫状物(11.8g)，将其径直用于下一步。esi ms m/z 446.30([m+h]+)。[0456]扩充例25.(s)‑甲基2‑(3‑(1h‑吲哚‑2‑基)‑2‑(三苯甲基氨基)丙烷酰胺基)乙酸酯(33)的合成。[0457][0458]向32(9.27g，30.7mmol)的thf(30ml)溶液中加入甘氨酸甲酯盐酸盐(2.85g，22.8mmol)和hobt(3.08g，22.8mmol)。将混杂物冷却至0℃，并加入三乙胺(7.4ml，51.9mmol)，然后分批加入edc·hcl(4.38g，22.8mmol)。将混杂物升温至室温并搅动20小时，然后浓缩并从头溶解在二氯甲烷中，用5％柠檬酸溶液(3×)和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物用乙酸乙酯打浆，过滤收罗白色固体(6.46g，两步收率65％)。esi ms m/z 518.20([m+h]+)。[0459]扩充例26. 2‑(3a‑羟基‑1‑三苯甲基‑1，2，3，3a，8，8a‑六氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑2‑羧酰胺基)乙酸甲酯的合成(34)。[0460][0461]在‑78℃下，向trt‑trp‑gly‑ome(0.80g，1.54mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入dmdo的丙酮(2.25mmol)溶液。1小时后，将混杂物在室温下减压浓缩至干。通过柱色谱法(正己烷/乙酸乙酯/三乙胺70：30：1至30：70：1)纯化，得到浅黄色泡沫状混杂物，为两种非对映异构体混杂物(0.58g，70％收率)。esi ms m/z 534.22([m+h]+)。[0462]扩充例27. 2‑(3a‑羟基‑1‑三苯甲基‑1，2，3，3a，8，8a‑六氢吡咯并[2，3‑b]吲哚‑2‑甲酰胺基)乙酸(35)的合成。[0463][0464]向tr‑hpi‑gly‑ome(非对映异构体混杂物)(0.80g，1.50mmol)的二恶烷/水(30ml，v/v 2：1)溶液中加入lioh(0.63g，15.0mmol)，并在室温下搅动30分钟(tlc骄气肇端原料隐藏(二氯甲烷/甲醇，9∶1))。将反馈混杂物蒸发至干并将残余物通过短硅胶柱纯化，用二氯甲烷/甲醇/三乙胺(90∶10∶1)洗脱。合并各组分，浓缩得到浅黄色固体，为两种非对映异构体的三乙胺盐(0.89g，95％收率)。[0465]扩充例28.(2s)‑二叔丁基2‑((5s，8r，14s)‑5‑((2s，4r)‑4‑(叔丁氧基)‑2‑((2s，3s)‑1‑(叔丁氧基)‑3‑甲基‑1‑氧代戊‑2‑基)氨基甲酰基)吡咯烷‑1‑羰基)‑14‑((s)‑仲丁基)‑3，7，10，13，16‑五氧代‑1，1，1‑三苯基‑8‑((三苯甲基硫)甲基)‑2，6，9，12，15‑五氮杂十七烷‑17‑基)氨基甲酰基)‑3a‑羟基‑6‑硝基‑3，3a‑二氢代吡咯并[2，3‑b]吲哚‑1，8(2h，8ah)‑二羧酸酯(36)的合成。[0466][0467]在0℃下，向化合物14(0.27g，0.58mmol)的dmf(5ml)溶液中加入化合物9(0.75g，1.0eq)，edc(0.17g，1.5eq)，hobt(0.12g，1.5eq)和dipea(0.25ml，2.5eq)。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动16小时。加入水(20ml)，混杂物用乙酸乙酯(15ml×3)萃取。合并有机相用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到粗居品，其通过硅胶柱纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯至10：1二氯甲烷/甲醇)，得到0.5g(收率52.3％)的36，为浅黄色油状物。esi ms m/z95h118n11o18s[m+h]+：狡计值1732.8378；实测值1732.8405。[0468]扩充例29.(2s，3s)‑2‑((2s，4r)‑1‑((s)‑4‑氨基‑2‑((3r，9s，15s)‑15‑氨基‑9‑((s)‑仲丁基)‑19‑硝基‑5，8，11，14‑四氧代‑2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，21‑十六烷氢‑[1，4，7，10，13]硫杂四氮杂环十八碳[18，17‑b]吲哚‑3‑甲酰胺基)‑4‑氧代丁酰基)‑4‑羟基吡咯烷‑2‑甲酰胺基)‑3‑甲基戊酸(37)的合成。[0469][0470]向化合物36(200mg)的二氯甲烷(1.0ml)溶液中加入tfa(2.0ml)，并将反馈混杂物在室温赓续搅动16小时。然后浓缩，并与甲苯共浓缩三次。粗居品通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到化合物37(50mg，收率47.1％)，为浅黄色油状物。esi ms m/z 918.40([m+h]+)。[0471]扩充例30.化合物38的合成。[0472][0473]在0℃下，向化合物37(150mg，0.16mmol)的dmf(20ml)溶液中加入edc(124.0mg，4.0eq)，hobt(88.0mg，4.0eq)和dipea(128μl，4eq)。将反馈混杂物在10‑25℃下搅动16小时，加入水(50ml)，将混杂物用乙酸乙酯(50ml×3)萃取。合并有机相，用盐水(100ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到呈黄色油状的粗居品38(92.0mg，收率64.6％)，其无需进一步纯化即可用于下一册领。esi ms m/z 900.36([m+h]+)。[0474]扩充例31.化合物39的合成。[0475][0476]向化合物38(50.0mg，55.5μmol)的甲醇(50ml)溶液中加入pd/c(10wt％，200mg，含有64.2％的水)。将混杂物在氢气球(1个大气压)下搅动2小时，然后过滤并将滤液浓缩。得到化合物39(45.0mg，产率93.3％)，为无色油状物。esi ms m/z 870.39([m+h]+)。[0477]扩充例32.化合物40的合成。[0478][0479]在0℃下，向化合物38(90.0mg，100.0μmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入m‑cpba(85％，24mg，1.2eq)，然后将反馈温热至室温，搅动2小时。将反馈物用二氯甲烷(50ml)稀释，用饱和的硫酸氢钠(30ml)淬灭，并用饱和的碳酸氢钠(30ml)，盐水(30ml)洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到标题化合物(57.1mg，62％收率)，为白色泡沫。esi ms m/z 916.30([m+h]+)。[0480]扩充例33.化合物42的合成。[0481][0482]向化合物40(57.0mg，62.3μmol)的甲醇(50ml)溶液中加入pd/c(10wt％，200mg，含有64.2％的水)。将混杂物在氢气球(1个大气压)下搅动2小时，然后过滤并将滤液浓缩。得到化合物42(50.0mg，产率90.7％)，为白色泡沫状物。esi ms m/z 886.56([m+h]+)。[0483]扩充例34.单环八肽63的固投合成。[0484]凭据以下决策，将fmoc‑ile‑oh衔接到2‑氯三苯甲基氯树脂上：[0485]将fmoc‑ile‑oh(0.35g，1.0mmol)和dipea(0.70ml，4.0mmol)溶解在无水二氯甲烷(10ml)中。将得到的溶液加入到2‑氯三苯甲基树脂(1.0g，0.911mmol/g，gl biochem)中，并将混杂物在氮气保护下振摇1.5小时。随后加入甲醇(2ml)，并连接摇动30分钟。在真空下将液体排干，并用二氯甲烷(15ml)，dmf(10ml)和甲醇(10ml)洗涤树脂，在真空下干燥。[0486]凭据以下决策进行偶联：[0487]将树脂置于柱中，并在dmf(10ml)中溶胀30分钟。在真空下将溶剂排干，并通过与20％哌啶/dmf反馈30分钟来切割n‑末端fmoc保护基。脱保护后，将树脂按次用dmf(3×10ml)，二氯甲烷(3×10ml)，dmf(3×10ml)洗涤。将下一个fmoc保护的氨基酸(fmoc‑xaa‑oh，5eq)在偶联剂hbtu(5eq)和dipea(10eq)的dmf(10ml)溶液的作用下与树脂偶联，反馈进行2小时。然后将树脂按次用dmf(3×10ml)，二氯甲烷(3×10ml)和dmf(3×10ml)充分洗涤。取极少样品，与六氟异丙醇(hfip)和二氯甲烷反馈5分钟，以从树脂上裂解肽，然后通过质谱检测。在与非市售氨基酸(举例trt‑hpi‑gly‑oh)偶联时，使用较少确当量(3eq.)的氨基酸和较长的反馈时分(3小时)。[0488]当通盘偶联完成时，将结合在树脂上的肽出动至圆底烧瓶中，加入tfa(10ml)并在室温赓续搅动5小时。tfa处理可同期堵截酸不踏实的保护基。过滤树脂，并用二氯甲烷(10ml)和甲醇(10ml)洗涤。将滤液浓缩并在水和乙酸乙酯之间分拨。水类似过制备型hplc(水/乙腈)纯化，得到为白色固体的单环八肽63(40.3mg，5％收率)。esi ms m/z 888.38([m+h]+)。[0489]扩充例35.ile3‑s‑脱氧鹅膏毒素(64)的合成。[0490][0491]向单环八肽(257mg，0.289mmol)的无水dmf(50ml)溶液中加入edc·hcl(277mg，1.45mmol)，hobt(390mg，2.89mmol)和dipea(0.25ml，1.45mmol)。将反馈物在室温赓续搅动20小时，然后浓缩，并通过制备型hplc纯化(水/乙腈)，得到白色固体化合物64(90.1mg，36％收率)。esi ms m/z 870.40([m+h]+)。[0492]扩充例36.化合物65的合成。[0493][0494]在0℃下，向化合物64(50.0mg，0.0575mmol，1.0eq)的thf(10ml)溶液中加入t‑buono(70μl，0.575mmol)。将反馈物搅动1小时，然后在室温下搅动20小时，加入水(50ml)后，将反馈混杂物浓缩并通过制备型hplc(水/乙腈)纯化，得到白色固体(26.2mg，50％收率)。esi ms m/z 915.38([m+h]+)。[0495]扩充例37.化合物68的合成。[0496][0497]将硝基化合物(26mg，0.0284mmol)和pd/c(10wt％，100mg)的甲醇(20ml)混杂物在室温下催化加氢反馈(1大气压氢气)1小时。然后通过硅藻土过滤(助滤剂)。浓缩滤液，得到白色固体(25mg，99％收率)。esi ms m/z 885.38([m+h]+)。[0498]扩充例38.化合物69的合成。[0499][0500]在冰水浴中，向化合物68(25mg，0.0282mmol)的thf/甲醇/水(2∶2∶1，50.0ml)溶液中加入lioh(3.40mg，5eq)。将反馈在0℃下搅动30分钟。然后浓缩并通过短硅胶柱(0‑10％甲醇/二氯甲烷)纯化，得到白色泡沫(15.2mg，61％收率)。esi ms m/z 871.38([m+h]+)。[0501]扩充例39.化合物71的合成。[0502][0503]向化合物3‑n，n‑(2”‑马来酰亚胺乙基)(2'，5'，8'，11'，14'，17'，20'，23'，26'‑九氧杂二十八烷‑28'‑亚砜)氨基丙酸(70)(14.1mg，0.0206mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中，加入nhs(2.8mg，0.0248mmol)和edc·hcl(4.9mg，0.0258mmol)，并将反馈混杂物在40℃下搅动2小时，然后用二氯甲烷(100ml)稀释，并用水(20ml)和盐水(20ml)洗涤。浓缩有机相，得到粗居品，无需进一步纯化即可径直使用。[0504]将上述粗居品和化合物69(15mg，0.0172mmol)溶解在dmf(10ml)中，向其中加入dipea(15μl，5eq)。将反馈物在室温搅动过夜，然后浓缩，通过制备型hplc(乙腈/水)纯化，得到白色泡沫(12.0mg，36％收率)。esi ms m/z 1523.68([m+h]+)。[0505]扩充例40. 2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂二十八烷‑28‑叔丁基酯的(136)合成。[0506][0507]将nah(60％，8.0g，200mmol)加入到2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷25‑醇(38.4g，100mmol)的thf(1.0l)溶液中。在室温搅动30分钟后，加入2‑溴乙酸叔丁酯(48.8g，250mmol)，并在室温下搅动1小时。然后将混杂物倒入冰水，用二氯甲烷萃取，有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。通过柱色谱法纯化(0％至5％甲醇/二氯甲烷)，得到呈黄色油状的化合物136(27.6g，59％收率)。esi ms m/z 499.40([m+h]+)。[0508]扩充例41. 2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂二十八烷‑28‑酸(137)的合成。[0509][0510]将化合物136(35.6g，73.8mmol)溶解在二氯甲烷(400ml)中，然后加入甲酸(600ml)。将所得溶液在25℃下搅动过夜。真空颤抖通盘蒸发物，得到标题居品，为黄色油状物(31.0g，表面收率)。esi ms m/z 443.45([m+h]+)。[0511]扩充例42. 2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂二十八烷‑28‑酰氯(138)的合成。[0512][0513]向化合物137(31.0g，73.8mmol)的二氯甲烷(600ml)溶液中加入(cocl)2(100ml)和dmf(52g，0.74mmol)。将得到的溶液在室温赓续搅动4小时。真空颤抖通盘蒸发物，得到标题居品(32.8g)，为黄色油状物。esi ms m/z 461.38([m+h]+)。[0514]扩充例43.(s)‑34‑((苄氧基)羰基)氨基)‑28‑氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29‑氮杂三十五烷‑35‑酸(139)的合成。[0515][0516]将z‑l‑lys‑oh(41.4g，147.6mmol)，碳酸钠(23.4g，221.4mmol)和氢氧化钠(5.9g，147.6mmol)溶于水(720ml)中。将混杂物冷却至0℃，向其中加入化合物138(32.8g，73.8mmol)的thf(20ml)溶液。将得到的混杂物在室温搅动1小时。在真空下颤抖thf，并在冰冷却下将浓hcl添加到水溶液中，直到ph值达到3。用二氯甲烷萃取后，有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到标题居品，为黄色油状物(50.0g，99％收率)。esi ms m/z 705.30([m+h]+)。[0517]扩充例44.(s)‑叔丁基34‑((苄氧基)羰基)氨基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂‑40‑酯(140)的合成。[0518][0519]将4‑氨基丁酸叔丁酯(1.03g，6.12mmol)和化合物139(3.91g，5.56mmol)的dmf(18ml)混杂物冷却至0℃，并按次加入hatu(2.32g，6.12mmol)和tea(1.2ml，8.34mmol)。将反馈搅动1小时，然后用水(300ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×250ml)萃取。用盐水洗涤有机溶液，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(32：1二氯甲烷/甲醇)纯化，得化合物140(5.10g，99％收率)。esi ms m/z 846.50([m+h]+)。[0520]扩充例45.(s)‑叔丁基34‑氨基‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酯(141)的合成。[0521][0522]在氢化瓶中，向化合物140(1.0g，1.18mmol)的甲醇(50ml)溶液中加入pd/c(10wt％，0.10g)。将混杂物飘荡2小时，通过硅藻土(助滤剂)过滤，并将滤液浓缩，得到化合物141(0.93g，收率＞100％)。esi ms m/z 712.50([m+h]+)。[0523]扩充例46.(s)‑叔丁基34‑(4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酯(142)的合成。[0524][0525]在室温下，向化合物141(0.93g，1.18mmol)和n‑琥珀酰亚胺基4‑马来酰亚胺基丁酸酯(0.50g，1.77mmol，1.eq)的95％酒精(50ml)溶液中加入硫酸氢钠溶液(0.1m，ph 5.0，10ml)。将混杂物搅动过夜，然后浓缩并用水(50ml)稀释，并用二氯甲烷(80ml×3)萃取，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(25∶1的二氯甲烷/甲醇)，得到标题化合物(0.82g，80％)，为浅黄色油状物。esi ms m/z 877.52([m+h]+)。[0526]扩充例47.(s)‑34‑(4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酸(143)的合成。[0527][0528]将化合物144(0.82g，0.94mmol)溶解于甲酸(10ml)中，并在室温下搅动1小时。浓缩反馈混杂物，并与甲苯共浓缩两次，并将残余物置于真空泵上，得到化合物143(0.80g，粗居品)。esi ms m/z 820.45([m+h]+)。[0529]扩充例48.(s)‑2，5‑二氧吡咯烷‑1‑基34‑(4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酯(144)的合成。[0530][0531]向化合物143(0.80g，粗居品，0.94mmol)的dma(5.0ml)溶液中加入nhs(0.12g，1.03mmol)和edc·hcl(0.27g，1.41mmol)。在室温下赓续搅动2小时，然后用水(15ml)稀释并用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。合并的有机相用盐水(10ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(10‑50％乙酸乙酯/石油醚)，得到无色油状物(0.67g，78％收率)。esi ms m/z 918.55([m+h]+)。[0532]扩充例49.化合物145的合成。[0533][0534]向化合物42(50mg，0.0565mmol)和化合物144(77mg，1.5eq)的酒精(10ml)溶液中，加入0.1m磷酸二氢钠(10ml)并搅动30分钟。将反馈物浓缩并通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到白色泡沫(44mg，46％收率)。esi ms m/z 1689.10([m+h]+)。[0535]扩充例50.(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基甲酸叔丁基酯(147)的合成。[0536][0537]将n‑boc‑乙二胺(5.6ml，35.4mmol，1.1eq)和饱和碳酸氢钠(60ml)的混杂物冷却至0℃，分批加入n‑甲氧基羰基马来酰亚胺(5.00g，32.2mmol，1.0eq)。在0℃下，搅动30分钟后，将反馈升温至室温搅动1小时。过滤收罗千里淀物，并用冷水洗涤，然后溶解在乙酸乙酯中，并用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，得到白色固体(6.69g，87％收率)。esi ms m/z 241.12([m+h]+)。[0538]扩充例51.(2‑(1，3‑二氧代‑3a，4，7，7a‑四氢代‑1h‑4，7‑环氧异吲哚‑2(3h)‑基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(148)的合成。[0539][0540]在高压管中，将化合物147(6.00g，25.0mmol)，呋喃(18.0ml)的甲苯(120ml)溶液加热至回流，搅动16小时，反馈时代无色溶液变为黄色。然后将混杂物冷却至室温，浓缩。将所得白色固体经乙醚打浆，得到化合物148(6.5g，84％收率)。esi ms m/z 309.13([m+h]+)。[0541]扩充例52. 2‑(2‑氨基乙基)‑3a，4，7，7a‑四氢‑1h‑4，7‑环氧吲哚‑1，3(2h)‑二酮盐酸盐(149)的合成。[0542][0543]在室温下将化合物148(9.93g，32.2mmol)的二恶烷(15ml)溶液与浓盐酸(15ml)反馈3小时。浓缩反馈物，过滤收罗固体，用乙酸乙酯洗涤滤饼。将固体在烘箱(50℃)中干燥过夜，得到化合物149(6.94g，88％收率)。esi ms m/z206.05([m+h]+)。[0544]扩充例53.化合物151的合成。[0545][0546]在‑10℃下，向化合物149(1.22g，5mmol)的thf(10ml)溶液中加入pocl3(0.47ml，5mmol)。搅动10分钟后，加入2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂二十八烷‑28‑胺(2.14g，5mmol)，然后加入dipea(0.87ml，5mmol)。将反馈升温至0℃并搅动3小时，然后浓缩。将残余物用二氯甲烷(10ml)稀释，并通过硅藻土过滤，滤液径直用于下一步。esi ms m/z 716.29([m+h]+)。[0547]扩充例54.化合物111的合成。[0548][0549]在室温下，向化合物42(1.50g，1.69mmol)，4‑(((苄氧基)羰基)氨基)丁酸n‑琥珀酰亚胺酯(0.67g，1.2eq)，dipea(0.44ml，1.5eq)和dmf(10.0ml)的混杂物搅动过夜，然后浓缩，并通过短硅胶柱(10‑85％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到无色油状物(1.58g，85％收率)。esi ms m/z 1105.47([m+h]+)。将该油溶于thf(5.0ml)中，并在氢气球下与pd/c(10wt％，包含62％的水，50mg)搅动1小时，然后在硅藻土上过滤，浓缩，得到无色油(1.40g，收率100％)，无需进一步纯化即可使用。esi ms m/z 971.43([m+h]+)。[0550]扩充例55.化合物152的合成。[0551][0552]取上述151溶液(1.0mmol)的五分之一，在0℃下，向其中加入dipea(0.17ml，1.0mmol)，然后加入111(0.97g，1.0mmol)的二氯甲烷(1.0ml)溶液。将反馈在0℃下搅动2.5小时，然后在30℃下搅动过夜。浓缩后，残余物通过硅胶柱纯化(1‑50％乙酸乙酯/石油醚和0‑10％甲醇/二氯甲烷)，得到标题居品152(0.99g，60％)，为无色油状物。esi ms m/z 1650.74([m+h]+)。[0553]扩充例56.化合物153的合成。[0554][0555]将化合物152(0.99g，0.0006mmol)的甲苯/dma(1：1，2.0ml)溶液在100℃下加热2小时，然后浓缩，并通过硅胶柱纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.48g，52％收率)，为白色泡状物。esi ms m/z 1582.90([m+h]+)。[0556]扩充例57. 4‑(双(2‑羟乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸甲酯(156)的合成。[0557][0558]将琥珀酸二甲酯(20.0g，136.9mmol)和二羟乙胺(7.20g，68.7mmol)的无水甲苯(500ml)和吡啶(50ml)混杂物在150℃下加热28小时。将混杂物浓缩并在硅胶柱上纯化，用5‑25％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(12.5g，83％收率)。esi ms m/z 242.42[m+na]+。[0559]扩充例58. 4‑(双(2‑((甲磺酰基)氧基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸甲酯(157)的合成。[0560][0561]向4‑(双(2‑羟乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸甲酯(12.0g，49.56mmol)的无水吡啶(350ml)溶液中加入甲磺酰氯(20.0g，175.4mmol)。搅动过夜后，将混杂物浓缩，用乙酸乙酯(350ml)稀释，用冷的1m磷酸二氢钠(2×300ml)洗涤，有机相用硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得到粗居品(18.8g，＞100％收率)。粗居品无需进一步纯化即可用于下一步。esi ms m/z 376.06([m+h]+)。[0562]扩充例59. 3，6‑环内氧代‑δ‑四氢邻苯二甲酰亚胺(159)的合成。[0563][0564]向马来酰亚胺(10.0g，103.0mmol)的甲苯(200ml)溶液中加入呋喃(10.0ml，137.4mmol)。在100℃下，将混杂物在1l压力反馈釜中加热8小时，冷却至室温后将固体用甲醇洗涤，滤液浓缩并在乙酸乙酯/正己烷中结晶，得到16.7g(99％)的标题化合物。1h nmr(cdcl3)：11.12(s，1h)，6.68～6.64(m，2h)，5.18～5.13(m，2h)，2.97～2.92(m，2h)。esi ms m/z[m+na]+188.04。[0565]扩充例60. 4‑((2‑((3ar，4r，7s，7as)‑1，3‑二氧代‑3a，4，7，7a‑四氢代‑1h‑4，7‑环氧异吲哚‑2(3h)‑基)乙基)(2‑(((4r，7s，7as)‑1，3‑二氧代‑3a，4，7，7a‑四氢代‑1h‑4，7‑环氧异吲哚‑2(3h)‑基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸甲酯(160)的合成。[0566][0567]向4‑(双(2‑(((甲基磺酰基)氧基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸甲酯(157，新制备，90％纯度，8.5g，20mmol)的dma(350ml)溶液中，加入3，6‑内氧代‑δ‑四氢邻苯二甲酰亚胺(10.2g，61.8mmol)，碳酸钠(8.0g，75.5mmol)和碘化钠(0.3g，2.0mmol)。将混杂物在室温搅动过夜，浓缩，用乙酸乙酯(350ml)稀释，用饱和的碳酸氢钠溶液(300ml)，饱和nacl(300ml)和1m nah2po4(300ml)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，上样到硅胶柱上，并用10‑30％乙酸乙酯/正己烷洗脱，得到标题化合物(7.9g，77％收率)。esi ms m/z[m+na]+536.4。[0568]扩充例61. 4‑(双(2‑(2‑，2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酸(161)的合成。[0569][0570]将化合物160(3.0g，5.8mmol)和三甲基锡烷醇(4.8g，26.4mmol)的1，2‑二氯乙烷(150ml)溶液在80℃下，回流8小时，然后冷却至室温，将残余物通过短硅胶柱纯化，用二氯甲烷/甲醇洗脱以颤抖过量的氢氧化三甲基锡。然后合并各组分，浓缩并用dma和甲苯稀释，加热至120℃并搅动过夜。将反馈混杂物上样到硅胶柱上，并用5‑10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(1.62g，76％收率)。esi ms m/z[m+na]+386.2。[0571]扩充例62.(s)‑34‑(4‑(双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧代‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑叔丁基酯(163)的合成。[0572][0573]向化合物161(1.62g，4.20mmol)和化合物141(2.71g，3.82mmol)的dma(20ml)溶液中，加入edc·hcl(0.81g，4.20mmol)。将反馈物在室温搅动过夜，然后倒入水(50ml)中，并用乙酸乙酯(3×40ml)萃取。合并有机相，用盐水(40ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(10‑50％乙酸乙酯/石油醚)，得到无色油状物(3.20g，80％收率)。esi ms m/z 1057.85([m+h]+)。[0574]扩充例63.(s)‑34‑(4‑(双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧杂‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酸(164)的合成。[0575][0576]将化合物163(3.20g，3.03mmol)的甲酸(10ml)溶液在室温搅动过夜。然后将溶液浓缩并与甲苯共蒸三次，得到无色油状物(3.00g，粗居品)，无需进一步纯化即可使用。esi ms m/z 1001.50([m+h]+)。[0577]扩充例64.(s)‑2，5‑二氧吡咯烷‑1‑基34‑(4‑(双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁酰胺基)‑28，35‑二氧代‑2，5，8，11，14，17，20，23，26‑九氧代‑29，36‑二氮杂四十烷‑40‑酯(165)的合成。[0578][0579]向化合物164(3.00g，粗居品，3.03mmol)的dma(15.0ml)溶液中，加入nhs(0.38g，3.33mmol)和edc·hcl(0.87g，4.55mmol)。在室温下赓续搅动2小时，然后用水(15ml)稀释并用乙酸乙酯(3×30ml)萃取。合并有机相并用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(10‑50％乙酸乙酯/石油醚)，得到无色油状物(2.90g，90％收率)。esi ms m/z 1098.50([m+h]+)。[0580]扩充例65.化合物166的合成。[0581][0582]向化合物42(50mg，0.0565mmol)和化合物165(93mg，1.5eq)的酒精(10ml)溶液中，加入0.1m nah2po4(10ml)并搅动30分钟。将反馈物浓缩并通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到白色泡沫(63mg，60％收率)。esi ms m/z1868.80([m+h]+)。[0583]扩充例66. 14‑(苄氧基)‑14‑氧代十四烷酸(183)的合成。[0584][0585]向十四烷二酸(2.06g，8mmol)的dmf(30ml)溶液中加入k2co3(1.1g，8mmol)和bnbr(1.36g，8mmol)。将混杂物在室温搅动过夜，然后浓缩，并通过柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到标题化合物183(1.2g，45％收率)。esi ms m/z 349.23([m+h]+)。[0586]扩充例67. 3‑(2‑(2‑(2‑(2‑羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁基酯(185)的合成。[0587][0588]向2，2'‑(乙烷‑1，2‑二基双(氧基))二酒精(55.0ml，410.75mmol，3.0eq)的无水thf(200ml)溶液中加入钠(0.1g)。搅动混杂物直至钠隐藏，然后滴加丙烯酸叔丁酯(20.0ml，137.79mmol，1.0eq)。将混杂物搅动过夜，然后在0℃下用盐酸溶液(20.0ml，1n)淬灭。通过旋转蒸发颤抖thf，加入盐水(300ml)，并将所得混杂物用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。有机层用盐水(3×300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到无色油状物(30.20g，79.0％收率)，无需进一步纯化即可使用。ms esi m/z 278.17([m+h]+)。[0589]扩充例68. 3‑(2‑(2‑(2‑(2‑(甲苯磺酰氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁酯(186)的合成。[0590][0591]在0℃下，向3‑(2‑(2‑(2‑(2‑(2‑羟基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁酯(30.20g，108.5mmol，1.0eq)和tscl(41.37g，217.0mmol，2.0eq)的无水dcm(220ml)中，加入tea(30.0ml，217.0mmol，2.0eq)。将该混杂物在室温搅动过夜，然后用水(3×300ml)和盐水(300ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并通过硅胶柱纯化(3∶1己烷/乙酸乙酯)，得到无色油状物(39.4g，84.0％收率)。ms esi m/z 433.28([m+h]+)。[0592]扩充例69.叔丁基3‑(2‑(2‑(2‑(2‑叠氮基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸酯(187)的合成。[0593][0594]向3‑(2‑(2‑(2‑(2‑(甲苯磺酰基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁基酯(39.4g，91.1mmol，1.0eq)的无水dmf(100ml)溶液中加入nan3(20.67g，316.6mmol，3.5eq)。将混杂物在室温下搅动过夜。加入水(500ml)，并用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。用水(3×900ml)和盐水(900ml)洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并通过硅胶柱(5：1己烷/乙酸乙酯)纯化，得到黄色油状物(23.8g，85.53％收率)。ms esi m/z 326.2([m+na]+)。[0595]扩充例70. 3‑(2‑(2‑(2‑(2‑氨基乙氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸叔丁酯(188)的合成。[0596][0597]将raney‑ni(7.5g，悬浮于水中)用水(三次)和异丙醇(三次)洗涤，并与化合物187(5.0g，16.5mmol)的异丙醇混杂。将混杂物在h2气球下于室温搅动16小时，过滤，然后在硅藻土垫上过滤，用异丙醇洗涤滤垫。浓缩滤液，并通过柱色谱法纯化(5‑25％甲醇/二氯甲烷)，得到浅黄色油状物(2.60g，57％收率)。ms esi m/z279.19([m+h]+)。[0598]扩充例71. 27‑苄基‑1‑叔丁基‑14‑氧代‑4，7，10‑三氧杂‑13‑氮杂二十七烷‑1，27‑二酸酯(189)的合成。[0599][0600]向化合物188(2.60g，9.35mmol)和化合物183的二氯甲烷(50ml)溶液中加入edc·hcl(2.15g，11.2mmol)和dipea(3.6ml，20.6mmol)。将反馈混杂物在室温赓续搅动1小时，然后用50ml二氯甲烷稀释，倒入装有50ml水的分液漏斗中。分离有机相，用盐水(50ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)，得到标题化合物189(4.94g，87％收率)。ms esi m/z 608.40([m+h]+)。[0601]扩充例72. 3，16‑二氧代‑1‑苯基‑2，20，23，26‑四氧杂‑17‑氮杂二十九烷‑29‑酸(190)的合成。[0602][0603]向化合物189(4.94g，8.14mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入tfa(20ml)。将反馈在室温搅动1小时，然后浓缩至干，并与二氯甲烷浓缩两次，并将残余物置于泵上，得到化合物190(4.50g，粗居品)。esi ms m/z 552.35([m+h]+)。[0604]扩充例73. 40‑苄基1‑叔丁基‑14，27‑二氧代‑4，7，10，17，20，23‑六氧杂‑13，26‑二氮杂四十烷‑1，40‑二酸酯(191)的合成。[0605][0606]向化合物190(4.50g，粗居品，8.14mmol)和化合物188(1.95g，7.00mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入edc·hcl(1.56g，8.14mmol)和dipea(2.7ml，15.4mmol)。将反馈混杂物在室温赓续搅动1小时，然后用50ml二氯甲烷稀释，倒入装有50ml水的分液漏斗中。分离有机相，用盐水(50ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)，得到标题化合物191(5.22g，92％收率)。ms esi m/z 811.52([m+h]+)。[0607]扩充例74. 3，16，29‑三氧代‑1‑苯基‑2，20，23，26，33，36，39‑七氧杂‑17，30‑二氮杂四十二烷‑42‑酸(192)的合成。[0608][0609]向化合物191(5.22g，6.44mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入tfa(15ml)。将反馈在室温搅动1小时，然后浓缩至干，并与二氯甲烷共浓缩两次，并将残余物置于泵上，得到化合物192(4.90g，粗居品)。esi ms m/z 755.46([m+h]+)。[0610]扩充例75. 40‑苄基1‑(2，5‑二氧吡咯烷‑1‑基)14，27‑二氧代‑4，7，10，17，20，23‑六氧杂‑13，26‑二氮杂四十烷‑1，40‑二酸酯(193)的合成。[0611][0612]向化合物192(4.90g，粗居品，6.44mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入nhs(0.81g，7.08mmol)，edc·hcl(1.85g，9.66mmol)，随后加入dipea(2.8ml，16.1mmol)。将反馈搅动2小时，然后用水(50ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并的有机相用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(10‑50％乙酸乙酯/石油醚)，得到无色油状物(4.90g，90％收率)。esi ms m/z 852.48([m+h]+)。[0613]扩充例76. 1‑((2，5‑二氧代吡咯烷‑1‑基)氧基)‑1，14，27‑三氧代‑4，7，10，17，20，23‑六氧杂‑13，26‑二氮杂四十烷‑40‑酸(194)的合成。[0614][0615]在氢化瓶中，向化合物193(4.90g，5.75mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入pd/c(10wt％，0.20g)，催化加氢(1atm h2)搅动过夜，通过硅藻土(助滤剂)过滤，并将滤液浓缩，得到化合物194(4.50g，收率＞100％)。esi ms m/z 762.44([m+h]+)。[0616]扩充例77.化合物195的合成。[0617][0618]向化合物56(40mg，1.5eq)和化合物144(50mg，1.5eq)的酒精(10ml)溶液中，加入0.1m nah2po4(10ml)并搅动30分钟。将反馈物浓缩并通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到白色泡沫(31mg，40％收率)。esi ms m/z 1704.80([m+h]+)。[0619]扩充例78.化合物196的合成。[0620][0621]向化合物195(31mg，0.0182mmol)和化合物194(17mg，0.0218mmol)的dma(10ml)混杂物中加入dipea(5μl，0.0273mmol)。将反馈物在室温搅动过夜，然后浓缩，并通过制备型hplc(乙腈/水)纯化，得到白色泡沫(26mg，61％收率)。esi ms m/z 2351.60([m+h]+)。[0622]扩充例79.(6s，13s)‑二叔丁基9，10‑双(((苄氧基)羰基)氨基)‑5，8，11，14‑四氧代‑6，13‑双(4‑(((2‑(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丁基)‑4，7，12，15‑四氮杂十八烷‑1，18‑二酸酯(209)的合成。[0623][0624]向(s)‑叔丁基12‑氨基‑2，2‑二甲基‑6，13‑二氧代‑5‑氧杂‑7，14‑二氮杂‑2‑硅十七烷‑17‑酯(6.02g，14.4mmol)和2，3‑双((((苄氧基)羰基)氨基)琥珀酸(5.00g，12.0mmol)的dma(60ml)溶液中加入edc·hcl(2.76g，14.4mmol)和dipea(4.7ml，26.4mmol)。将反馈混杂物在室温搅动过夜，然后用150ml二氯甲烷稀释，倒入装有100ml水的分液漏斗中。分离有机相，用盐水(2×50ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(10‑80％乙酸乙酯/石油醚)，得到标题化合物209(12.4g，85％收率)。esi ms m/z 1215.63([m+h]+)。[0625]扩充例80.(6s，13s)‑二叔丁基9，10‑二氨基‑5，8，11，14‑四氧代‑6，13‑双(4‑((((2‑(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丁基)‑4，7，12，15‑四氮杂十八烷‑1，18‑二酸酯(210)的合成。[0626][0627]在氢化瓶中，将化合物209(12.4g，10.2mmol)的甲醇(50ml)溶液和pd/c(10wt％，0.10g)的混杂物飘荡2小时，通过硅藻土(助滤剂)过滤，并将滤液浓缩，得到为无色油状物的化合物210(9.47g，98％收率)。esi ms m/z 947.56([m+h]+)。[0628]扩充例81.(6s，13s)‑二叔丁基9，10‑双(3‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丙酰胺基)‑5，8，11，14‑四氧代‑6，13‑双(4‑((((2‑(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丁基)‑4，7，12，15‑四氮杂十八烷‑1，18‑二酸酯(211)的合成。[0629][0630]向化合物210(9.47g，10.0mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入nhs(1.39g，12.0mmol)，edc·hcl(2.30g，12.0mmol)，dipea(3.8ml，22.0mmol)。将反馈搅动2小时，然后用水(50ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。合并有机相并用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(10‑80％乙酸乙酯/石油醚)，得到无色油状物(9.49g，76％收率)。esi ms m/z 1249.72([m+h]+)。[0631]扩充例82.(6s，13s)‑9，10‑双(3‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丙酰胺基)‑5，8，11，14‑四氧代‑6，13‑双(4‑((((2‑(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)丁基)‑4，7，12，15‑四氮杂十八烷‑1，18‑二酸酯(212)的合成。[0632][0633]在0℃下，将化合物211(9.49g，7.60mmol)的thf(15ml)溶液和4n盐酸(2ml)反馈30分钟，然后浓缩，上样到短硅胶柱上，用0‑15％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到无色油状物(8.50g，90％收率)。esi ms m/z 1249.72([m+h]+)。[0634]扩充例83.化合物213的合成。[0635][0636]向化合物212(139.0mg，0.111mmol)和化合物52(50.0mg，0.0555mmol)的dmf(10ml)溶液中加入tbtu(35.6mg，0.111mmol)，dipea(20.0μl，0.111mmol)，并将混杂物在室温搅动2小时。在高真空下颤抖dmf后，将残余物通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到无色油状物(140.1mg，63％收率)。esi ms m/z2002.84([m+h]+)。[0637]扩充例84.化合物214的合成。[0638][0639]在0℃下，将化合物213(140mg，0.0699mmol)的thf(10ml)溶液与tbaf(1.0m的thf，350μl)反馈30分钟，然后浓缩，并通过短硅胶柱纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)得到无色油状物(100.3mg，88％收率)。esi ms m/z 1714.72([m+h]+)。[0640]扩充例85.化合物215的合成。[0641][0642]将化合物214(99.8mg，0.0583mmol)和化合物194(110.2mg，0.146mmol)在thf(10ml)和磷酸盐缓冲溶液(10ml，0.5m，ph 7.7)的混杂物搅动过夜，然后浓缩，并通过制备型hplc(乙腈/水)纯化，得到白色泡沫(79.2mg，45％收率)。esi ms m/z 3007.56([m+h]+)。[0643]扩充例86. 2‑(1，3‑二氧代异吲哚‑2‑基)乙酰氯(223)的合成。[0644][0645]在室温下向n‑邻苯二甲酰基甘氨酸(10.0g，48.7mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液中加入草酰氯(6.3ml，73.1mmol)，之后滴加dmf。将反馈物搅动2小时，然后浓缩，得到黄色固体的化合物223(10.8g)。[0646]扩充例87. 2‑(2‑(1，3‑二氧代异吲哚啉‑2‑基)乙酰基)肼基羧酸叔丁酯(224)的合成。[0647][0648]向叔丁氧羰基肼(7.08.g，53.5mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中加入et3n(13.5ml，97.4mmol)，然后在0℃下加入化合物223(10.8g，48.7mmol)。将反馈在室温搅动30分钟，倒入冰水(100ml)中，并用二氯甲烷(3×100ml)萃取。用水(100ml)和盐水(100ml)洗涤合并的有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到白色固体(15.5g，100％收率)。esi ms m/z 320.12([m+h]+)。[0649]扩充例88. 2‑(1，3‑二氧异吲哚‑2‑基)乙酰肼(225)的合成。[0650][0651]将化合物224(15.5g，48.7mmol)溶解于二氯甲烷(150ml)中，并在室温下和tfa(50ml)反馈1小时，然后浓缩，得到白色固体(10.6g，100％收率)。esi ms m/z 220.06([m+h]+)。[0652]扩充例89. 2‑(1，3‑二氧代异吲哚啉‑2‑基)‑n'‑(2‑(1，3‑二氧代异吲哚啉‑2‑基)乙酰基)乙酰肼(226)的合成。[0653][0654]在0℃下，向化合物225(10.6g，48.7mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中加入et3n(13.5ml，97.4mmol)和化合物223(10.8g，48.7mmol)。将反馈物升温至室温搅动过夜。通过过滤收罗千里淀物并将其悬浮在水(100ml)中，搅动20分钟。再次过滤得到化合物218(15.7g，80％收率)。esi ms m/z 407.09([m+h]+)。[0655]扩充例90. 2，2'‑(1，2‑双(2‑(1，3‑二氧代异吲哚啉‑2‑基)乙酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸二叔丁基酯(227)的合成。[0656][0657]在0℃下，将nah(0.5g，12.3mmol)分批加入到化合物226(2.0g，4.92mmol)的dmf(40ml)溶液中。将该混杂物加热至室温并搅动3小时。之后，加入溴乙酸叔丁酯(2.0g，10.3mmol)，将反馈搅动过夜，然后倒入冰水(100ml)中，并用二氯甲烷(3×50ml)萃取。用水(50ml)，盐水(50ml)洗涤合并的有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，通过硅胶柱纯化，得到白色固体(1.5g，50％收率)。esi ms m/z 635.23([m+h]+)。[0658]扩充例91. 2，2'‑(1，2‑双(2‑氨基乙酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸二叔丁基酯(228)的合成。[0659][0660]将化合物227(1.5g，2.36mmol)和肼(442mg，7.08mmol)在酒精(30ml)中的混杂物回流1小时，然后冷却至室温并过滤。将滤液浓缩，用乙酸乙酯(20ml)稀释，再次过滤。浓缩滤液，得到白色固体(750mg，85％收率)。esi ms m/z375.22([m+h]+)。[0661]扩充例92. 2，2'‑(1，2‑双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸二叔丁基酯(229)的合成。[0662][0663]将化合物228(750mg，2mmol)的thf(2ml)溶液加入nahco3水溶液(30ml)，冷却至0℃，然后加入n‑甲氧基羰基马来酰亚胺(622mg，4mmol)将反馈在0℃下搅动1小时。过滤收罗白色固体(854mg，80％收率)。esi ms m/z 535.20([m+h]+)。[0664]扩充例93. 2，2'‑(1，2‑双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸(230)的合成。[0665][0666]将化合物229(854mg，1.6mmol)溶解于二氯甲烷(3ml)中，并在室温下和tfa(3ml)反馈2小时。然后将反馈浓缩，得到化合物230(675mg，100％收率)。esi ms m/z 423.07([m+h]+)。[0667]扩充例94. 4，4'‑((2，2'‑(1，2‑双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙酰基)肼‑1，2‑二基)双(乙酰基))双(氮杂二基))二丁酸二叔丁基酯(231)的合成。[0668][0669]在0℃下，向化合物230(200mg，0.47mmol)的dmf(5ml)溶液中加入4‑氨基丁酸叔丁酯(158mg，0.99mmol)和edc(189.7mg，0.99mmol)。将反馈物升温至室温，搅动过夜，倒入冰水中，用二氯甲烷(3×10ml)萃取。合并有机相，用1n盐酸(5ml)，水(5ml)，盐水(5ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到白色固体(330mg，100％收率)。[0670]扩充例95.双(2，5‑二氧代吡咯烷‑1‑基)4，4'‑((2，2'‑(1，2‑双(2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙酰基)肼‑1，2‑二基))双(氮杂二基))二丁酸酯(233)的合成。[0671][0672]将化合物231(330mg，0.47mmol)溶解于二氯甲烷(3ml)中，并在室温下与tfa(3ml)反馈2小时。将反馈物浓缩并从头溶解在dmf(5ml)中，并冷却至0℃，按次加入nhs(113mg，0.98mmol)和edc(189mg，0.98mmol)。将反馈物升温至室温，搅动过夜，倒入冰水中，用二氯甲烷(3×20ml)萃取。用水(5ml)，盐水(5ml)洗涤合并的有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到白色固体(369mg，100％收率)。esi ms m/z 787.21([m+h]+)。[0673]扩充例96.(s)‑48‑((((苄氧基)羰基)氨基)‑3，16，29，42‑四氧代‑1‑苯基‑2，20，23，26，33，36，39‑七氧杂‑17，30，43‑三氮杂四十九烷‑49‑酸(235)的合成。[0674][0675]在0℃下，向化合物192(1.00g，1.32mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，加入hatu(0.50g，1.32mmol)和tea(0.06ml，1.32mmol)。将反馈在0℃下搅动30分钟，然后加入z‑lys‑oh(0.40g，1.43mmol)。将反馈搅动1小时，然后用水(20ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×30ml)萃取。合并有机相并用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)，得到无色油状物(1.28g，95％收率)。esi ms m/z 1017.60([m+h]+)。[0676]扩充例97.(s)‑47‑苄基1‑(2，5‑二氧代吡咯烷‑1‑基)2‑((苄氧基)羰基)氨基)‑8，21，34‑三氧代‑11，14，17，24，27，30‑六氧杂‑7，20，33‑三氮杂四十七烷‑1，47‑二酸酯(236)的合成。[0677][0678]向化合物235(1.28g，1.26mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入nhs(0.17g，1.51mmol)，edc hcl(0.29g，1.51mmol)，随后加入tea(0.38ml，2.77mmol)。将反馈搅动2小时，然后用水(20ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×15ml)萃取。合并的有机相用盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(0‑10％甲醇/二氯甲烷)，得到无色油状物(1.28g，91％收率)。esi ms m/z 1114.62([m+h]+)。[0679]扩充例98.化合物237的合成。[0680][0681]向化合物56(50.2mg，0.0555mmol)和化合物236(136.1mg，0.122mmol)的dmf(10ml)溶液中加入dipea(20μl，0.122mmol)，并将混杂物在室温搅动2小时。在高真空下颤抖dmf后，将残余物通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到无色油状物(70.3mg，44％收率)。esi ms m/z 2899.80([m+h]+)。[0682]扩充例99.化合物238的合成。[0683][0684]在氢化瓶中，将化合物237(70.0mg，0.0241mmol)的甲醇(50ml)溶液与pd/c(10wt％，145mg)催化加氢(1atm h2)反馈2小时，通过硅藻土(助滤剂)过滤，并将滤液浓缩，得到化合物238(65mg，收率＞100％)。esi ms m/z 2631.63([m+h]+)。[0685]扩充例100.化合物239的合成。[0686][0687]将化合物238(65mg，0.0247mmol)和化合物233(29mg，0.0371mmol)在etoh(10ml)和磷酸盐缓冲溶液(10ml，0.5m，ph 7.2)中的混杂物搅动过夜，然后浓缩，并通过制备型hplc(乙腈/水)纯化，得到白色泡沫(28.3mg，36％收率)。esi ms m/z 3187.60([m+h]+)。[0688]扩充例101. 1，2‑双(2‑(叔丁氧基)‑2‑氧乙基)肼‑1，2‑二羧酸二叔丁基酯的合成。[0689][0690]向肼‑1，2‑二羧酸二叔丁基酯(8.01g，34.4mmol)的dmf(150ml)溶液中，加入nah(60％，2.76g，68.8mmol)。在室温搅动30分钟后，加入2‑溴乙酸二叔丁基酯(14.01g，72.1mmol)。将混杂物搅动过夜，加入甲醇(3ml)淬灭，浓缩，用乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)稀释，分离，并将水层用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。合并有机层，用硫酸镁干燥，过滤，浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷1∶5至1∶3)，得到标题化合物(12.98g，82％收率)，为无色油状物。ms esi m/z c22h41n2o8[m+h]+狡计值461.28，实测值461.40。[0691]扩充例102. 2，2'‑(肼‑1，2‑二基)二乙酸的合成。[0692][0693]向1，2‑二(2‑(叔丁氧基)‑2‑氧乙基)肼‑1，2‑二羧酸二叔丁基酯(6.51g，14.14mmol)的1，4‑二恶烷(40ml)溶液中，加入盐酸(12m，10ml)。将混杂物搅动30分钟，用二恶烷(20ml)和甲苯(40ml)稀释，浓缩并与二恶烷(20ml)和甲苯(40ml)浓缩至干，得到粗制的标题居品，用于下一步，无需进一步坐褥(2.15g，103％收率，93％纯度)。ms esi m/zc4h9n2o4[m+h]+狡计值149.05，实测值149.40。[0694]扩充例103. 2，2'‑(1，2‑双((e)‑3‑溴丙烯酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸的合成。[0695][0696]向2，2'‑(肼‑1，2‑二基)二乙酸(1.10g，7.43mmol)的thf(50ml)和nah2po4(0.1m，80ml，ph 6.0)的混杂溶液中，加入(e)‑3‑溴丙烯酰基溴(5.01g，23.60mmol)。将混杂物搅动6小时，浓缩并在硅胶柱上纯化，用含有3％甲酸的水/乙腈(1∶9)洗脱，得到标题化合物(2.35g，77％收率，93％纯度)。ms esi m/zc10h11br2n2o6[m+h]+狡计值412.89，实测值413.50。[0697]扩充例104. 2，2'‑(1，2‑双((e)‑3‑溴丙烯酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酰氯的合成。[0698][0699]向2，2'‑(1，2‑双((e)‑3‑溴丙烯酰基)肼‑1，2‑二基)二乙酸(210mg，0.509mmol)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入(cocl)2(505mg，4.01mmol)，然后加入0.040ml dmf。在室温搅动2小时后，将混杂物浓缩并与二氯乙烷(2×20ml)和甲苯(2×15ml)共同浓缩至干，得到标题粗居品(不踏实)，用于下一步，无需进一步纯化(245mg，107％收率)。ms esi m/z c10h9br2cl2n2o4[m+h]+狡计值448.82，450.82，452.82，454.82，实测值448.60，450.60，452.60，454.60。[0700]扩充例105. 2，8‑二氧代‑1，5‑恶唑烷‑5‑羧酸叔丁基酯的合成。[0701][0702]在4℃下，在1小时内，向3，3'‑氮杂二基二丙酸(10.00g，62.08mmol)的1.0mnaoh(300ml)溶液中加入二叔丁基二碳酸酯(22.10g，101.3mmol)的thf(200ml)溶液，加入完成后，将混杂物在4℃下搅动2小时。将混杂物用0.2m h3po4留心酸化至ph4，真空浓缩，用二氯甲烷萃取，经na2so4干燥，浓缩，并用快速硅胶色谱法纯化，用醋酸/甲醇/二氯甲烷(0.01：1：5)洗脱，得到3，3′‑((叔丁氧羰基)氮杂二基)二丙酸(13.62g，84％收率)。esi ms m/z c11h19no6[m+h]+狡计值262.27；实测值262.40。[0703]在0℃下，向3，3'‑((叔丁氧基羰基)氮杂二基)二丙酸(8.0g，30.6mmol)的二氯甲烷(500ml)溶液中加入五氧化二磷(8.70g，61.30mmol)。将混杂物在0℃下搅动2小时，然后在室温下赓续搅动1小时，通过短硅胶柱过滤，并用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶6)冲洗该柱。浓缩滤液，并用乙酸乙酯/正己烷打浆，得到标题化合物(5.64g，74％收率)。esi ms m/z c11h17no5[m+h]+，狡计值244.11；实测值244.30。[0704]扩充例106. 2，5‑二氧杂吡咯烷‑1‑基丙烯酸酯的合成。[0705][0706]将丙烯酸(5.00g，71.4mmol)，nhs(9.01g，78.3mmol)和edc(20.0g，104.1mmol)的二氯甲烷(150ml)溶液和dipea(5ml，28.7mmol)搅动过夜，浓缩并纯化通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷1∶4)，得到标题化合物(9.30g，79％收率)，为无色油状物。1h nmr(500mhz，cdcl3)δ2.68(s，1h)，2.61(s，4h)。ms esi m/z c7h5nano4[m+na]+狡计值190.02，实测值190.20。[0707]扩充例107. 2‑丙烯酰肼羧酸叔丁基酯的合成。[0708][0709]将丙烯酸(5.00g，71.4mmol)，叔丁基肼羧酸酯(9.45g，71.5mmol)和edc(20.0g，104.1mmol)的二氯甲烷(150ml)溶液和dipea(5ml，28.7mmol)搅动过夜，浓缩并纯化通过硅胶柱色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷1∶5)，得到标题化合物(7.92g，84％收率)，为无色油状物。1h nmr(500mhz，cdcl3)δ8.76(m，2h)，2.68(s，1h)，1.39(s，9h)。ms esi m/z c5h12nan2o2[m+na]+狡计值155.09，实测值155.26。[0710]扩充例108.丙烯酰肼盐酸盐的合成。[0711][0712]在4℃下，将2‑丙烯酰肼羧酸叔丁基酯(4.01g，30.35mmol)溶解在1，4‑二恶烷(12ml)并与4ml盐酸(浓)反馈。将混杂物搅动30分钟，用二恶烷(30ml)和甲苯(30ml)稀释并在真空下浓缩。将粗混杂物在硅胶上纯化，使用甲醇(5％至10％)的二氯甲烷溶液(含1％甲酸)洗脱，得到标题化合物(2.11g，收率83％)，esi ms m/z c3h5n2o[m+h]+，狡计值85.03；实测值85.30。[0713]扩充例109. 4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代1h‑吡咯‑1‑基)丁酸的合成。[0714][0715]向马来酸酐(268g，2.73mol)的乙酸(1l)溶液中，加入4‑氨基丁酸(285g，2.76mol)。在室温搅动30分钟，将反馈物回流1.5小时，冷却至室温。真空浓缩得到残余物，溶于乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将粗居品从乙酸乙酯和石油醚中结晶，得到白色固体(400g，80％收率)。1h nmr(500mhz，cdcl3)δ6.71(s，2h)，3.60(t，j＝6.7hz，2h)，2.38(t，j＝7.3hz，2h)，2.00–1.84(m，2h)。[0716]扩充例110. 2，5‑二氧吡咯烷‑1‑基‑4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酸酯的合成。[0717][0718]在室温下，将4‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酸(400g，2.18mol，1.0eq)溶解在二氯甲烷(1.5l)中，向其中加入n‑羟基琥珀酰亚胺(276g，2.40mmol，1.1eq)和dic(303g，2.40mol，1.1eq)，搅动过夜。将反馈浓缩并通过柱色谱法(1：2石油醚/乙酸乙酯)纯化，得到白色固体的nhs酯(382g，63％收率)。1h nmr(500mhz，cdcl3)δ6.74(s，2h)，3.67(t，j＝6.8hz，2h)，2.85(s，4h)，2.68(t，j＝7.5hz，2h)，2.13–2.03(m，2h)。[0719]扩充例111.化合物s‑1的合成(四肢对照的可偶联的鹅膏毒素化合物)。[0720][0721]向2，5‑二氧吡咯烷‑1‑基4‑(2，5‑二氧‑2，5‑二氢‑1h‑吡咯‑1‑基)丁酸酯125(20.2mg，0.07mmol)和化合物69(15.1mg，0.0172mmol)的dmf(10ml)溶液中加入dipea(15μl，5eq)。将反馈物在室温下搅动过夜，然后浓缩，通过制备型hplc纯化(乙腈/水)，得到呈白色泡沫的化合物s‑1(15.0mg，82％收率)。esi ms m/z 1052.60([m+h]+)。[0722]扩充例112. 3‑((2‑氨基乙基)氨基)丙酸叔丁基酯的合成。[0723][0724]在45℃下，将丙烯酸叔丁酯(12.81g，0.10mmol)和乙基‑1，2‑二胺(24.3g，0.40mol)的thf(150ml)溶液搅动24小时。浓缩混杂物，并在al2o3柱上纯化，用三乙胺/甲醇/二氯甲烷(5∶15％∶80％)洗脱，得到标题化合物(17.50g，92％收率)。esi ms m/z 189.20([m+h]+)。[0725]扩充例113. 3‑(2‑氨基乙基)氨基)丙酸盐酸盐的合成。[0726][0727]将3‑(((2‑氨基乙基)氨基)丙酸叔丁基酯(17.00g，90.33mmol)的1，4‑二恶烷(50ml)溶液与浓盐酸(15ml)反馈。将混杂物在室温搅动30分钟，浓缩并用纯化水(150ml)和乙酸乙酯/正己烷(40ml，1∶5)稀释。分离混杂物，并用水(2×10ml)萃取有机层。将水层浓缩并在真空泵上干燥，得到标题化合物(18.70g，100％收率，并通过lc‑ms分析纯度为96％)。esi ms m/z 133.20([m+h]+)。[0728]扩充例114. 3‑((2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑丙酸的合成。[0729][0730]在0℃下，向3‑((2‑氨基乙基)氨基)丙酸(18.70g，90.33mmol)的thf(150ml)溶液中加入马来酸酐(8.85g，90.33mmol)。将混杂物在0‑4℃下搅动4小时，浓缩，得到(z)‑4‑((2‑(((2‑羧乙基)氨基)乙基)氨基)‑4‑氧代丁基‑2‑烯酸，居品通过lc‑ms阐述。然后向其中加入甲苯(150ml)和dma(50ml)，并在90℃下用dean‑stark回流。在收罗器中收罗30ml溶剂后，加入hmds(六甲基二硅氮烷，9.0ml，43.15mmol)和氯化锌(16ml，1.0m乙醚溶液)。将混杂物加热至115‑125℃，并通过dean‑stark收罗甲苯。将反馈混杂物在120℃下回流6小时。在此时代，加入2×40ml无水甲苯，以保持混杂物体积在50ml阁下。然后冷却混杂物，并加入1ml 1:10盐酸(浓)/甲醇。浓缩混杂物，并在硅胶柱上纯化，用水/甲醇(1:15)洗脱，并在真空泵上干燥，得到14.75g的标题化合物(77.0％收率)。esi ms m/z 213.10([m+h]+)。[0731]扩充例115. 2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷‑25‑基4‑甲基苯磺酸酯的合成。[0732][0733]向2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷‑25‑醇(50.0g，0.130mol)的dcm(200ml)溶液和吡啶(100ml)中加入tscl(30.2g，0.159mol)。将混杂物搅动过夜，浓缩并在硅胶柱上纯化，用丙酮/二氯甲烷(1∶1至4∶1)洗脱，并在真空泵上干燥，得到标题化合物57.34g(82.0％收率)。esi ms m/z 539.40([m+h]+)。[0734]扩充例116.s‑2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷‑25‑基硫代乙酸酯的合成。[0735][0736]向2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷‑25‑基4‑甲基苯磺酸酯(57.30g，0.106mol)的thf(300ml)和dipea(50ml)混杂物中，加入hsac(10.0g，0.131mol)。将混杂物搅动过夜，浓缩并在硅胶柱上纯化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶1至4∶1)洗脱，并在真空泵上干燥，得到标题化合物40.51g(86％收率)。esi ms m/z 443.35([m+h]+)。[0737]扩充例117. 2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧代二十五烷‑25‑磺酸的合成[0738][0739]在35℃下，向乙酸(200ml)和30％过氧化氢(100ml)的混杂物中加入s‑2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧代二十五烷‑25‑基硫代乙酸酯(40.40g，0.091mol)，搅动过夜。浓缩混杂物，用纯水(200ml)和甲苯(150ml)稀释，分离，并将有机层用水(2×25ml)萃取。合并水溶液，蒸发并在真空泵上干燥，得到标题化合物40.50g(99％收率，通过lc‑ms分析纯度为95％)。esi ms m/z 449.30([m+h]+)。[0740]扩充例118. 3，3‑n，n‑(2”‑马来酰亚胺乙基)(2'，5'，8'，11'，14'，17'，20'，23'，26'‑九氧杂二十八烷‑28'‑亚砜)氨基丙酸(70)的合成。[0741][0742]向2，5，8，11，14，17，20，23‑八氧杂二十五烷‑25‑磺酸(20.0g，44.62mmol)的thf(100ml)和dcm(100ml)的混杂物中加入(cocl)2(25.21g，200.19mmol)和dmf(0.015ml)。将混杂物在室温搅动2小时，浓缩，与二氯甲烷/甲苯(1：1，2×50ml)浓缩，然后再溶解在thf(50ml)中。向3‑((2‑(2，5‑二氧代‑2，5‑二氢代‑1h‑吡咯‑1‑基)乙基)氨基)‑丙酸(7.50g，35.36mmol)的thf(100ml)溶液中，加入磺酰氯。将混杂物搅动过夜，浓缩并在硅胶柱上纯化，用甲醇/二氯甲烷(1∶6至1∶5)洗脱，并在真空泵上干燥，得到标题化合物14.76g(65％收率)。esi ms m/z 643.35([m+h]+)。[0743]扩充例119.n‑n‑琥珀酰亚胺3，3‑n，n‑(2”‑马来酰亚胺乙基)(2'，5'，8'，11'，14'，17'，20'，23'，26'‑九氧杂二十八烷‑28'‑亚砜)氨基丙酸酯(70a)的合成。[0744][0745]向3，3‑n，n‑(2”‑马来酰亚胺基乙基)(2'，5'，8'，11'，14'，17'，20'，23'，26'‑九氧杂二十八烷‑28'‑亚砜)氨基丙酸(70)(7.50g，11.67mmol)的thf(100ml)溶液中加入n‑羟基琥珀酰亚胺(1.50g，13.04mmol)和edc(10.10g，52.60mmol)。将混杂物搅动过夜，浓缩并在硅胶柱上纯化，用甲醇/二氯甲烷(1∶4至1∶1)洗脱，并在真空泵上干燥，得到标题化合物6.30g(73％收率)。esi ms m/z 740.40([m+h]+)。[0746]扩充例120.制备偶联物78a、146、154、167、197、198、216、240和s‑2的一般轨范。[0747]向2.0ml，ph 6.0‑8.0的10mg/ml herceptin中加入0.70‑2.0ml的100mm nah2po4的pbs缓冲液，ph 6.5‑8.5的缓冲液，tcep(14‑35μl，20mm水溶液)以及化合物71、145、153、166、195、196、215、239和s‑1(14‑28μl，20mm的dma溶液)，之后加入4‑(叠氮甲基)苯甲酸(14‑50μl，20mm，ph 7.5的pbs缓冲液)。将混杂物在室温下孵育4～18小时，然后加入dhaa(135l，50mm)。在室温下连气儿孵育过夜后，将混杂物在g‑25柱上纯化，用100mm nah2po4、50mm nacl ph 6.0～7.5缓冲液洗脱，得到12.2～18.6mg的偶联物78a、146、154、167、197、198、216、240和s‑2(85％～94％产率)(在13.4～15.8ml的nah2po4缓冲液中)。偶联物的药物/抗体比(dar)通过uplc‑qtof质谱细目为3.5‑4.2。通过sec hplc分析标明单体含量为96‑99％单体(tosoh bioscience，tskgel g3000sw，7.8mm id×30cm，0.5ml/min，100min)。[0748][0749]扩充例121.与t‑dm1比较，偶联物78a、146、154、167、197、198、216、240和s‑2的体外细胞毒性评价：[0750]用于细胞毒性测定的细胞系是东说念主胃癌细胞系nci‑n87，细胞在含有10％fbs的rpmi‑1640中滋长。测定时，将细胞(180μl，6000个细胞)加入到96孔板中的每个孔中，并在37℃，5％co2下温育24小时。然后，在妥贴的细胞培养基里，用不同浓度的测试化合物(20μl)处理细胞(总体积，0.2ml)。对照孔含有细胞和培养基但无测试化合物。将孔板在37℃和5％co2下温育120小时，然后向孔中加入mtt(5mg/ml)(20μl)，并将孔板在37℃下孵育1.5小时。留心去除培养基，然后加入dmso(180μl)，飘荡15分钟，在490nm和570nm处测量吸光度，以620nm为参考。依照以下公式狡计扼制率：扼制率％＝[1‑(分析值‑空缺对照值)/(限度值‑空缺对照值)]×100。湮灭列于表1。[0751]表1.本专利央求的her2‑鹅膏毒素同系物偶联物偏激细胞毒性(ic50)：[0752][0753][0754]扩充例122.balb/c裸鼠东说念主胃癌nci‑n87异种移植瘤模子上的体内抗肿瘤活性。[0755]在东说念主胃癌nci‑n87异种移植瘤模子上评估了偶联物78a、146、154、167、197、198、216、240和s‑2的体内疗效。五周龄的雌性balb/c小鼠(66只动物)在右肩下区域用0.1ml无血清培养基里的n‑87癌细胞(5×106个细胞/小鼠)进行皮下接种。肿瘤滋长8天后长至平均大小140mm3。然后将动物偶然分为11组(每组6只动物)。第一组小鼠四肢对照组，打针磷酸盐缓冲液(pbs)。另10组分别静脉打针6mg/kg剂量的偶联物78a、146、154、167、197、198、216、240，s‑2和t‑dm1。每3或4天(每周两次)测量肿瘤的三个维度，并使用公式：肿瘤体积＝1/2(长×宽×高)来狡计肿瘤体积。同期测量了动物的体重。沸腾以下任一条款时杀死小鼠：(1)体重减少进取打针前体重的20％；(2)肿瘤体积大于1500mm3；病态严重至无法进食和进水或(4)皮肤坏死。如果肿瘤是未可感知的，则以为小鼠是无肿瘤的。[0756]湮灭如图27所示：在剂量为6.0mg/kg时，通盘11种偶联物均未引起动物体重收缩。与pbs缓冲液比较，通盘偶联物均骄气出抗肿瘤活性。偶联物197、167和78a在体内的抗肿瘤活性与t‑dm1出奇或稍差，而偶联物154、167、198、216、240和s‑2在体内的抗肿瘤活性比t‑dm1更好。[0757]在测试的偶联物组中的通盘6/6只动物在第18天至第32‑48天实在都莫得可测量的肿瘤。当剂量为6mg/kg时对肿瘤滋长的扼制作用为：[0758][0759][0760]扩充例123.具有侧链衔接子的偶联物与t‑dm1和具有单键衔接的通例结合物(化合物s‑2)在小鼠血清中的毒性筹商。[0761]体重变化(不时是体重收缩)是动物对药物毒性的一般反馈。将6‑7周大的88只icr雌性小鼠分为11组。每组包括8只小鼠，每只小鼠分别给药偶联物216、146、154s‑2和t‑dm1，剂量为75mg/kg或150mg/kg，静脉推注。对照组(n＝8)为磷酸盐缓冲液(pbs)。在12天的实验中，对照组、偶联物216和146的75mg/kg和150mg/kg两种剂量组的小鼠体重均未缩短。在为期12天的实验中，偶联物154(s‑2)和t‑dm1的75mg/kg和150mg/kg剂量组的体重均缩短，何况在第5天不雅察到最大程度的体重着落。施用偶联物154，s‑2和t‑dm1的通盘动物骄气出剂量依赖性的体重缩短。偶联物154和s‑2的体重缩短远小于t‑dm1。t‑dm1的低剂量组的体重收缩了约10％，随后还原出奇冉冉，筹商圮绝时仍略低于对照小鼠的体重。s‑2的高剂量组体重收缩了约10％，体重还原较t‑dm1的低剂量组快。t‑dm1高剂量组的体重赓续缩短，最大时缩短了24％，何况在筹商末端时未见还原趋势。体重变化实考据明了这些鹅膏毒素偶联物与t‑dm1比较，在这些小鼠中具有更高的耐受性，何况具有本发明的支链衔接子的偶联物比通例的单参议的偶联物(s‑2)更具耐受性。三级片在线播放

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